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1 Culture cellulaire Pr Pierre Jeannesson CNRS UMR 6237 UFR de Pharmacie.

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1 1 Culture cellulaire Pr Pierre Jeannesson CNRS UMR 6237 UFR de Pharmacie

2 2 Quelques points de repère dans le développement de la culture tissulaire et cellulaire Début 20 ème - Des cellules embryonnaires de poulet peuvent être maintenues en vie dan une solution saline hors du corps de lanimal - Culture de moelle épinière damphibien dans un caillot de lymphe: preuve que les axones sont produits sous forme dextension de cellules nerveuses isolées Développement des milieux de culture - Première lignée cellulaire humaine: lignée HeLa 1970 – 2000 : Premières applications - Mise au point des hybridomes et des anticorps monoclonaux - Production de cellules transfectées à léchelle industrielle et de biomolécules (protéines recombinantes) : - Culture de cellules souches embryonnaires - Développement de lingénierie cellulaire et tissulaire, de la thérapie cellulaire

3 3

4 4

5 5

6 6

7 7 Primary explant Mouse squamous cell carcinoma of skin with epithelial outgrowth

8 8 Neurons Five-day old rat olfactoy bulb cells 4 days in vitro

9 9 Skeletal muscle cells

10 10 Human leukemia cells

11 11 Trypsinization (1)

12 12 Trypsinization (2)

13 13

14 14

15 15 Applications de la culture cellulaire (1): dans le domaine de la recherche fondamentale

16 16 Applications de la culture cellulaire (2): dans le domaine biomédical et industriel 1. Domaine du diagnostic - Cytogénétique - Production danticorps monoclonaux 2. Domaine des biotechnologies et de la pharmacie - Elaboration de vaccins - Production de médicaments Criblage Effets toxiques Protéines recombinantes -Ingénierie cellulaire et tissulaire: cytocompatibilité des biomatériaux, immunothérapie cellulaire, cellules épidermiques, cellules souches embryonnaires

17 17 Evolution des cellules en culture

18 18 Finite cell line (green) Continuous cell lines (blue, red)

19 19

20 20 Transformation cellulaire Focus formation in 3T3 cells. Focus of transformed cells formed spontaneously in dense culture of 3T3 cells

21 21

22 22 Finite cell line (green) Continuous cell lines from transformed glia (blue) and metastatic melanoma (red)

23 23 Voies métaboliques des cellules Glycolyse

24 24 Plastic substrate (polystyrene): Culture vessels Petri dishes Culture flasks

25 25 Multiwell plates

26 26 Transwells w/o matrix with matrix (blue) Epithelial cells alone Transfilter coculture Separated coculture

27 27

28 28

29 29

30 30

31 31 Nano carriers

32 32 Treated surfaces

33 33

34 34

35 35

36 36

37 37 Types of microbial contamination Fungal contamination Bacterial contamination Yeast contamination

38 38 Mycoplasma contamination

39 39 Antibiotics used in cell culture

40 40 Constituents of serum


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