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Diagnostique des Bactéries Gram Négatives dImportance Médicale.

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1 Diagnostique des Bactéries Gram Négatives dImportance Médicale

2 Bactérie Gram Négatives Representatives Cocci Gram-negative –Neisseria gonorrhoea; –Neisseria meningitis Bacilles Gram-negatifs –Famille Enterobacteriaceae Escherichia coli, Salmonella enterica, Shigella, Klebsiella spp, Proteus spp –Famille Pseudomonaceae Pseudomonas spp –Autres Morganella morganii -Flore naturelle du tractus intestinal - Anaérobies facultatif - Oxydase negative - Fermentent le glucose - Résidents naturels des sols et des eaux -Aérobies strictes - Oxydase positive - Non-fermenteurs - Flore naturelle des membranes muqueuses des tractus respiratoires et génitaux - Anaérobies facultatifs - Oxydase positive - Fermentent le glucose

3 Identification des Gram - Oxydase Pseudomonaceae Neisseriaceae Fermentation du glucose PseudomonaceaeNeisseriaceae Enterobacter Escherichia Klebsiella Serratia Proteus Salmonella Shigella Fermentation du lactose McConkey - Enterobacteriaceae Morganella Respiration aérobie

4 Identification des Gram - Lactose + Indole Escherichia Citrate (-) Enterobacter Klebsiella EnterobacterKlebsiella Citrate (+) Motilité Quelle est la source de C? Tryptophane Quelle est la source de C? Citrate

5 Identification des Gram - Lactose - H2SH2S Proteus Salmonella Uréase Shigella Serratia Shigella Citrate & Acide de sucrose ProteusSalmonella -+ Quelle est la source de C? Cystéine Quelle est la source de N? Urée, donc protéine utilisé

6 Test Métaboliques pour lIdentification des Gram - MacConkey –Milieu sélectif et différentiel –Prévient la croissance de Gram + –Fermentation du lactose (colonies rose, non-fermenteurs sont incolorées)

7 Test Métaboliques pour lIdentification des Gram - (Suite) TSI –Trois sucres Glucose (limitant) Sucrose Lactose –Protéines Cystéine –Indicateur Phénol rouge Combine de sources de C sont possible? Qu`est-ce qui est arrivé ici? #1. Utilise toujours le glucose en 1ier = source de C préféré! #2. Choisissent entre lactose, sucrose, protéine. #3.Si protéine utilisé Rxn alkaline(orange) Si sucre utilisé Rxn acidique (jaune) Si utilisé aérobie jaune en haut. Si utilisé anaérobie jaune en bas.

8 Test Métaboliques pour lIdentification des Gram - (Suite) SIM –Milieu semi-solide Permet de visualiser la motilité –Métabolisme de la cystéine Cystéine H 2 S; H 2 S+ FeSO 4 Précipité noir –Métabolisme du tryptophane (A) Tryptophane Indole+NH 4 + Pyruvate (B) Indole+Réactif de Kovac Rouge

9 Non-inoculé Non-motile H 2 S et motile Indole + - Nom du réactif utilisé? Quel utilise le tryptophane?

10 Test Métaboliques pour lIdentification des Gram - (Suite) Citrate –Source de carbone unique: Citrate Indicateur –Bromthymol bleu Utilisation du citrate génère des produits alcalins –Change du vert au bleu Seulement 1 source de carbone possible. Quel produit change la couleur à bleu? E. coli = (-) Enterobacter and Klebsiella = (+)

11 Multi Test: Enteropluri-test Tubes de tests métaboliques multiples –Utilisation dun inoculum constant –Rapide –Lecture peut être automatisé –Préparations et inconsistances normalisé Quel famille bactérienne est testé? Enterobacteriaceae PERCER DES TROUS ICI

12 Voir le vidéo au lien suivants: player_detailpage&v=l5qHyr1FULE Extra: https://www.youtube.com/watch?v=wWj 5LvLSHD8


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