Pr Pierre Jeannesson CNRS UMR 6237 UFR de Pharmacie Culture cellulaire Pr Pierre Jeannesson CNRS UMR 6237 UFR de Pharmacie

Quelques points de repère dans le développement de la culture tissulaire et cellulaire Début 20ème - Des cellules embryonnaires de poulet peuvent être maintenues en vie dan une solution saline hors du corps de l’animal - Culture de moelle épinière d’amphibien dans un caillot de lymphe: preuve que les axones sont produits sous forme d’extension de cellules nerveuses isolées 1940 - 1960 - Développement des milieux de culture - Première lignée cellulaire humaine: lignée HeLa 1970 – 2000 : Premières applications - Mise au point des hybridomes et des anticorps monoclonaux - Production de cellules transfectées à l’échelle industrielle et de biomolécules (protéines recombinantes) 2000 +: - Culture de cellules souches embryonnaires - Développement de l’ingénierie cellulaire et tissulaire, de la thérapie cellulaire

Primary explant Mouse squamous cell carcinoma of skin with epithelial outgrowth

Neurons Five-day old rat olfactoy bulb cells 4 days in vitro

Skeletal muscle cells

Human leukemia cells

Trypsinization (1)

Trypsinization (2)

Applications de la culture cellulaire (1): dans le domaine de la recherche fondamentale

Applications de la culture cellulaire (2): dans le domaine biomédical et industriel 1. Domaine du diagnostic - Cytogénétique - Production d’anticorps monoclonaux 2. Domaine des biotechnologies et de la pharmacie - Elaboration de vaccins - Production de médicaments Criblage Effets toxiques Protéines recombinantes -Ingénierie cellulaire et tissulaire: cytocompatibilité des biomatériaux, immunothérapie cellulaire, cellules épidermiques, cellules souches embryonnaires

Evolution des cellules en culture

Finite cell line (green) Continuous cell lines (blue, red)

Transformation cellulaire Focus formation in 3T3 cells. Focus of transformed cells formed spontaneously in dense culture of 3T3 cells

Finite cell line (green) Continuous cell lines from transformed glia (blue) and metastatic melanoma (red)

Voies métaboliques des cellules Glycolyse

Plastic substrate (polystyrene): Culture vessels Petri dishes Culture flasks

Multiwell plates

w/o matrix with matrix (blue) Transwells Epithelial cells alone Transfilter coculture Separated coculture w/o matrix with matrix (blue)

Nano carriers

Treated surfaces

Types of microbial contamination Bacterial contamination Yeast contamination Fungal contamination

Mycoplasma contamination

Antibiotics used in cell culture

Constituents of serum