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Alpes Méditerranée Etudes de cas complexes en IHE TACT - Arles 2012 V.Ferrera.

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1 Alpes Méditerranée Etudes de cas complexes en IHE TACT - Arles 2012 V.Ferrera

2 Alpes Méditerranée Etapes de validation technique de lidentification Difficultés Mélange Effet dose AG composé Panagglutination Tauto Neg Panagglutination Tauto pos avec ou sans contexte Transf

3 Alpes Méditerranée Mme ROG A. Patiente née en Suivie à lhôpital Duffaut en Avignon. Groupe: B+ Phéno: CceeK- Phéno étendu: Fya-b+ Jka-b+ S-s+ M+N+ Lea-Leb- ATCD immuno-hématologique en IHR: Dernière RAI : négative Difficulté : Mélange

4 Alpes Méditerranée Prélèvement du 8 Juillet AUTO WAD BVC nég Dépistage et identification : Présence dun anti-Jka avec concordance parfaite. Ac non éliminés : anti-S, Lea, (Lua, Cw et Kpa) Nécessité danalyses complémentaires

5 Alpes Méditerranée Panel didentification : 123

6 Alpes Méditerranée Avec les panels de référence on peut affirmer la présence dun alloAc anti-Jka mais alloAc anti-S non éliminé. Anti-Jka sur les hématies O7, O11, O12, O13 et O14. Anti-S suspecté sur des hématies: -HTZ O1, O4 et O10 Lélimination dun anti Cw, dun anti Lua et dun anti-Kpa : non réglementaire AU TO BVC BVC

7 Alpes Méditerranée Panel de référence :

8 Alpes Méditerranée Lensemble des panels didentification ne nous permet pas déliminer un anti-S car hématies Jka- toutes Ss ou ss. Aucune hématie Jka- SS. Afin déliminer un anti-S : EDCL avec des poches Jka- et SS. Anti-S suspecté en compat car réactions 3+ sur poches SS Confirmé par fixation – élution : RAI après avec anti-S EDCL Poche Jka- SSCompat3+ Poche Jka- SSCompat 3+

9 Alpes Méditerranée On peut éliminer tous les autres Ac (anti-D, C, E, c, e, K, k, Kpb, Fya, Fyb, Jkb, Leb, M, N, s, P1, et Lub). On a donc 2 allo-Ac: allo-anti-Jka + allo-anti-S. Conseil transfusionnel : CGR compatibilisés E- Kell- Jka- et S-. Conclusion

10 Alpes Méditerranée Difficulté : Effet-dose Mr VAN avec contexte transfusionnel récent Papaine non contributive : pas de corrélation technique possible

11 Alpes Méditerranée Dépistages positifs, pourrait être un anti-Fyb ?

12 Alpes Méditerranée Toutes les GR Fyb pos sont Positives ? Non, mais présence de réactions faibles. 3+/3- ? Sur les 6 hématies homozygotes testées 5 sont positives (dép compris) Hypothèses : anti-Fyb faible ? auto-anticorps faible ?

13 Alpes Méditerranée T autologue positif Lélution ne décroche pas danticorps TDA Il sagit dun contexte transfusionnel récent, est-ce que cest un auto anticorps ou un conflit ? Réalisation dune élution directe.

14 Alpes Méditerranée Demande de CGR : libération de PSL avant la fin de lexploration sur EDCL neg après avis du biologiste ? Remarques à ce stade : On ne peut pas exclure un anti-Fyb, voire on le suspecte… PAS de réactions positives sur des hématies Fyb neg et élution négative : pas dargument pour lauto-anticorps Indication à renforcer les réactions faibles (Fixation-élution) Il faut choisir des CGR Fyb négatif par prudence (exploration en cours) Des EDCL négatives ne seraient pas sécuritaires devant des réactions aussi faibles à la RAI (une HMZ négative et des HTZ neg) Pendant ce temps … le prescripteur attend les CGR

15 Alpes Méditerranée Lundi matin… nouvelle RAI Anti-Fyb, sous réserve de phénotypage, dans le sérum et léluat

16 Alpes Méditerranée Difficulté : Anticorps contre AG composé TDA: négatif Mme S….. Enceinte - DCcEe Kell-

17 Alpes Méditerranée Auto adsorption ( 3 passages ) Allo adsorption ( 2 passages ) Négatif après 3 passages Après 3 passages dauto adsorption sur hématies papaïnées en liss Nécessité dallo-adsorber sur GR papainés 37°c Liss Jka neg (AC non éliminé) Anti-ce: allo ou auto anticorps ?

