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SY MARIAME CHU de ROUEN. PLAN INTRODUCTION TECHNIQUES DE LA CRYOPRESERVATION DU TISSU OVARIEN(CPTO) INDICATIONS TRANSPOSITION DU TISSU OVARIEN.

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1 SY MARIAME CHU de ROUEN

2 PLAN INTRODUCTION TECHNIQUES DE LA CRYOPRESERVATION DU TISSU OVARIEN(CPTO) INDICATIONS TRANSPOSITION DU TISSU OVARIEN

3 INTRODUCTION Pourquoi congeler et stocker des gamètes? -préserver la fertilité pendant traitements castrateurs -faciliter les procédures d AMP 2 sexes inégaux : congélation ovocyte mature donne des résultats très inferieurs à la congélation du sperme en terme de survie à la décongélation et de potentiel de fécondation Loi bioéthique du 6 aout 2004

4 PRELEVEMENT DE TISSU OVARIEN ET CONDITIONNEMENT COELIOSCOPIE: -idéal; minimum altération du tissu ovarien -prélèvement une partie ou de lovaire entier -bilan de lappareil génital -permet débuter radiothérapie ou chimiothérapie dès le lendemain -siCI : laparotomie CONDITIONNEMENT: Seuls follicules primordiaux survivent à la décongélation Congélation follicules du cortex et fragments cm² Délai prélèvement-congélation: 30 min

5 Milieu : Leibowitz sérum de la patiente sucrose Cryoprotecteurs: nécessaires à la survie du greffon et faible toxicité -DMSO ; éthylene glycol ; propanediol: 75% survie des follicules primordiaux - glycérol moins 10% survie

6 Congélation/Décongélation Qq principes: -nécessité dun cryoprotecteur -descente en congélation doit etre lente » slow cooling »:descente par paliers de +5 à -140 degrés -seuls follicules primordiaux survivent à la congélation -la décongélation doit etre rapide »rapid thawing » Pbroblème : obtenir gamètes matures après décongélation: -autogreffe ovaire -maturation folliculaire in vitro -Xénogreffe -allogreffe

7 MATURATION POST CONGELATION AUTOGREFFE: -néovascularisation intense du greffon très rapide et suffisante pour obtenir survie et croissance du greffon -2 sites :.Orthotopique : situation anatomique ; grossesse obtenue en Belgique et menée à terme.Hétérotopique : sous bras… ovulation obtenue avec ovocyte mature mais nécessité FIV ALLOGREFFE: Maturation chez une autre femme; nécessité dimmunosuppresseurs

8 MATURATION FOLLICULAIRE IN VITRO: Plusieurs étapes du developement folliculaire ont été obtenus chez souris TRANSFERT DE NOYAU: - transfert noyau dun FP dans cytoplasme ovocyte mature - a été obtenu chez souris XENOGREFFE: Maturation gamète humain chez animal immunodeficient Survie folliculaire et même maturation ovocytaire meilleure que par autogreffe Pb éthique+++(transmission agents infectieux? Altération du patrimoine génétique?

9 RESULTATS ACTUELS Chez animalChez humain Autogreffe orthtotopiqueSouris,rat,mouton3 grossesses dont 1 FCS Autogreffe hétérotopiqueSouris,embryon chez brebis Ovocyte mature xénogreffeSouris dans ratOvocyte mature Maturation in vitrosourisStade pré-antral Transfert de noyauOvocyte sourisaucun Congélation ovaire entierRat; embryon chez brebisaucun

10 Indications de la CPTO But :préserver fertilité en protégeant tissu ovarien des menaces qui pèsent sur réserve folliculaire 3 types: 1) iatrogènes+++ Rayons: destruction dose dépendante 9grays=castration Agents alkylants dont cyclophosphamide 20g =castration Mais grossesses ont été obtenues pr doses plus élevées 2)Stock folliculaire menacé : Turner; maladies auto-immunes ; galactosémies congénitales; pathologies infectieuses 3)Déstruction liées au temps: ménopause

