La présentation est en train de télécharger. S'il vous plaît, attendez

La présentation est en train de télécharger. S'il vous plaît, attendez

Cellules Tumorales Circulantes (CTC) et Cancer du Sein

Présentations similaires


Présentation au sujet: "Cellules Tumorales Circulantes (CTC) et Cancer du Sein"— Transcription de la présentation:

1 Cellules Tumorales Circulantes (CTC) et Cancer du Sein
G. Barrière, A. Riouallon, J. Renaudie, M. Tartary, M. Rigaud ASTRALAB

2 Cellules Tumorales Circulantes
CTC Décrites en par T.R. Ashworth A case of cancer in which cells similar to those in the tumour were seen in the blood after death Aust Med J , vol 14, ,1869 Définition : Cellules tumorales détectées dans le sang circulant ASTRALAB

3 Cellules Tumorales Disséminées
ou DTC Définition: Ce sont les cellules disséminées dans les organes et en particulier dans la moelle osseuse ASTRALAB

4 Nature des CTC Il existe des sous-populations de CTC
Cellules épithéliales Cellules mésenchymateuses ASTRALAB

5 EMT Processus Physiologique et Pathologique
Jean Paul Thiery, Hervé Acloque, Ruby Y.J. Huang, M. Angela Nieto Cell, November 2009, Vol 139, Issue 5, p871 ASTRALAB

6 Cellule Cancéreuse Souche (CSC) :
Transition Epithéliale Mésenchymateuse Piyush B Gupta, Christine L Chaffer & Robert A Weinberg Nature Medicine, 2009, vol 15, p1010 ASTRALAB

7 Transition Epithéliale Mésenchymateuse
Masaaki Iwatsuki et al Cancer Science, February 2010, Vol 101, Issue 2, p293 ASTRALAB

8 des Cellules Cancéreuses Souches
Caractéristiques des Cellules Cancéreuses Souches (CSC) Cellules résistantes : - aux chimiothérapies classiques - à la radiothérapie Gupta B. et al, Cell ,138, 4, , 2009 Chimiothérapie conduit à un enrichissement en CSC Levina et al, Plos One,3, p3077, 2008 ASTRALAB

9 Résistance Thérapeutique
CSC Résistance Thérapeutique Salinomycin targets breast cancer stem cells Hartmut Beug Cell, August 2009, Vol 138, Issue 4, p 623 ASTRALAB

10 Caractéristiques des CSC
Sur composés essayés pour déterminer de nouvelles thérapeutiques,4 composés présentent une sélectivité de toxicité pour les CSC: Etoposide Salinomycine Abamectine Negericine Seule l’Etoposide, inhibiteur de la topoisomérase II est utilisée actuellement Gupta B et al, Aôut 2009 ASTRALAB

11 Méthodes de détection des CTC
Système « Cell Search TM system » : Immunofluorescence et cytométrie Système AdnaTest Breast Cancer : Système immunomagnétique IMS Système Métagenex : Isolement des cellules par filtration Système Epispot : Empreintes protéiques ASTRALAB

12 Méthode AdnaGen 1- sélection des CTC ASTRALAB - EpCam, MUC1a, Muc1b
Cellules du sang Cellules tumorales Incubation avec les billes couplées aux AC 1- sélection des CTC - EpCam, MUC1a, Muc1b (Cancer associated glycans) Séparation des complexe cellules–billes de la phase liquide par un champ magnétique Lyse cellulaire Elimination des billes ASTRALAB

13 en utilisant des oligo(dT) couplés à des billes magnétiques
2- Extraction des ARNm en utilisant des oligo(dT) couplés à des billes magnétiques Transcription inverse 3- Analyse de l’expression des marqueurs spécifiques par PCR multiplexe Her2 neu GA733-2 Muc 1 ALDH1 Twist Akt2 PI3Kase ER et PR CTC CSC ASTRALAB

14 Deux études en cours 1. Primo diagnostic du cancer du sein
400 patients 2. Cancer du sein métastatique 120 patients ASTRALAB

15 1. Primo diagnostic du cancer du sein
A. Valeur pronostic des CTC B. Corrélation avec le ganglion sentinelle C. Critères de classification D. Orientation thérapeutique ASTRALAB

16 2. Cancer du sein métastatique
A. Suivi thérapeutique B. Evaluation précoce de l’efficacité des traitements C. Thérapeutique individualisée D. Utilisation pour les essais cliniques de nouvelles thérapeutiques ASTRALAB

17 Visualisation des résultats sur Agilent (Electrophorèse capillaire)
Positivité > 0,15 ng/µL Positif Négatif Muc1 Résultats - + GA733-2 Her2 ASTRALAB

