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TD 5 : LES AMINOACIDES BTS DIETETIQUE 1 TD DE BIOCHIMIE.

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1 TD 5 : LES AMINOACIDES BTS DIETETIQUE 1 TD DE BIOCHIMIE

2 Exercice 1 : Vrai ou faux 3. Spectre dabsorbance des acides aminés aromatiques

3 Exercice 1 : Vrai ou faux 4. Etats de la glycine pH pHi Forme cationique A+A+ Zwitterion A Forme anionique A–A– H3O+H3O+ H2OH2O H3O+H3O+ H2OH2O H3O+H3O+ H2OH2O H3O+H3O+ H2OH2O

4 pH pHi Zwitterion Forme cationique Forme anionique A+A+ A A–A– A+A+ A A–A– % forme H3O+H3O+ H2OH2O H3O+H3O+ H2OH2O H3O+H3O+ H2OH2O H3O+H3O+ H2OH2O [A + ] = [A ] [A ] = [A – ]

5 pH pHi % forme pH = pK a1 pH = pK a2 pKa = pH de demi-ionisation des fonctions ionisables A+A+ A A–A– [A + ] = [A ] [A ] = [A – ] Si pH = pKa 1 [ COOH] = [ COOH] Si pH = pKa 2 [ NH 2 ] = [NH 3 + ]

6 Tampon pH = 6 Exercice 4 : Electrophorèse AnodeCathode G + –+ Papier Zone de dépôt DÉPOT

7 Exercice 6 : Analyse peptide DENATURATION Oxydation S–S HYDROLYSE TOTALE Protéine Acides aminés Ct Nt Détermination Nt et Ct

8 Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Méthode de Sanger (au FDNB) H2NH2N COOH HN COOH DNP FDNB HN DNP HCl LIBERATION DE TOUS LES AA SEUL AA Nt EST MARQUE

9 Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Méthode dEdman H2NH2N COOH PTC PITC

10 Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Méthode dEdman H2NH2N COOH PITC

11 Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Méthode dEdman H2NH2N COOH H2NH2N PITC

12 Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Méthode dEdman H2NH2N COOH H2NH2N PITC

13 Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Méthode dEdman H2NH2N COOH H2NH2N PITC H2NH2N

14 Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Méthode dEdman H2NH2N COOH H2NH2N PITC H2NH2N

15 H2NH2N Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Méthode dEdman H2NH2N COOH H2NH2N PITC H2NH2N DETECTEUR MÉTHODE RÉCURRENTE PERMET LE SÉQUENÇAGE

16 Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Aminopeptidase H2NH2N COOH AMINOPEPTIDASE DETECTEUR

17 Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Aminopeptidase H2NH2N COOH AMINOPEPTIDASE DETECTEUR H2NH2N

18 Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Aminopeptidase H2NH2N COOH AMINOPEPTIDASE DETECTEUR H2NH2NH2NH2N

19 Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Aminopeptidase H2NH2N COOH AMINOPEPTIDASE DETECTEUR H2NH2NH2NH2N H2NH2N METHODE RECURENTE LENTE AVEC CERTAINS AA

20 Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de C-terminal Carboxypeptidase Dégradation de la protéine par le Ct

21 Exercice 6 : Analyse peptide DENATURATION Oxydation S–S TRYPSINE CHIMOTRYPSINE Arg ou Lys Phe, Tyr, Trp SEQUENCAGE HYDROLYSE TOTALE Protéine Acides aminés Ct Nt Détermination Nt et Ct


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