18 Alpes Méditerranée Allo-anti -ce: comment transfuser ? Quelle surveillance CCee K- + EDCL ccEE K- + EDCL Le titre est de 1/1: surveillance tous les mois après la 20 ème semaine daménorrhée

19 Alpes Méditerranée Patiente : O DCcee K- pas de transfusion récente Difficulté : Anticorps et AG positif Anti -D chez une patiente D+

20 Alpes Méditerranée Anti -D chez patient D+ Exploration sérologiqueDiagnostic de certitude : auto-adsorption Auto-adsorption réalisableNégative : auto-anti-DPositive : allo-anti-D Avis-interprétation Pas de consigne particulière en - Transfusionnel - Suivi de grossesse Transfusionnel: transfuser en D- (phéno RH-KEL compatible) après EDCL -Suivi de grossesse: titrage et surveillance dun anti-D Auto-adsorption non réalisable Biologie moléculaire (voir Bioarray)

21 Alpes Méditerranée

22 EchTechPanelO1O2O3O4O5O6O7O8O9O10O11Auto PlBVC PlBVP PlBVC RAI à laccouchement : TCD : négatif Suspicion Anti-public Mme K. Mary DN : 18/06/1977 Origine sénégalaise Antécédents: -3 grossesses : 2004, 2006, Pas de transfusion -Connue avec un anti-D Difficulté : Panagglutination Tauto Neg

23 Alpes Méditerranée NON OUI Suspicion dun mélange dallo anticorps Variabilité réactionnelle En intensité, en Enzyme Confirmation Corrélation technique Phénotype Génotype GR Informatifs MELANGE ALLO AC OUI NON Phénotype étendu Génotype Absence dun HFA CONFIRMATION DU ANTI-HFA Suspicion dun anti-HFA Recherche dAllo AC masqués OUI TEMOIN AUTOLOGUE NON POSITIF ET INTENSITE > PANEL NEGATIF OU POSITIF ET INTENSITE < PANEL AUTO ADSORPTIONALLO ADSORPTION NON PERSISTANCE PAN AGGLUTINATION NON AAC OUI NON ANTI-HFA Recherche dAllo AC masqués Confirmation de lanti-HFA Recherche dAllo AC masqués OUI Technique Papaïne NEG POS NEG après Inhibition NON ANTI-HFA de HAUT TITRE HTLA AUTRE QUE ChRg ANTI-ChRg AAC Recherche dAllo AC masqués TDA IgG/Mixte C3d ATCD TS QTE GR AUTO ADSORPTION ALLO ADSORPTION DTT OUI CAT en cas de Pan-agglutination

24 Alpes Méditerranée Allo-absorption Sur hématie papaïnée 0+ Fya-,Fyb- (2 passages avec Liss) EchantillonTechPanelO1O2O3O4O5O6O7O8O9O10O11Auto AdsBVC AdsBVP EDCL : avec hématie O-, Fya-, Fyb-, S- : Pos AB O RHKellDuffyKiddLewisMNSPLuthéran DCEceKkKpaKpbFyaFybJkaJkbLeaLebMNSsP1LuaLub O Phénotype étendu Anti-Fy3? Anti-Fy5?

25 Alpes Méditerranée Allo-absorption + Fixation-élution : Sur hématie P3 (dce) / 2 passages en Liss Elution après 1 er passage EchantillonTechPanelO1O2O3O4O5O6O7O8O9O10O11Auto Ads (2 passages) BVP Ads (2 passages) BVC953(+) EDLBVC EluatBVC EDLBVP EluatBVP4953(+)++(+) Anti-D + Anticorps sans spécificité commune identifiée

26 Alpes Méditerranée ASSCI? - anti-FY3 et FY5 éliminés - action renforcée en papaïne : Anti-RH? Anti-Jsb? - patiente RH:-1, 2,-3,4,5 anti-RH 34? - africaine anti-RH 34? Anti-Jsb? Envoi en biologie moléculaire : Patiente RH-34 immunisée Antigène C variant à considérer comme C neg Allo-anti-D

27 Alpes Méditerranée Gènes RHD et RHCE Chr 1 10 exons chacun En épingle à cheveux 3 5 D CE 1 1

28 Alpes Méditerranée Gènes RHD et RHCE

29 Alpes Méditerranée Gène RHD D Gène RHCE cE Ce ce 676G>C d Gènes RHD et RHCE Codon stop Pseudogène Gène hybride Délétion

30 Alpes Méditerranée RH:-34 Type 2 D-CE-D Type C partiel 733C>G 1006G>T 48G>C (C)ce s ce s Gène RHDGène RHCE

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32 Patiente dorigine européenne Historique de transfusion CGR en Dernière transfusion le (1 CGR). Dernière RAI négative le Transf < 3 mois Difficulté : Panagglutination Tpos

33 Alpes Méditerranée Tauto et TDA << Intensité réactionelle panel Suspicion danticorps dirigé contre un antigène de grande fréquence Réalisation dun phénotype TRES étendu même si transfusé à la recherche dun phénotype silencieux Dans ce cas : absence dun antigène de grande fréquence : sujet Kpa+b- Suspicion dun anti-Kpb Autre anticorps masqué ? TDA (+) IgG (DP en tube)

34 Alpes Méditerranée Adsorption : hématies natives Iso Rh-K JK FY Ss (DP sur le phénotype, adsorptions en quinconce) RAI identification sur adsorbat : Neg RAI sur Eluat EDCL avec GR Kpb Neg (sur éluat et sur sérum) : Neg Confirmation de la présence dun anti-Kpb dans sérum et éluat

35 Alpes Méditerranée Conclusion : Pangglutination et témoin autologue positif / TDA positif ne riment pas avec auto-anticorps. Attention devant un témoin autologue / TDA dintensité inférieure à lidentification. Devant une suspicion de public : réaliser un phénotypage TRES étendu et rechercher labsence dun antigène de grande fréquence (même en contexte transfusionnel) ou Génotypage En situation dincompatibilité : chercher la DP au Tauto et TDA


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