COMPLEXE CUMULO-OVOCYTAIRE POST-OVULATOIRE SPERMATOZOIDE Acrosome Noyau TETE Mitochondries FLAGELLE Microtubules PIECE INTERMEDIAIRE COMPLEXE CUMULO-OVOCYTAIRE POST-OVULATOIRE Ovocyte secondaire Granules corticaux Corona radiata Cellules folliculaires 1er globule polaire Zone pellucide Noyau 100 µm

MATURATION FOLLICULAIRE PERIODE FOETALE ET ENFANCE CYCLE MENSTRUEL PUBERTE J 14 J 28 J 1 CYCLE DE L ’OVAIRE Follicules primordiaux avec leur ovocyte primaire MATURATION FOLLICULAIRE OVULATION Corps jaune Follicule mûr Follicule antral Follicule secondaire

TRACTUS GENITAL FEMININ OVAIRE - maturation folliculaire - ovulation TROMPES DE FALLOPE - migration de spermatozoïdes - migration de l ’embryon CAVITE VAGINALE - accueil des spermatozoîdes UTERUS - accueil de l ’embryon (nidation) COL DE L ’UTERUS - sécrétion de glaire cervicale - filtration des spermatozoïdes

LES MECANISMES DE LA FECONDATION 1 - dissociation des cellules folliculeuses et fixation des spermatozoïdes à la Z.P.. 2 - réaction acrosomiale entraînant la libération de protéase et de hyaluronidase qui permettent la pénétration du spermatozoïde à travers la Z.P.. 3 - traversée de la zone pellucide puis liaison d ’une face latérale du spermatozoïde à la membrane plasmique de l ’ovocyte. 4 - fusion des membranes des 2 gamètes et pénétration du noyau, du centriole et du flagelle du spermatozoïde. 5 - réaction corticale de l ’ovocyte dont les granules corticaux libèrent leur contenu par exocytose et modifient la structure de la Z.P. qui s ’épaissit et empêche la pénétration d ’autres spermatozoïdes. 6 - reprise et fin de la 2ème mitose de méiose avec expulsion du 2ème globule polaire : décondensation et migration du noyau du spermatozoïde en direction du noyau de l ’ovocyte. 1 2 4 3 5 6

LA FECONDATION AU MICROSCOPE Spermatozoïdes Ovocytes Zygote Embryon avec 2 pronucléi Embryon à 4 blastomères 24 h 48 h à 2 blastomères 36 h LA FECONDATION AU MICROSCOPE Ovocytes avec ses cellules nourricières Spermatozoïdes sélectionnés par gradients J 0

DE LA PONCTION AU TRANSFERT ETUVE 37°C 5% CO2 DE LA PONCTION AU TRANSFERT Prélèvement de sperme et sélection des spermatozoïdes par gradients de silice Fertilisation de 100 000 spz/puits Examen au microscope, isolement et rinçage des CCO Sonde endo-vaginale avec aiguille de ponction Tubes stériles avec liquide ponction TRANSFERT AU LABORATOIRE 37°C Vagin Vessie Ovaire Utérus Jour 1

Mise en évidence des pronucléi et changement de milieu ETUVE 37°C 5% CO2 -196°C Mise en évidence des pronucléi et changement de milieu Changement de milieu, classement et choix des embryons pour le transfert et la congélation TRANSFERT CONGELATION Jour 1 Jour 2 ou 3

DU ZYGOTE A L ’EMBRYON - Interdigitation des enveloppes nucléaires Centriole du spermatozoïde Noyau haploïde du spermato-zoïde - Interdigitation des enveloppes nucléaires - duplication des chromosomes EMBRYON ZYGOTE Noyau haploïde de l ’ovocyte - réplication des centrioles - rupture de la mb nucléaire - alignement des chromosomes de l ’ovocyte et du spermato-zoïde sur le même fuseau mitotique - séparation des chromatides - migration vers les 2 pôles - télophase et cytodiérèse - 2 noyaux diploïdes