La présentation est en train de télécharger. S'il vous plaît, attendez

La présentation est en train de télécharger. S'il vous plaît, attendez

Articles : SNAP-25 Modulation of Calcium Dynamics underlies Differences in GABAergic and Glutamatergic Responsiveness To Depolarisation Claudia Verderio.

Présentations similaires


Présentation au sujet: "Articles : SNAP-25 Modulation of Calcium Dynamics underlies Differences in GABAergic and Glutamatergic Responsiveness To Depolarisation Claudia Verderio."— Transcription de la présentation:

1 Articles : SNAP-25 Modulation of Calcium Dynamics underlies Differences in GABAergic and Glutamatergic Responsiveness To Depolarisation Claudia Verderio & Michella Mateolli Neuron,Vol 4, , February 19,2004

2 Physiological processes : Memory Learning Orientation Pathological processes : Epilepsy Ischemia Alzheimer HIPPOCAMPUS Tranche d`Hippocampe

3 Excitation GABA Interneurones (10 %) Inhibition GLUTAMATE Pyramidal cells 90% Deux types de neurones

4 Cellule pyramidales Interneurone GABAergic Révélation experimentale spécifique V-GAT Transporteur vésiculaire du GABA GAD Enzyme de synthèse du GABA (glutamin acid decarboxylase) V-GLUT Transporteur vésiculaire du Glutamate

5 10 ms rs 10-90%, Whole cell recording What is a synaptic current ? sIPSC

6 What is a synaptic current ? sEPSC Glu

7 glutamatergic activity GABAergic activity sEPSC sIPSC mEPSC mIPSC Spontanés PA Ca 2+ Fusion Sans PA Na+ Miniatures +TTX Fusion Sans PA Ca 2+ Na+ x x PA

8 Syst-ecto Ab Syst-ecto Ab : AC anti synaptotagmin KCL mM Stimulation chimique pour depolariser les neurones TTX : Tetrodotoxin Bloque les canaux Na+ dependants APV :100 microM Blocage des recepteurs NMDA actives par le glutamate CNQX :20 microM Blocage des recepteurs AMPA/KA actives par le glutamate Bicuculline : 20 microM Blocage des recepteurs GABAa actives par le GABA Indications supplementaire

9 Pour larticle : Détermination de la concentration intra cytoplasmique de Ca2+ Utilisation dun colorant sensible au Ca2+ : ex. Magfura, Aequorin J : faible affinité au Ca2+: 10-4 M Mesure de la fluorescence émise après stimulation

10 a Fluorescence image of a presynaptic terminal injected with n-aequorin-J. When the presynaptic fibre is fully loaded, it is continuously stimulated at 10 Hz for 10 s. Quanta stable microdomain Absence de stimulation Microdomains of high calcium concentration in a presynaptic terminal Adapted from Llinas R, Sugimori M, Silver RB (1992) Science 256, , with permission

11 Docking : interaction spécifique de différentes protéines Palade, 1970: reconnaissance spécifique entre la membrane vésiculaire et plasmatique Rothman et al. Bases moleculaire de cette interaction specifique Purification des plusieurs proteines essentielles pour les processus de docking et de fusion Fusion : processus dependant de l`ATP et du Ca2+

12 Adapted from Calakos N, Scheller H (1996) Synaptic vesicle biogenesis, docking and fusion: a molecular description, Physiolog. Rev. 76, 1-29, with permission.

13 Machinerie de la libération

14 Blocage de l`exocytose par les differentes toxines TeNT : Tetanus neurotoxin BoTNs: Botulinum neurotoxin TeTN et BoTN/B Clivage selectif de R-Snare Synaptobrevin/Vamp BoNT/A ou E Proteolyse Q-SNARE SNAPE 25

15 Indications supplementaire Fura 2 : Colorant sensible au Ca2+ Ryanodine (1microM) et cyclopiazonic acid (30 microM) Bloquant du recepteur Ryanodine sur RE et de la pompe Ca2+ SERCA TTX : Tetrodotoxin Bloque les canaux Na+ dependants APV :100 microM Blocage des recepteurs NMDA actives par le glutamate CNQX :20 microM Blocage des recepteurs AMPA/KA actives par le glutamate Bicuculline : 20 microM & Picrotoxin Blocage des recepteurs GABAa actives par le GABA


Télécharger ppt "Articles : SNAP-25 Modulation of Calcium Dynamics underlies Differences in GABAergic and Glutamatergic Responsiveness To Depolarisation Claudia Verderio."

Présentations similaires


Annonces Google