La consommation chronique de régimes riches en matières grasses favorise l’inflammation à bas bruit conduisant aux maladies métaboliques et à l’obésité.

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1 La consommation chronique de régimes riches en matières grasses favorise l’inflammation à bas bruit conduisant aux maladies métaboliques et à l’obésité 1. Le passage anormalement élevé de composés pro-inflammatoires bactériens (CBPI ; e.g. lipopolysaccharide, LPS) du tube digestif vers le milieu intérieur serait pour partie responsable de cette inflammation 2. Cependant, des CBPI autres que le LPS passent probablement la barrière intestinale et peuvent affecter différentiellement les cellules immunitaires. Les acides gras polyinsaturés de la famille n-3 (AGPI n-3) possèdent des propriétés anti-inflammatoires 3. Nous avons émis l’hypothèse qu’un régime gras riche en AGPI n-3 limiterait les réponses inflammatoires entériques et systémiques aux CBPI. Nous avons testé cette hypothèse chez le porc. INTRODUCTION MATÉRIELS & MÉTHODES Vingt cinq miniporcs adultes obèses (3 répétitions) ont consommé, pendant 10 semaines, des régimes gras (12%) isocaloriques mais différant par la source des matières grasses : saindoux (acides gras saturés et mono-insaturés, SX), huile de tournesol (oméga 6, HT) ou huile de poisson (oméga 3 - riche en DHA, HP). Les cellules mononucléées des ganglions lymphatiques mésentériques (MLN, n=7-8 par régime)) et du sang total (PBMC, n=4-6 par régime) de ces 3 groupes de porcs ont été isolées et purifiées sur gradient de densité. Ces cellules ont été cultivées in vitro à raison de 0.5x10 6 cellules/puits pendant 3 jours en l’absence ou en présence de 10  g/ml de CBPI purifiés : acide lipoteichoïque (ALT), lipopolysaccharide (LPS), flagelline (FLA) et motifs CpG (CPG), ligands respectifs des TLR2, 4, 5 et 9. Les concentrations de cytokines inflammatoires (IFN , TNF  ) et régulatrice (IL-10) ont été mesurées dans les surnageants de culture. Les valeurs indiquées sont les concentrations nettes (valeurs brutes – valeurs basales). Les données ont été analysées par ANOVA (GLM, logiciel SAS) en prenant en compte l’effet du régime et sont representées en moyennes ± SEM. Nos résultats indiquent que la réponse inflammatoire dépend du régime, des cytokines considérées, des CBPI et du site. Ainsi, le régime HP (AGPI n-3) favorise la sécrétion d’IFNγ par les cellules mononucléées mésentériques et circulantes. Ceci est en accord avec nos résultats précédents montrant une perméabilité digestive et une endotoxémie plasmatique post-prandiale accrue avec HP. Cependant, la sécrétion de TNFα par les PBMC est plus faible avec HP par rapport à SX. Par ailleurs, la flagelline est un stimulant pro-inflammatoire aux niveaux mésentérique et sanguin, alors que d’autres CBPI ont des effets à un seul site (LPS pour MLN ; CPG pour PBMC). Tous ces facteurs de variations sont importants à considérer pour interpréter les effets des acides gras alimentaires sur les réponses inflammatoires. L’expression des gènes des différents TLR sera analysée sur les deux types cellulaires. CONCLUSION La composition du régime riche en acides gras module les réponses inflammatoires entériques et systémiques aux composés bactériens pro-inflammatoires chez le miniporc obèse S. Ferret-Bernard 1,*, L. Le Normand 1, J. Mourot 2, D. Val-Laillet 1, C.H. Malbert 1, J.P. Lallès 1 Centre INRA de Rennes 1 UR 1341 ADNC, 2 UMR 1348 PEGASE, Saint Gilles, France * stephanie.ferret@rennes.inra.fr La composition du régime riche en acides gras module les réponses inflammatoires entériques et systémiques aux composés bactériens pro-inflammatoires chez le miniporc obèse S. Ferret-Bernard 1,*, L. Le Normand 1, J. Mourot 2, D. Val-Laillet 1, C.H. Malbert 1, J.P. Lallès 1 Centre INRA de Rennes 1 UR 1341 ADNC, 2 UMR 1348 PEGASE, Saint Gilles, France * stephanie.ferret@rennes.inra.fr 1. Laugerette F, Vors C, Peretti N, Michalski MC (2010) Biochimie 93 (1), 39-45 2. Cani PD, Delzenne NM (2009) Curr Opin Pharmacol 9 (6), 737-743. 3. Calder PC (2006) Am J Clin Nutr 83(6 Suppl):1505S-1519S. RÉSULTATS 1. Densité cellulaire La densité cellulaire au niveau des MLN a été significativement plus faible (p<0,05) chez les porcs HP que chez les porcs HT. Les AGPI n-3 sont connus pour leur rôle dans l’inhibition de la prolifération des leucocytes et dans la modulation de l’expression des molécules d’adhésion. Cela pourrait participer à la faible densité cellulaire au niveau des MLN (site inducteur des réponses immunes intestinales) avec le régime HP. Aucune différence n’est observée au niveau des PBMC. PBMC MLN ab a b 2. Sécrétion in vitro d’IFN  par les cellules de MLN Les cellules des MLN des porcs HP ont sécrété davantage d’IFN  en réponse au LPS (p<0,05) que celles des porcs HT et en réponse à la FLA (p<0,05) par rapport aux cellules des porcs SX. ab a b a b 4. Sécrétion in vitro de TNF  par les PBMC ab a b En revanche, les PBMC des porcs HP semblent sécréter moins de TNF  en réponse à la FLA que ceux des porcs SX (p<0,05). Aucune différence de sécrétion n’est observée au niveau des cellules de MLN. 3. Sécrétion in vitro d’IFN  par les PBMC De même, les PBMC des porcs HP ont sécrété davantage d’IFN  en réponse à la FLA que ceux des porcs SX (p<0,005) et HT (p<0,001) mais aussi en réponse au CPG par rapport aux PBMC des porcs HT (p<0,05). Aucune différence significative en réponse au LPS n’est cependant observée. ab a b a a b Enfin, les réponses cytokiniques en réponse à ALT et la sécrétion d’IL-10 par les cellules de MLN ou les PBMC ne semblent pas influencées par la nature des régimes. 12-14 décembre 2012 Lyon, France