Benoît, Ramy, Nicolas, Killian, Delphine, Martin, Anne-Claire et Sofia INMED Mars 2009 Etude de la prolifération de neurones in vitro en présence d’un agent antimitotique Benoît, Ramy, Nicolas, Killian, Delphine, Martin, Anne-Claire et Sofia

Observations Echographie du fœtus sain : Le cortex est bien formé Echographie du fœtus malade : Une malformation du cortex, une zone ou les neurones ne ce sont pas placés.

Observations L’IRM du fœtus malade possède une malformation des ventricules du cerveau, cortex malformé

Hypothèses Des problèmes génétique : sur les chromosomes, maladie. Un choc. Une fumeuse. Environnement. Médicaments Conséquences : Des neurones mal organisés ( Ils ne sont pas dans la zone où ils devraient être ). Des problèmes de différenciation ou de prolifération. Un agent bloque la prolifération ou différenciation ou : étude sur un modèle cellulaire

Expérimentation Modèle cellulaire Les cellules utilisées : des cellules non différenciées et des neurones On a ajouté un agent antimitotique (le MAM : methylazoxymethanol acetate) pour vérifier l’hypothèse du blocage de prolifération ou de différenciation A quelle concentration l’agent antimitotique agit-il sur les cellules ? Sur des cellules non différenciées (N2a): On a pris un témoin négatif sans agent Différentes concentrations d’agent = 2,5 µM ; 10 µM et 50 µM On a utilisé de la javel On a comparé l’effet du MAM sur des neurones et des cellules non différenciées (N2a) Sur des cellules non différenciées : Un témoin négatif sans MAM différentes concentrations de MAM : 10µM ; 20µM et 40µM Sur des neurones: Une concentration de MAM à 40µM

Résultats Cellules non différenciées (N2a) : Test colorimétrique A partir de la gamme étalon on peut voir que plus l’absorbance est élevée, plus le nombre de cellules est important Conclusion : L’absorbance est proportionnelle au nombre de cellules, donc on pourra utiliser ce test pour tester l’effet du MAM sur les cellules non différenciées.

Résultats Cellules non différenciées (N2a) : effet du MAM (test colorimétrique) Plus la concentration est élevée, plus la prolifération des cellules est ralentie. Conclusion : Le MAM agit sur la prolifération des cellules non différenciées

Résultats L’effet du MAM sur des cellules différenciées (neurones) Conclusion : Aucun changement dans le nombre de neurones, le MAM ne réagit pas avec des cellules différenciées

Résultats L’effet du MAM sur les cellules non différenciées (N2a) Conclusion : On ne peut pas conclure car le contrôle à T24 a moins de cellules que celui à T0

Conclusion Le MAM agit sur les cellules non différenciées (N2a) contrairement aux cellules différenciées (neurones) Au cours du développement, lorsque la prolifération de cellules non différenciées est gênée, cela va produire une mauvaise différenciation des cellules ce qui va entraîner par conséquence un mauvais placement de neurones, dans ce cas.