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La gestion des déchets Biochimie Laurence Chavant.

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1 La gestion des déchets Biochimie Laurence Chavant

2 Gestion des déchets lors dune séance de Tp de Biochimie

3 Gestion des déchets niveau de la commande Repérage des déchets : leur nature Traitement possible des déchets au lycée ? (Protocole élimination des déchets ) Oui Rapide / simple : Elève durant séance Long / complexe : Personnel de laboratoire Sur la commande : Les besoins pour le traitement : - Matériels - Réactifs Non Stockage dans « Bidons » avec étiquette appropriée (Aide au tri des déchets chimiques) Sur la commande : - Nombre de « bidons ». - Létiquette appropriée avec nom du composé.

4 Documents destinés aux élèves Fiche technique « Détermination de létiquette présente sur le bidon ». Dans la salle : « Aide au tri des déchets chimiques » Sur protocole : Symbole : Devenir des produits sur la paillasse. Tableau : Elimination des déchets de lanalyse à compléter.

5 Gestion des déchets par les élèves Devenir des produits sur la paillasse Produit à remettre dans le flacon initial Symboles dans le protocole Repérage des déchets de la manipulation

6 Gestion des déchets par les élèves Elimination des déchets de lanalyse Tableau à compléter Les déchetsMoyens délimination Répérage : Lieu de production Protocole Nature du déchet Principe Traitement : Oui : Décrire le moyen Non : « Bidon » avec étiquette appropriée

7 Gestion des déchets par élèves Exemple : Dosage des chlorures Le protocole : - Etalonnage de la solution nitrate dargent par méthode de Mohr : pesée indirecte - Dosage des chlorures par méthode de Charpentier et Volhard.

8 Exemple : Dosage des chlorures Evier Etalonnage : AgNO 3 par la méthode de Mohr, pesée indirecte Les déchetsMoyens délimination NaCl AgCl en milieu neutre Laisser sédimenter le précipité une nuit : - Surnageant : évier - Précipité : « Bidon » déchet inorganique toxique : Ag +

9 Exemple : Dosage des chlorures Dosage : Chlorure par la méthode de Charpentier et Volhard Les déchetsMoyens délimination AgCl AgSCN milieu acide Neutralisation et sédimentation Dégagement vapeurs irritantes « Bidon » déchet inorganique toxique : argent, thiocyanate et milieu acide NH 4 SCN (burette) AgNO 3 (burette et pipette jaugée) Lavage verrerie thiosulfate

10 Gestion des déchets : Réduction de volume Quelques pistes

11 Diminution volume en colorimétrie Essais en diminuant proportionnellement lensemble des réactifs et étalon de la méthode colorimétrique. MéthodeLittératurePratiqué Méthode 3,5DNS Etude B-fructosidase - 3 mL milieu enzymatique - 2 mL 3.5 DNS - 15 mL deau distillée - 1,5 mL milieu enzymatique - 1 mL 3.5 DNS - 7,5 mL deau distillée Dosage des nitrites (diazotation) - 10 mL (étalon et diluant) - 0,2 mL réactif - 5 mL (étalon et diluant) - 0,1 mL réactif Dosage du Phosphore Méthode de Briggs - 7 mL (étalon et diluant) - 1 mL Réactif mL Réactif mL Réactif mL (étalon et diluant) - 2 mL triréactif (V/V/V)

12 Diminution des déchets : CCM des acides aminés Solvant : Volume préparé nécessaire à 2 groupes de 16 élèves (1L). Récupérer et stocker en flacon fermé. Utiliser par les groupes suivants dans la semaine. Révélateur à la ninhydrine (pinceau) Composition : 0,6 g de ninhydrine 6 mL dacide éthanoïque n-butanol qsp 200 mL En flacon brun fermé le réactif est stable plusieurs mois à + 4°C. Dimension des plaques : CCM (« secondaire ») Séparation des AA lors chromatographie échange dions/Identification des AA par CCM : plaque de 4 cm x 4cm

13 Diminution des déchets : Fractionnement des protéines sériques par sulfate dammonium Préparation de la fraction « globulines » - Dans un tube à centrifuger, placé dans de la glace, introduire : - 5 mL de sérum - 5 mL de sulfate dammonium à 100 % (goutte à goutte). - Mélanger, laisser reposer 10 minutes. - Centrifuger 10 min à 4500 rpm (Jouan, E96). - Dans un tube Eppendorf de 1,5 mL, placé dans de la glace, introduire : - 0,5 mL de sérum dilué (= Unitrol dilué au ½) - 0,5 mL de sulfate dammonium à 100 % (goutte à goutte). - Mélanger, laisser reposer 10 minutes. - Centrifuger 5 min à rpm (microcentrifugeuse). La fraction obtenue est la fraction de globuline. On cherche à obtenir un volume total proche de 1 mL Noter le volume exacte obtenu soit V G.

14 Diminution des déchets : Fractionnement des protéines sériques par sulfate dammonium Dosage des protéines par la méthode au Biuret 1 mL de solution étalon ou fractions à doser. 4 mL de réactif du biuret. 0,5 mL de solution étalon ou fractions à doser. 2 mL de réactif du biuret.


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