Séparation d’énantiomères Réduit les risques de racémisation  Enantiosélectivité élevée Grande diffusivité des solutés et viscosité réduite de l’éluant  Efficacité accrue & analyses rapides Polarité du CO2 équivalente à celle de l’hexane  Transition de la LC à la SFC facilitée Détection par UV le plus souvent (Spectrométrie de masse ou d’autres méthodes utilisées)

Brush-types CSP Utilisée pour des solutés non derivatisés tel que les amino-acides, pyréthroides ou β-bloqueurs. Force d’élution de Co2-Methanol moins élevée que des mélanges hexane – dichloroéthane - éthanol  temps de rétention plus élevés

Comparison of LC and SFC enannomeric separations of clenbuterol on the Chirex 3022 CSP. Chromatographic conditions: (a) hexane-l,2-dichloroethane-(ethanol-trifluoroacetic acid) (50:35:15, v/v), 1.0 ml/min, 22°C. UV detection at 254 nm; (b) carbon dioxide-methanol (85:15, v/v). 2.0 ml/min, 30°C, 15 MPa. UV detection at 254 nm. From 32.

Cyclodextrine Plutôt utilisée pour des chromatographie en phase inverse. Peu utilisée en SFC

Comparison of LC and SFC enantiomeric separations of ancymidol on the Cyclobond I 2000 SN CSP. Chromatographic conditions: (a) 1% triethylammonium acetate-acetonitrile (80:20, v/v), pH 7.0, 1.0 ml/min, 22°C, UV detection at 254 nm; (b) carbon dioxide- methanol (90:10, v/v), 2.0 ml/min, 30°C, 15 MPa, UV detection at 254 nm.

Effet des paramètres Paramètres modifiables:  Modificateur  Pression  Température  Débit

Le modificateur Interagit avec l’analyte et la phase stationnaire Effets difficiles a prévoir Effets sur la rétention et la résolution L’état physique de l’éluant peut modifier les effets Le méthanol (alcool le plus utilisé): meilleure efficacité, mauvais impact sur l’énantioséléctivité L’addition d’un composé très polaire (TFA, isopropylamine) améliore la résolution et la forme des pics

Comparison of enantiomeric separations of chlorpheniramine on the Chiralpak AD CSP without (a) and with (b) the addition of isopropylamine (0.5% v/v) to the ethanol modifier. Chromatographic conditions: carbon dioxide-ethanol (90:10, v/v), 2.0 ml/min, 30°C, 15 MPa, UV detection at 254 nm

La Pression Impact plus important sur la rétention que sur la sélectivité Certains analytes ont eu un effet sur la sélectivité en fonction de la pression Cas de Chiralpak AD (amylose based): changement de sélectivité notée avec l’augmentation de la pression. Les auteurs ont postulé un changement de conformation de la phase stationnaire sous la pression. Ces modifications n’ont jamais été notées dans le cas des phase stationnaires dérivées du cellulose

La Température En général: l’efficacité augmente avec la température. La sélectivité des phases chirales diminue avec la température.  Utilisation à des températures inférieure au point critique du CO2 Généralisation des effets difficile: 2 produits de structure similaire peuvent avoir un comportement différent à la température Une inversion de l’ordre d’élution a été observée pour certains analytes Attention à la stabilité des phases chirales avec la température.

Le Débit Conséquence directe des coefficients de diffusion des solutés favorables: le débit a peu d’influence sur la sélectivité Pour Chiralpak AD et Chiralcel OD: pas d’influence sur la sélectivité pour des débits allant de 0.5 à 5 mL / min