18 Résultats partiels (150) Cancers du sein : primo-diagnostic
Service des docteurs Renaudie et Riouallon Arnaud Prélèvement de sang (5mL) avant opération (CTCS1) 15 jours à 3 semaines après opération (CTCS2) Accord CPP et Consentement éclairé Résultats étudiés à la fin de l’étude en regard de l’observation clinique ASTRALAB

19 Répartition des cancers du sein
Cancers du sein (n) Age moyen ans Type de tumeur Canalaire infiltrant 119 Autres 24 ND 7 Grade Scarff Bloom Richarson SBR SBR2 88 SBR3 34 ND 13 ASTRALAB

20 ClassificationTNM TNM I 50 cas
TNM IIA cas TNM IIB cas TNM IIIA cas TNM IIIB cas TNM IV cas Présence de ganglions N cas Statut hormonal ER et PR positifs 110 cas Statut Her2-neu Positifs cas Statut Triple négatif cas ASTRALAB 20

21 Identification des CTC dans le sang
Avant chirurgie Après chirurgie ASTRALAB

22 CTCS1 19 cas positifs / 150 étudiés ASTRALAB Age SBR T N M Stade
Résultat CTCS1 47 1 2 IIA Muc1 0,15 + GA 0,17 64 I GA 0,18 55 3 IIB Her2 1,92 + Muc1 2,66 + GA 1,23 76 III A Muc1 0,33 52 GA 0,21 Her 2 1,42 + Muc1 1,67 + GA 0,85 75 GA 0,17 67 Muc1 0,24 72 Muc1 0,18 GA 0,22 68 Her2 0,19 46 IV GA 0,16 73 Her2 0,39 + Muc1 0,91 + GA 0,26 Muc1 0,23 60 ? Muc1 0,17 Her2 0,15 GA 3, 3 74 Her2 0,25 81 4b IIIB 59 GA 0,19 19 cas positifs / 150 étudiés ASTRALAB

23 CTCS2 12 cas positifs / 128 étudiés
Age SBR T N M Stade Résultat CTCS2 72 2 IIA Her2 0,18 + Muc1 0,39 64 1 I Muc1 0,25 76 III A Muc1 0,33 52 Muc1 0,36 + GA 0,16 49 Muc1 0,21 47 62 Muc1 0,17 61 Her2 0,17 46 3 IV Muc1 0,19 68 IIB GA 2,26 45 0,15 Muc1 50 0,17 Muc1 12 cas positifs / 128 étudiés 6 cas positifs avant et après chirurgie 6 cas positifs après chirurgie ASTRALAB

24 Patientes ayant des CTC avant chirurgie : 19
Patientes ayant des CTC avant et après chirurgie : 6 Patientes n’ayant des CTC qu’après chirurgie : 6 CTC après chirurgie : Existence d’un foyer émetteur de cellules tumorales (Moelle osseuse, micrométastases , organe ou ganglions lymphatiques) Importance chez ces patientes d’assurer un suivi des CTC (leur persistance ou leur augmentation doit amener à des explorations complémentaires) ASTRALAB

25 Her2 neu Tumeur Her2 neu CTC
Statut Her2 neu : CTC versus Tumeur Her2 neu Tumeur Her2 neu CTC 2 Positives Positives 1 Faiblement Positive Positive 6 Négatives discordance 6 Positives 3 Positives discordance 3 Négatives Pestrin et al 2009 : Etude sur 66 cancers avancés du sein 29% des patients avec des tumeurs Her2 négatives ont des CTC Her2 positives 42% patients avec des tumeurs Her2 positives ont des CTC Her2 négatives Tewes et al : Etude sur 42 cancers métastatiques du sein ASTRALAB

26 Conclusion Résultats partiels (150)
Détection et analyse des CTC dans le sang par l’intermédiaire d’un profil moléculaire Projet 400 patientes Statistiques établies après inclusion des 400 patientes Etude finalisée après estimation de l’évolution de la maladie avec ou sans rechute Valeur pronostique, choix des thérapeutiques adaptées et individualisées après chirurgie ASTRALAB

27 Etude Cancer du Sein Métastatique : Métastases hépatiques
Muc / GA 0.35 PI3Kase 0.15 Cellule mésenchymateuse Cellule cancéreuse apoptotique Cellule cancéreuse épithéliale 15/12/09 14/01/10 11/02/10 15/03/10 N GA 1.76 Muc 0.34 TAXOL - AVASTIN Muc / GA 1.76 C+ CTC C+ EMT GA Muc PI3Kase ASTRALAB

28 ASTRALAB

29

30

31 Nous remercions : L’URCAM du Limousin et le Laboratoire Astralab qui supportent financièrement le développement de ces programmes de recherche en oncologie Les docteurs Alain Riouallon,Joel Renaudie, Robert Arnaud, Bernard Leduc et l’association 3C pour leur collaboration compétente ASTRALAB


Télécharger ppt "Cellules Tumorales Circulantes (CTC) et Cancer du Sein"

Présentations similaires


Annonces Google