3. 1.2. Quelques modalités du développement des vertébrés. Partie 2 du programme : Biologie des organismes 3. 1.2. Quelques modalités du développement des vertébrés. I. L'induction et la structuration du mésoderme
L'expérience historique de Niewkoop 1969
Expérience de recombinaison ecto-endodermique réalisée avec un marquage préliminaire de l'ectoderme à l'aide d'un traceur de lignage cellulaire fluorescent en rouge (RLDx). Les résultats montrent que le mésoderme induit est marqué par le RLDx. Le mésoderme provient donc de l'ectoderme après induction par l'endoderme.
Recombinaisons effectuées entre les blastomères animaux de la rangée A avec un blastomère végétatif (d'après Dale et Slack, 1987).
Exemples de ventralisation chez le xénope A gauche, un embryon totalement ventralisé, sans aucune structure dorsale. A droite, un embryon partiellement ventralisé montrant des rudiments de structures dorsales postérieures.
Greffe de lèvre dorsale Double gastrulation Expérience de Spemann
Induction de l'organisateur de Spemann (O) par le centre de Nieuwkoop (CN). L'un des mécanismes de la dorsalisation.
La βcaténine, un facteur de transcription (activateur du gène siamois)
http://www.sciencebio.com/FacBio/Endocrino/CMembryo.pdf
Domaine d'expression de Brachyury (flèches) au stade blastula chez le xénope (d'après Lemaire et al. 1995).
Wolpert
II. La régionalisation des somites
Le Moigne
Expression régionalisée des gènes Pax exprimés dans le tube neural ainsi que les somites de l'embryon de poulet. En jaune et en bleu sont représentées respectivement l'expression de Pax3et Pax1. http://www.snv.jussieu.fr/bmedia/homeotique/homeo5.html
Homéodomaine uni à sa séquence spécifique d'ADN. La partie contenant les hélices 2 et 3 ressemble fortement à la conformation hélice-coude-hélice des protéines régulatrices de procaryotes
normale Mutante antennapedia
Observation de drosophiles mutantes normale mutant e Mutante bithorax
Des ensembles de gènes très ressemblants Un ensemble de gènes homéotiques 4 ensembles = 4 complexes de gènes homéotiques Des ensembles de gènes très ressemblants Gènes paralogues de la même couleur
Comparaison des séquences de 2 gènes homéotiques Conclusion : Ces 2 gènes homéotiques appartenant à la drosophile et à la souris se ressemblent beaucoup.
La première étape du knock out La première étape du knock out. La recombinaison homologue dans des cellules souches embryonnaire permet de remplacer un gène Hox par une séquence dont on peut suivre l'expression. Consulter pour les détails http://www.snv.jussieu.fr/vie/documents/KO/KO.htm#exbcd8
La deuxième étape : l'intégration de cellules mutantes dans des embryons permettant d'obtenir des individus mosaïques
3ème étape : des croisements permettent d'obtenir des souris « knock out »
c = Mutant HoxC8
b = Mutant Hoxa3 Hoxd3
III. La différenciation de la cellule musculaire squelettique
Les différentes catégories de cellules musculaires
Coupe longitudinale faisant apparaître un tronçon de 3 fibres (ou cellules) musculaires
Évolution de myoblastes en culture
Tubules T et réticulum sarcoplasmique
Myofibrilles de muscle squelettique (C. Long.)
DOC 6 : Immunofluorescence sur coupes consécutives du même secteur de muscle de poulet grâce à deux anticorps spécifiques d’une forme différente de la myosine.
Autoradiographie d’une fibre musculaire associée à des cellules satellites (cf. flèches) en présence d’un extrait de muscle endommagé.
IV. La croissance d'un os long
Organisation d'un os long Moelle osseuse jaune périoste Artères nourricières
Marieb
Matrice cartilagineuse
Petits chondrocytes Zone de mitoses des chondrocytes Gros chondrocytes Zone d'hypertrophie des chondrocytes Mort des chondrocytes Ostéoclastes digérant le cartilage et ostéoblastes déposant la matrice osseuse Zone de remplacement du cartilage par l'os Capillaires sanguins Matrice osseuse