Cours de biotechnologie

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2° : Isolement 3°: Incubation 24h à 37°C Jus de raisin Gélose Sabouraud en surfusion 1°: Préparation.
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Transcription de la présentation:

Cours de biotechnologie Université du Québec A Montréal Cours de biotechnologie Cytotoxicité d’un xénobiotique UQAM Amel BOUSLIMI 1

Les mycotoxines Problème d’importance mondiale Introduction Métabolites secondaires de diverses espèces fongiques : Aspergillus, Penicillium et Fusarium Implications dans des pathologies humaines et animales (Mycotoxicoses) Induction par la consommation d’aliments contaminés Problème d’importance mondiale Introduction Introduction

Test au Rouge Neutre (RN) Test au Bleu Trypan (BT) Méthodologie Vero Cellule Test MTT Test au Rouge Neutre (RN) Test au Bleu Trypan (BT) Méthodologie

Succino-déshydrogénase viabilité cellulaire: MTT Principe : une indication sur l’activité mitochondriale Fumarate MTT Succinate Succino-déshydrogénase Formazan (bleu) (jaune) FAD FADH2 Pour évaluer la viabilité cellulaire suite à l’exposition à la zearalénone, nous avons réaliser le test MTT Approche Traitement par les mycotoxines Addition du MTT Lecture de DO à 560 nm Méthodologie

Viabilité cellulaire (test RN) Principe Ce test permet d’évaluer la perméabilité et l’activité membranaire Le RN est un colorant qui pénètre sélectivement les cellules vivantes Approche Traitement par le mycotoxine Addition du RN Dosage spectro-photométrique Méthodologie

Evaluation de la viabilité cellulaire: (BT) Principe Le bleu de trypan colore sélectivement les cellules mortes La viabilité cellulaire évaluée par comptage sous microscope des cellules vivantes non colorées Approche Traitement par les mycotoxines Addition du BT Numération cellulaire (sous microscope) Méthodologie

Bonne pratique de culture cellulaire