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LE MILIEU A LA LYSINE DE TAYLOR (LDC) Peptone5 g Extrait de viande5 g L-Lysine10 g Glucose0,5 g Pyridoxal phosphate0,005 g Pourpre de Bromocrésol0,01 g.

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1 LE MILIEU A LA LYSINE DE TAYLOR (LDC) Peptone5 g Extrait de viande5 g L-Lysine10 g Glucose0,5 g Pyridoxal phosphate0,005 g Pourpre de Bromocrésol0,01 g Rouge de crésol0,005 g EDqsp 1 L Composition Source N Source de C Indicateurs de pH violet pH basique ou neutre, jaune pH acide pH = 6,8 à 7 Source de C, N Vitamine PP, coenzyme des décarboxylases Acide aminé indispensable à la recherche de la LDC Ensemencement 1- Introduire une goutte de suspension dans le milieu. 2- Agiter. 3- Si le tube nest pas plein, recouvrir dun peu dhuile de vaseline. 4- Incuber 24 heures à 37°C

2 LE MILIEU UREE INDOLE Tryptophane0,3 g Urée2 g Phosphate monopotassique0,1 g Phosphate bipotassique0,1 g Chlorure de sodium0,5 g Ethanol à 95°1 mL Rouge de phénol à 1%0,25 mL EDqsp 100 mL Composition Acide aminé nécessaire à la recherche de la TDA et de la tryptophanase Source de P Indicateurs de pH rouge pH basique ou neutre, jaune pH acide pH = 7 Molécule azotée nécessaire pour la recherche de luréase Ensemencement 1- Introduire 1 ou plusieurs colonies identiques dans le milieu. 2- Agiter. 3- Incuber 24 heures à 37°C. Solubilisation du tryptophane Sels minéraux

3 Lecture des milieux Milieu LDC 1ère lecture possible Alcalinisation du milieu par formation dun composé basique issu de la décarboxylation de la lysine par la LDC, la cadavérine : LDC + 2nde lecture possible Le milieu est devenu jaune le pH est acide par formation de composés acides issus de la fermentation du glucose par les bactéries. Il n y a pas réalcalinisation du milieu : LDC -

4 Milieu urée-indole Recherche de luréase: lecture directe 1ère lecture possible Alcalinisation du milieu par formation dun composé basique issu de lhydrolyse de lurée : UREASE + Le rouge de phénol reste orangé pH neutre l urée n est pas hydrolysée, absence de l enzyme chez les bactéries : UREASE - 2nde lecture possible

5 Recherche de la TDA et de lindole 10 gouttes du milieu Reste de la culture 2 gouttes de FeCl 3 2 gouttes de réactif de Kovacs Pas de modification du milieu : TDA - Formation dun précipité marron présence d acide indole pyruvique : TDA + Présence d un anneau orangé en surface absence d indole : INDOLE - Présence d un anneau rouge en surface formation d indole à partir du Trp sous l action de la tryptophanase : INDOLE +


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