Validation d’une méthode d’analyse

Choix de la méthode Faire un inventaire des méthodes existantes; Chercher si une méthode normalisée convient à nos besoins et à nos moyens; Si oui : Examiner la faisabilité de la mise en place de cette méthode; Mettre en place ou non la méthode. Si non : Définir notre méthode et la formaliser en s’inspirant de l’existant.

Validation ou caractérisation ? Différence entre validation et caractérisation: Caractérisation: pour les méthodes normalisées « méthodes de référence » du laboratoire appliquées à la lettre; Validation: pour les méthodes internes du laboratoire ou différentes des méthodes de référence

Caractérisation Définition: déterminer les caractéristiques du laboratoire par rapport à cette méthode. Ces caractéristiques sont souvent données dans la méthode: Domaine de linéarité; Limite de détection; Limite de quantification; Répétabilité; Spécificité; Incertitude.

Validation Définition: c’est établir à l’évidence, avec un degré de confiance élevée et sous forme documentée, qu’une méthode déterminée permet d’atteindre effectivement les spécifications définies à l’avance. Valider une méthode ne représente que la première étape de sa mise sous assurance qualité.

Organisation de la validation Etapes: Nommer un responsable qui coordonnera l’étude de la validation; Faire un fiche de validation, (elle reprend l’ensemble des points à valider avec la méthode, le nom du rapport, le responsable et la date), elle permet le suivi de l’avancement de l’étude; Réunir un groupe de travail pour définir les spécifications de la méthode; Rédiger un mode opératoire préliminaire de la méthode; Réaliser l’étude prévue par la fiche de validation; Rédaction du dossier de validation; Rédaction du mode opératoire final.

Dossier de validation C’est la reprise exhaustive de l’ensemble des expériences réalisées mais aussi des critères initiaux: Objectif de la validation; Caractéristiques à valider et critères correspondants; Mode opératoire de la méthode; Les méthodes d’évaluation des critères; Pour chaque test, une conclusion sur la validation du critère; La décision finale quant à la validation de la méthode; Une feuille récapitulative des performances de la méthode.

Robustesse Définition: aptitude d’une méthode à ne pas être influencée par des variables maîtrisables (T°c, HR%,pH…). Exemple: les résultats ne sont pas influencés par des variations raisonnables du pH de la solution

Rugosité Définition: aptitude d’une méthode à ne pas être influencée par des variables non maîtrisables (interférents). Exemple: les résultats d’analyse du SO2 sont influencés par les Composé Organiques Volatils

Linéarité Définition: aptitude d’une méthode à fournir des résultats proportionnels à la « concentration » de l’élément recherché. Exemple: un modèle mathématique de type y = ax + b permet de simuler correctement les réponses de l’appareil en fonction de la concentration

Limites de détection et de quantification Définition:limites définissant les domaines dans lesquelles l’élément recherché peut être identifié ou non, quantitativement ou non. Exemple:le composé à analyser est identifié comme présent à partir de 2 ppm et mesuré de façon fiable à partir de 6.9 ppm.

Domaine de mesure Définition: limites à l’intérieur desquelles la méthode fournit un résultat avec une incertitude connue et maîtrisée. Exemple: les résultats analytiques sont fiables sur l’ensemble de la gamme 0.2 à 50 ppb

Spécificité Définition: aptitude d’une méthode à identifier l’élément recherché quelque soient les autres éléments présents. Exemple: l’étude de la résolution chromatographique montre que les différents pics sont suffisamment séparés pour intégrer le composé à mesuré seul.

Sensibilité Définition: aptitude d’une méthode à distinguer de petites variations de l’élément recherché Exemple: l’analyste peut différencier, autour de 1 g/l, deux concentrations différentes de 0.01 g/l.

Fidélité Définition: aptitude d’une méthode à fournir des résultats exempts d’erreur aléatoire. Exemple: les résultats obtenus par l’analyste sur un échantillon à 10 mg/l sont : 8.99 - 9.00 – 8.99 – 9.00 mg/l

Justesse Définition: aptitude d’une méthode à fournir des résultats exempts d’erreur systématique. Exemple: les résultats obtenus par l’analyste sur un échantillon à 10 mg/l donnent une moyenne de 10.3 mg/l

Incertitude Définition: paramètre associé au résultat d’un mesurage, qui caractérise la dispersion des valeurs. C’est l’aboutissement de la validation d’une méthode. L’estimation de l’incertitude est indispensable pour l’accréditation d’une méthode