11 P rincipales indications: -irradiation corporelle totale(leucémies…) -agents alkylants à doses importantes(thalassémies, lupus…) -association radio_chimiothérapie (hodgkin…) -ovariectomies bilatérales Indications futures Ménopause Ttt de la ménopause précoce

12 QQ PROBLEMES PRATIQUES AGE:< 35 ans Au-delà: réserve folliculaire largement réduite Perte folliculaire liée à cryopréservation Enfant: technique très intéressante Quantité ovaire à prélever? Grande variabilité interindividuelle post traitement Femme:1 ovaire entier Enfant : 1/2 ovaire Balance perte folliculaire liée au traitement/ perte liée à la cryopréservation

13 NOMBRE DE PRELEVEMENTS EN FRANCE PAR COELIOSCOPIE

14 TRANSPOSITION OVAIRES et CPTO Déplacement ovaire en dehors champs irradiation en préservant lun de ses pédicules vasculaires 2 grands sites: -gouttière pariéto-colique: irradiation centro-pelvienne -rétro-utérine: hodgkin Impact de la chimiothérapie et radiothérapie sur utérus: -pas altération fonction utérine post chimio -altération de la réçéptivité utérine post RT: réduction du volume utérin et élasticité utérine Risque de FCS, FCT, prématurité et petit poids de naissance

15 Pas action préventive contre toxicité gonadique de la chimiothérapie Permet préservation de la fonction ovarienne dans 60 à 100% cas Dose ovarienne réduite à 5-10% 2 principales indications chez adulte: -maladie de Hodgkin -certains stades précoces de cancer invasif du col Chez enfant : Hodgkin,médulloblastome, sarcome dEwing

16 Technique chirurgicale Sous AG; par coelioscopie Inspection des annexes et cavité abdominale; prélevements çytologiques Dissection avec instruments atraumatiques ;limiter utilisation bipolaire (lésions du cortex par diffusion thermique) Section du péritoine ant et post du ligament large puis section ligament utéro-ovarien et trompe par endo-GIA au ras de la corne utérine Pédiculisation annexe sur ligament lombo-ovarien et mobilisation vers le haut et latéralement sans torsion du pédicule,après décollement pariéto- colique D

17 fixation au péritoine pariétal au dessus EIAS par agraffeuse automatique Mise en place de clips pour repérer lovaire Pour lannexe G: repérage de uretère à G Mobilisation de lannexe par section du péritoine du ligament large Section utéro-ovarien et lombo-ovarien par endo-GIA Extraction de lannexe par un sac

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25 Pour transposition rétro-utérine: -surtout utilisée dans Hodgkin -permet de ne pas désolidariser les ovaires des trompes -nécessite que le ligament utéro-ovarien soit assez long pour pouvoir rapprocher les ovaires des utéro-sacrés -les ovaires sont repérés par des clips et approchés des US par une pince gripp et agrafés au ligament avec des pinces automatiques

26 Association CPTO et transposition ovarienne: technique simple et efficace Possible en cas irradiation pelvienne En cas désir de grossesse: -stimulation ovarienne et FIV; ponction écho-guidée nest pas un obstacle -si échec : greffe orthotopique

27 conclusion CPTO offre de nombreuses possibilités théoriques de préservation de la fertilité Indications restent rares Importance de linformation éclairée de la patiente Pb éthique++

28 références Aubard Y.congélation du tissu ovarien 2002 Aubard Y. mises à jour du CNGOF 2003 Donnez J and al. Livebirth after orthotopic transplantation of cryopreserved ovarian tissue Lancet 2004 Oktay K. tranplantation of cryopreserved human ovarian tissue results in follicle growth 2000 M Baron et al.transposition ovarienne et cryopréservation du tissu ovarien avant radiochimiotherapie dun cancer du rectum B.Courbière et al quels sont les actuels espoirs de grossesse après cryopréservation du tissu ovarien


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