Identification bactérienne: Cocci Gram Positif

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1 Identification bactérienne: Cocci Gram Positif

2 Bile-esculine Identification des enterococcus
Esculine  esculitine + glucose (esculitine + Fe  citrate ferrique (brun foncé)) Milieu sélectif De la bile est ajoutée afin d’inhiber les bactéries gram + Enterococci peuvent survivre

3 Bile-esculine - +

4 Sensibilité à la novobiocine
Test Kirby Bauer Capable de différencier S. saprophyticus des autres staphylococci S. saprophyticus est le seul staphylococcus résistant

5 Mannitol + sel d’agar Haute salinité (7.5%) : enrichie les staphylococcus Indicateur : phénol rouge Sources de carbone : mannitol et protéines Détecte la fermentation du mannitol Mannitol  formation d’acide

6 Mannitol + sel d’agar Positif – fermentation du mannitol
Négatif – fermentation du mannitol Pas de croissance

7 Gélose d’agar Baird Parker/Tellurite
Milieu sélectif: Chlorure de lithium Solution 1% de tellurite de potassium Milieu différentiel: Jaune d’oeuf : lécithinase (clair) Tellurite de potassium : coagulase-positif (noircissant)

8 Gélose d’agar Baird Parker/Tellurite

9 Test PYR Enzyme détectée : pyrrolidonyl peptidase
L-pyrrolidonyl-β-napthylamide (PYR)  acide carboxylique L-pyrrolidone + β-napthylamine Réactions de détection: β-napthylamine + p-diméthyle-aminocinnamaldéhyde  précipité rose

10 Test PYR - +

11 Aggrégation cellulaire des Cocci Gram Positifs
Micrococcus & Streptococcus Streptococcus Micrococcus Staphylococcus -l’agrégation peut être utilisée pour faire la distinction entre certains genres bactériens

12 Diagnostique des bactéries d’importance médicale

13 Utilisation de la clef d’identification

14 Diagnostic : Cocci Gram positif
Cocci Gram Positifs Streptococcaceae Catalase - Aérobie & anaérobie facultatif Streptococcus Micrococcaceae Catalase + Aérobie Micrococcus Staphylococcus

15 Caractéristiques des Cocci Gram Positifs
Tous sont non sporulants Principalement retrouvés parmi la flore naturelle des humains et des animaux Exigences nutrionelles fastidieuses Utilisent des sources de carbones simples

16 Les Cocci Gram Positifs d’importance médicale
Micrococcaceae Staphylococcus aureus Cause plusieurs types d’infections, maladies alimentaires et chocs toxiques Staphylococcus epidermidis Cause des infections opportunistes Staphylococcus saprophyticus Cause la majorité des cystites chez les femmes

17 Les Cocci Gram Positifs d’importance médicale
Streptococcaceae Streptococcus pyogenes Pharyngite (strep throat) et infection à bactérie mangeuse de chair Streptococcus agalactiae Infections génitales Streptococcus mutans Endocardites Streptococcus pneumonia Otite, meningite et pneumonie Enterococcus spp. Infections opportunistes

18 Diagnostic : Bacilles Gram positif
Bacilles Gram Positifs Sporulants Aérobie et aérobie facultatif Bacillus Anaérobie stricte Clostridium Non-sporulants Aérobie Listeria

19 Morphologies des endospores
Position: Terminale (a, d, e) Subterminale (b) Centrale (c, f). Forme: Circulaire (b, d) Ellipsoïde (a, c, e, f) Diamètre: Non déformant (a, b, c) Déformant (d, e, f).

