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Sémiologie : hématologie biologique 1- hémogramme normal Pr Philippe NGUYEN Dr Sylvie DALIPHARD Dr Baptiste GAILLARD Année 2009-10.

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1 Sémiologie : hématologie biologique 1- hémogramme normal Pr Philippe NGUYEN Dr Sylvie DALIPHARD Dr Baptiste GAILLARD Année

2 Définition de lhémogramme -Numération des cellules sanguines circulantes -Blood cell count -Méthode automatisée -Valeurs de référence : distinguer le normal du pathologique -Lun des examens biologiques les plus prescrits en médecine.

3 HEMOGRAMME Nécessité dun Anticoagulant utilisé : –Les cellules doivent rester en suspension –Lanticoagulant : lEDTA, chélateur calcique Rigidifie les membranes, favorise lagglutination des plaquettes Prélèvement à jeun (optimal) : –Mais réalisable chez le sujet non à jeun (opacité) : Le bébé, Lurgence, Le patient en réanimation (alimentation parentérale par lipides)

4 HEMOGRAMME Méthode automatisée : –A partir du sang total EDTA –Quantitatif +++ –Fiabilité de la mesure, reproductibilité (coefficients de variation des mesures) –Contrôles de qualité Méthode « manuelle » : –Sang total EDTA : étalement du sang sur lame (frottis) –Coloration standard –Lecture au microscope –Contrôles de qualité –Qualitatif +++

5 PNN Ly MonoPNE Exemple : Intrument Beckmann-Coulter : mesure dimpédance GRPlqGB

6 EDTA/ Coloration MGG Bord du frottis GR Agrégat plaquettaire

7 Beckman Coulter

8 Prélèvement sur citrate même patient Beckman Coulter

9 Paramètres érythrocytaires La numération érythrocytaire a peu de valeur diagnostique (10 12 /L ou Téra/L) Lhémoglobine (g/L) reflète la capacité doxygénation et définit la notion danémie Lhématocrite (L/L) est le rapport du volume érythrocytaire sur le volume sanguin total

10 Paramètres érythrocytaires Le volume globulaire moyen (VGM) est un paramètre constant chez lindividu (hors pathologie) : érythropoïèse physiologique (« normale ») VGM = 90 fL (femto = ) Morphologie : hématies normocytaires

11 Paramètres érythrocytaires TCMH : teneur corpusculaire en hémoglobine : 29 ± 2 pg (pico = ) CCMH : concentration corpusculaire moyenne en hémoglobine : 31 à 36 % –Ne peut être supérieur à 36 % Morphologie : hématies normochromes

12 VALEURS NORMALES DE LHEMOGRAMME CHEZ LADULTE (1) HommeFemme Leucocytes (Giga/L ou 10 9 /L) 4,0 – 10 Hémoglobine (g/L)130 – Volume globulaire moyen (fL) 85 – TGMH (teneur globulaire moyenne en hémoglobine) (pg) 29 – 34 CCMH (concentration corpusculaire moyenne en hémoglobine) (% ou g/dL) 31 – 36 Plaquettes (Giga/L)150 – Numération (réalisée sur automate Coulter*) : GR/Hématocrite/variations selon lâge : se reporter aux recommandations de lANAES

13 Paramètres de renouvellement érythrocytaire Réticulocytes : ARN (coloration spécifique) –20 à 120 Giga/L –« normorégénération » hémolyse physiologique Erythroblastes circulants –Absents physiologiquement

14 HEMOGRAMME ANAES 1998 Valeurs usuelles de lhémogramme chez les enfants de –1 an (1) : 0-1 mois 1 mois 2 mois 4 mois 6 mois 9 mois 12 mois Hb (g/dL) 16,6+0,11 13,9 11,2 12,2 12,6 12,7 12,7 Limite inf. 13,4 10,7 9,4 10,3 11,1 11,4 11,3 VGM (µ3) 105,3+0,6 101,3 94,8 86,7 76,3+0,6 77,7 77,5 Limite inf

15 VALEURS NORMALES DE LHEMOGRAMME CHEZ LADULTE (2) Formule leucocytaire (réalisée sur automate Coulter*) : (Giga/L)HommeFemme Granulocytes neutrophiles 2,5 – 7,52,0 – 7,5 Lymphocytes1,0 – 4,0 Monocytes0,2 – 1,0 Granulocytes éosinophiles < 0,5 Granulocytes basophiles < 0,2 Pas de valeur diagnostique de lexpression en %

16 HEMOGRAMME ANAES 1998 Valeurs usuelles de lhémogramme chez les enfants de –1 an (2) : 0-1 mois 6 mois 12 mois Neutrophiles (10 6 /L ou Cellules/µL) Lymphocytes (10 6 /L ou Cellules/µL)

17 VARIATIONS DES VALEURS DE LHEMOGRAMME Exercice physique : - des leucocytes (repos 20 minutes) - démargination des PNN Altitude : / m - en permanence - polyglobulie Exceptionnel en France métropolitaine

18 VARIATIONS DES VALEURS DE LHEMOGRAMME 1. En fonction de lethnie : - Sujet Noir. diminution modérée de lhémoglobine - 1 g/dL ou 10 g/L sans modifications des constantes érythrocytaires ou du taux de réticulocytes. neutropénie peu importante isolée (> /L) 2. Femme enceinte : - Diminution du taux dhémoglobine/hémodilution - Hyperleucocytose : PN ( /L) - Diminution modérée du taux de plaquettes 3. Consommation dalcool « buveurs sociaux » - VGM reste dans les valeurs de référence 4. Tabac - Augmentation du taux de polynucléaires neutrophiles

19 Difficultés dinterprétation de lhémogramme Difficultés dinterprétation de la numération érythrocytaire, de la concentration dhémoglobine et de lhématocrite en cas dhémodilution –Fausse anémie (hémodilution) Thrombo-agglutination sur EDTA –Citrate

20 Satellitisme plaquettes aux PNN

21 HEMOGRAMME Facteurs de variations pré-analytiques : Liés au prélèvement –Garrot –Matériel de prélèvement Liés à léchantillon –Conservation : température ambiante, 6 h (optimal < 3 h) –Transport –Anticoagulant thromboagglutination EDTA –Hémolyse Hémoglobine (sous réserve) –Micro-caillots plaquettes Liés au patient –Hyperlipémie Hb CCMH TGMH –Erythroblastes leucocytes NB : constance du VGM/identité patient sur un délai court


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