Vaccination du lapin de garenne sans avoir à le capturer Etude de la puce Xenopsylla cunicularis, vecteur potentiel d’un vaccin Dr. Anne DARRIES

Programme de Recherche de Bio Espace soutenu par la FNC Recherche de nouveaux sites naturels français de la puce Xenopsylla cunicularis Essais d’implantation de la puce à l’extérieur de son aire de répartition (Parcs expérimentaux)

Beaucournu et Launay (1990) Aire de Répartition de Xenopsylla cunicularis - Maroc, Portugal et Espagne - 2 stations connues dans le sud-ouest de la France (sud de Toulouse) - Espèce autochtone Puce de terrier Exigences écologiques poussées concernant le climat (chaud et régime de pluie printanier < 600 mm) et la nature du sol (léger et aéré)  espèce peu abondante

Recherche de nouveaux sites naturels français de la puce 1ère partie Recherche de nouveaux sites naturels français de la puce Xenopsylla cunicularis Préciser la limite nord de son aire de répartition

Sites Naturels Zones prospectées Juillet 07 : Juillet 08 : L.-et-Garonne (Agen-Nérac-Marmande) Tarn (Albi – Toulouse - Montauban) Juillet 08 : - Gers (autour Auch) Juillet 09 : - Gers (Nord) - Hte-Garonne (NO de Toulouse + P. s/ Garonne

Nouveaux sites Gers : Gimont et Beaupuy / Tarn : St Gauzens / Hte-Garonne : Francarville Toujours présente à Portet-sur-Garonne

Publication acceptée dans le Bulletin de la Société Entomologique de France (juin 2010) Contribution à l'étude de l'aire de répartition de Xenopsylla cunicularis Smit 1957 (Siphonaptera: Pulicidae), ectoparasite spécifique du lapin de garenne Oryctolagus cuniculus L. 1758 (Lagomorpha): nouvelles stations dans le sud-ouest de la France. Anne Darries-Vallier et Jean-Claude Beaucournu

2ème partie Parcs expérimentaux Savoir si les puces lâchées en-dehors de leur aire de répartition peuvent s'installer et risquer de concurrencer les espèces autochtones

9 Sites expérimentaux * Nord (Soc. Ch. St Hubert + Anclatra 59) * Marne (Anclatra ADCPG) * Seine Maritime (FDC 76) * Loire-Atlantique (Anclatra 44) * Lot-et-Garonne (FDC 47) * Tarn (FDC / Anclatra 81) * Gard (FDC 30) * Hérault (FDC et Anclatra 34) * Bouches du Rhône (FDC 13) Sites naturels X. cunicularis

Nord Marne Seine-Maritime

Loire-Atlantique Lot-et-Garonne Tarn

Hérault Gard Bouches-du-Rhône

Principe général des expérimentations Lâcher de puces vierges de tout vaccin à l'intérieur de parcs expérimentaux peuplés en lapins Laisser faire la nature voir si l'on retrouve une population de puces l'année suivante dans les parcs Par peignage des lapins En récupérant le sol des garennes où se développent les puces

2 contrôles 3 mois: peignage 3 lapins + échantillon de sol dans 2 galeries 18 mois: peignage de tous les lapins + récupération du sol dans les 3 garennes artificielles + trous naturels

Données observées Paramètres biotiques (puces) Nb et état des larves, nymphes et adultes de puces ds le sol et sur les lapins Adultes : néonates (non alimenté), en maturation, ovigères, âgées  DISSECTION Proportion des différents stades (adultes et immatures) renseigne sur l’état reproductif de la population de puces

Données observées Paramètres abiotiques : Climat : Sol : Int et ext des garennes (1 fois/sem) Données climatiques de la station la plus proche pdt la durée de l’expérimentation (précision) – Météo France Données climatiques moyennes (Météo France) Sol : analyses pédologiques du sol des parcs site GisSol-INRA (nature + structure des sols ds dépt) 2 paramètres essentiels au développement de X. cunicularis

Analyse des prélèvements Puces récupérées sur les lapins Nettoyage poils Différenciation des espèces Dissection des adultes pour connaître le stade reproductif

Les prélèvements de sol Ouverture des garennes Quadrillage du sol Récupération de la couche superficielle Transport dans des sacs jusqu’au laboratoire (papier humide)

Puces récupérées dans les prélèvements de sol 2 types d’analyses * in vivo * dans l’alcool (Tarn, Bouches du Rhône, Lot et Garonne)

