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Utilisation du test tréhalose-maltose pour lidentification de Candida glabrata dans 3 laboratoires de diagnostic F. Parant 1, M.A. Piens 2, H. Raberin.

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1 Utilisation du test tréhalose-maltose pour lidentification de Candida glabrata dans 3 laboratoires de diagnostic F. Parant 1, M.A. Piens 2, H. Raberin 3, J. Perry 4, A.M. Freydière 1 1 Laboratoire de Microbiologie, Hôpital Debrousse, Lyon, 2 Laboratoire de Parasitologie Mycologie Médicale, Lyon, France 3 Laboratoire de Parasitologie Mycologie, Hôpital Nord, St Etienne, France, 4 Microbiology Department, Freeman Hospital, Newcastle upon Tyne, UK. Candida glabrata, une des espèces de Candida parmi les plus fréquemment isolées, a souvent une sensibilité diminuée au fluconazole. Lidentification rapide de cette espèce par le laboratoire permet au clinicien une adaptation plus rapide de lantifongithérapie. Un test tréhalose-maltose sur bandelettes, basé sur lhydrolyse rapide du tréhalose et labsence dhydrolyse du maltose, ne nécessitant aucune incubation préalable et utilisant seulement 2 à 3 colonies de levures, a été décrit récemment par Parant et al. (5). Evalué avec plus de 400 souches de collection, ce test a montré des résultats de sensibilité et de spécificité supérieurs à 95 % quelque soit le milieu de subculture (Parant et al. Poster congrès SFMM 2001 à Amiens, 3). Le but de cette étude est dévaluer ce test tréhalose-maltose dans les conditions réelles dutilisation en routine de trois laboratoires de diagnostic. Résultats - Discussion Introduction Références Matériels et méthodes Société Française de Mycologie Médicale, Mai 2002, Lyon, France 1- Chang, H.C., S.N. Leaw, A.H. Huang, T.L. Wu, and T.C. Chang Rapid identification of yeasts in positive blood cultures by a multiplex PCR method. J. Clin. Microbio. 39: Freydiere, A. M., R. Guinet, and P. Boiron Yeast identification in the clinical microbiology laboratory: phenotypical methods. Med. Mycol. 39: Freydière A.M., F. Parant, F. Noel-Baron, M. Crepy, A. Treny, H. Raberin, A. Davidson, F.C. Odds Identification of Candida glabrata by a 30-second trehalase test. J. Clin. Microbiol. (In press) 4- Jabra-Rizk, M. A., T. M. Brenner, M. Romagnoli, A. A. M. A. Baqui, W. G. Merz, W. A. Falkler, and T. F. Meiller Evaluation of a reformulated CHROMagar Candida. J. Clin. Microbiol. 39: Parant, F., A. M. Freydiere, Y. Gille, P. Boiron, and F. C. Odds A 'one minute' trehalase detection test for the identification of Candida glabrata. J. Mycol. Med. 11: Test positif (+) Identification Candida glabrata Tréhalose + Témoin - Maltose - Test négatif (-) ou ininterprétable (I) Tréhalose + Témoin - Maltose + Tréhalose +/- Témoin + Maltose +/- Identification par méthode conventionelle Tableau 1 : Comparaison des résultats didentification conventionnelle et du test tréhalose-maltose pratiqué avec des isolats subcultivés sur des milieux chromogènes différents dans 3 laboratoires. a 2 souches de C. parapsilosis, 1 de C. tropicalis et 1 de C. kefyr, b 1 souche de C. parapsilosis Test Tréhalose-Maltose Laboratoire A Laboratoire de Parasitologie Mycologie Médicale Lyon Milieu : Candida ID (bioMérieux) Identification conventionnelle : ID 32C Souches testées : Prélèvements ensemencés : * 1 C. rugosa, 1 C. holmii, 1 C. lypolitica, 1 C. norvegensis, 1 Lyposaccharomyces Laboratoire B Laboratoire de Parasitologie Mycologie Médicale Hôpital Nord, St Etienne Milieu : CHROMagar Candida (Becton Dickinson) Identification conventionnelle : ID 32C Souches testées : Prélèvements ensemencés : Laboratoire C Microbiology Department, Freeman Hospital Newcastle upon Tyne, UK Identification conventionnelle : ID 32C Prélèvements ensemencés : Milieu : Albicans ID2 (bioMérieux) Souches testées : Le test tréhalose-maltose effectué par des personnes différentes, dans 3 laboratoires différents, sur des isolats dorigines diverses et cultivés sur des milieux chromogéniques différents, montre des résultats de sensibilité supérieure à 94 % et une spécificité supérieure à 95 %. Ces résultats obtenus avec des isolats provenant pour la plupart dun primo-isolement sont très proches de ceux obtenus précédemment avec des souches de collection (3, 5). Comparativement aux galeries didentification biochimiques classiques telles que API20C AUX, Vitek YBC (2), et aux méthodes génétiques (1), le test au tréhalose-maltose permet lidentification de C. glabrata de façon fiable (spécificité comparable aux autres techniques) avec un délai de réponse plus court (quelques minutes) et un coût moindre. Lassociation du test tréhalose-maltose aux milieux chromogéniques Candida ID ou Albicans ID2 permet lidentification très rapide de 80 % des levures isolées au laboratoire. Seules 20 % des levures nécessitent alors une galerie didentification biochimique. Dans des études précédentes (Parant et al. Poster congrès SFMM 2001 à Amiens, 5), le test tréhalose-maltose effectué avec les souches cultivées sur CHROMagar Candida de CHROMagar Microbiology donnaient des résultats de sensibilité et de spécificité faibles. Par contre, dans cette étude, le test tréhalose-maltose effectué avec des souches cultivées sur le milieu CHROMagar Candida de Becton Dickinson modifié selon Jabra-Rizk et al. (4) donne de bons résultats à condition dutiliser des cultures de 48 h. Conclusion Avec ce test, le laboratoire de diagnostic peut identifier Candida glabrata : de façon fiable, simple, économique en deux minutes directement à partir du primo-isolement ce qui permet linstauration rapide dun traitement adapté. Nous remercions les techniciens des 3 laboratoires pour leur assistance, Bayer Diagnostics et Eurobio pour la fourniture gratuite des réactifs, ICN Pharmaceuticals France pour son soutien à la réalisation du poster et A. Frangin pour sa collaboration.


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