20 Les bacilles d’importance médicale
Bacillus Majoritairement inofensifs Quelques espèces opportunistes Bacillus cereus & Bacillus subtilis Empoisonement alimentaire Une espèce pathogène Bacillus anthracis Anthrax Bacilles Gram Positifs Sporulants Aérobie et aérobie facultatif Bacillus Anaérobie stricte Clostridium Non-sporulants Aérobie Listeria

21 Les bacilles d’importance médicale
Canned food that has not been sterilized properly; paralytic illness prolonged contraction of skeletal muscle fibers, neurotoxin produced by the bacteria Clostridium Plusieurs espèces pathogènes Clostridium perfringens Gangrène gazeuse Clostridium tetani Tétanos Clostridium botulinum Botulisme Clostridium difficile Diarrhée

22 Diagnostic : Bactéries à Gram (-)
Oxydase Pseudomonaceae Neisseriaceae Fermentation du glucose Enterobacteriaceae Fermentation du lactose McConkey Enterobacter Escherichia Klebsiella Serratia Proteus Salmonella Shigella Morganella

23 Bactérie à Gram (-) représentatives
Cocci Gram (-) Neisseria gonorrhoea Neisseria meningitis Bacilles Gram (-) Famille Enterobacteriaceae Escherichia, Enterobacter, Salmonella, Shigella, Klebsiella, Proteus, Morganella Famille Pseudomonaceae Pseudomonas

24 Immunologie

25 Immunologie But du système immunitaire: Immunité:
Distinguer ce qui est le soi du non-soi Le non-soi – Les antigènes Immunité: Tous les mécanismes utilisés par l’hôte pour se protéger et combattre le non-soi

26 Non-soi - les antigènes
Tout composé qui peut réagir avec les participants du système immunitaire Ex. anticorps Épitope: Caractéristique de l’antigène qui permet la reconnaissance comme étant non-soi Ex. Lipides, protéines, lipopolysaccharides

27 L’antigène Épitopes Virus=Antigène

28 Diagnostic sérologique/immunologique
Déterminer la présence d’un antigène : Un organisme Une protéine Une toxine Un anticorps Dosage par la méthode d’ELISA Immunochromatographie (test rapide)

29 ELISA Utilisé pour déceler la présence d’anticorps ou d’antigènes
Très sensible Quantitatif Rapide

30 ELISA – Détection d’Antigène
Sérum (source d’Ag) est ajouté à des puits de plastique Agent bloquant est ajouté Ac contre Ag est ajouté Lavage Ac détecteur est ajouté Lavage Substrat est ajouté Antigène Présent Antigène Absent Y Y ENZ Y ENZ Y

31 ELISA – Détection d’Anticorps
Ag cible pour Ac à déceler ajouté aux puits Agent bloquant est ajouté Sérum à tester est ajouté Lavage Ac détecteur est ajouté Lavage Substrat est ajouté Ac Présent Ac Absent Y Y ENZ Y ENZ Y

32 Interprétation des Résultats
Essai pour Ag de virus X Plaque d’ELISA Lectures d’absorbances Standard Patient 1 Patient 2 Patient 3 Témoin nég. 1/ / / / / /64 1/ /256 Dilutions 3.8 1.9 0.8 0.4 0.2 0.1 0.04 0.03 0.05 3.6 3.0 1.6 0.12 0.06 Conclusions: Patient 1 n’est pas infecté Patients 2 & 3 sont infectés Patient 3 possède une charge 8X plus élevée de l’Ag

33 Interprétation des Résultats
Essai pour Ac contre virus X Dilutions 1/ / / / / /64 1/ /256 Standard Patient 1 Patient 2 Patient 3 Témoin nég. 3.8 1.9 0.8 0.4 0.2 0.1 0.04 0.03 2.5 1.2 0.6 0.3 0.15 0.07 0.05 3.6 3.0 1.6 0.12 0.06 Plaque d’ELISA Lectures d’absorbances Conclusions: Patient 1 & 3 sont séropositifs Patients 2 est séronégatif

34 Semaine prochaine Dernier quiz Examen pratique:
Faites certain que vous comprenez tout le matériel necessaire pour l’examen pratique, vous pouvez me demander de clarifier toutes les questions sur l’examen