Analyse des prélèvements in vivo 655 boites au total (330 kg) Examen de chaque boite 2 fs/sem pendant 2 mois Récupération puces adultes et autres insectes (ds tubes avec alcool) Pour chaque tube (~2.000): détermination espèce puces, sexe dissection des femelles identification autres insectes

Analyse des prélèvements dans l’alcool 135 boites (2-3 kg/bte – 140 kg ~) 30ne d’heure / boite  Échantillonnage 1/5

Etapes de l’échantillonnage

Dépouillement des échantillons

Au total : - 876 boites (dt 135 ds l’alcool) - 519 kg de substrat - 2475 tubes

Analyses statistiques (3 mois-18 mois) - Nb larves, nymphes, adultes de puces - paramètres climatiques (T°, HR, précipitations) - paramètres édaphiques (granulométrie, éléments organo-minéraux, oligo éléments)

Résultats

Exemple de traitement des données climatiques Le Climat Exemple de traitement des données climatiques

Le sol Exemple de Carte des textures en Seine Maritime

Texture du sol des garennes Nord Limon sablo-argileux Marne Sable limono-argileux Seine-Maritime Limon sablo-argileux Loire-Atlantique Limon sablo-argileux Lot-et-Garonne Sable Tarn Limon sablo-argileux Hérault Argile limono-sableuse Gard Limon sablo-argileux Bouches-du-Rhône Argile limono-sableuse

Prélèvement à 3 mois Facteur température est prépondérant (sur l’ensemble des parcs) * Nature du sol est secondaire

Prélèvement final (18 mois) * Nature du sol est prépondérante (en relation avec T° + faibles et les précipitations) * Quantité de lapins (pas d’influence des autres paramètres physico-chimiques

Autres paramètres Etat reproducteur des populations de puces Conforme aux observations en nature * sex-ratio des adultes présents (70-80 % femelles) * sex-ratio des naissances (52 % femelles) * proportions des stades immatures en relation avec les températures Répartition des puces dans les garennes Hétérogène Fonction de * l’ensoleillement * la pente * fréquentation par les lapins Faune du sol * mise en place de toute une chaîne trophique * rôle important dans la dynamique des populations (prédateurs/détritiphages - compétition)

Depts du Nord (Nord, Marne, Seine-Maritime et Loire-Atlantique) Puce a quasiment disparu ou est en voie de disparaître (tx <<1) Depts du Sud Situations variables en fonction du climat et surtout du substrat Elément important : aucun stade immature n’a été trouvé dans les trous naturels, y compris dans le Lot et Garonne. Pourquoi : garennes artificielles bien isolées de la pluie  substrat jamais mouillé, même avec de fortes précipitations Idéal pour Xenopsylla Quel que soit le parc, Xenopsylla n’a perduré que dans les garennes artificielles. Si elle avait été capable de vraiment s’installer, il y aurait eut un nombre conséquent de puces à l’extérieur, dans les trous naturels.

A la question : Xenopsylla représente-t-elle un danger pour la faune locale ? NON

Les expérimentations ont montré que cette puce ne pourrait survivre que dans le sud, à l’état de micropopulations, dans des stations isolées, éparses, où les garennes seraient sableuses et très protégées. La survie de ces micropopulations serait par ailleurs à la merci de l’abandon des garennes par les lapins. En aucun cas elle ne constitue un danger pour la faune locale et ne présente aucun risque d’invasion incontrôlable, dans le sens où sa propagation géographique est entravée par des besoins biologiques et écologiques très strictes.

Publications Rapport FNC (+ complément) Revue Internationale « Journal of Vector Ecology » Vaccination de la faune sauvage à l'aide d'insectes-vecteurs : La puce Xenopsylla cunicularis (Siphonaptera: Pulicidae) pourrait-elle s’installer en dehors de son aire de répartition, si elle était utilisée pour vacciner contre la myxomatose son hôte spécifique, le lapin de garenne Oryctolagus cuniculus ? Premiers résultats dans le nord de la France. A. Darries-Vallier, A. Ausset et P. Besrest En préparation * 2ème partie sur l‘étude d’implantation de Xenopsylla * L'alimentation, paramètre essentiel dans l'élevage des arthropodes hématophages. Comportement et besoins nutritionnels. Aurélien Ausset et Anne Darries-Vallier

FIN