Compétences Techniques

Présentation au sujet: "Compétences Techniques"— Transcription de la présentation:

1 Compétences Techniques
Microbiologie Compétences Techniques

2 Compétences Préparation de solutions
Travailler avec les concentrations Dilutions Dilutions en série

3 Préparation des Solutions

4 Définitions Solution Mélange de 2 substances ou plus dans une phase unique Solution composée de deux composantes Soluté Partie qui est dissoute ou diluée – Habituellement la plus petite quantité Solvant (OU Diluent) Partie de la solution dans laquelle le soluté est dissout – Habituellement le plus grand volume

5 Concentrations Concentration = Quantité de soluté
Quantité de solution (Pas solvant) Trois façons d’exprimer les concentrations: Concentration Molaire (Molarité) Pourcentages Masse par volume

6 Molarité No de Moles de soluté/Litre de solution
Masse de soluté/PM de soluté = Moles de soluté Moles de soluté/vol en L de solution = Molarité

7 Pourcentages Les concentrations en pourcentage peuvent être exprimé en tant que : V/V – volume de soluté/100 mL de solution M/M – Masse de soluté/ 100g de solution M/V – Masse de soluté/100 mL de solution Tous représentent des fractions de 100

8 Pourcentages (suite) %V/V %M/V % M/M
Ex. 4.1L soluté/55L solution =7.5% Doit avoir les mêmes unités en haut et en bas! %M/V Ex. 16g soluté/50mL solution =32% Dois avoir des unités du même ordre de grandeur en haut et en bas! % M/M Ex. 1.7g soluté/35g solution =4.9% Dois avoir les mêmes unités en haut et en bas!

9 Masse par volume Une quantité de masse par un volume Ex. 1kg/L
Connaître la différence entre une quantité et une concentration! Dans l’exemple ci-dessus 1 litre contient 1kg (une quantité) Quelle quantité retrouverait-on dans 100ml? Quel est le pourcentage de cette solution?

10 Réduire une Concentration Une Fraction
Les Dilutions Réduire une Concentration Une Fraction

11 Dilutions Dilution = produire des solutions plus faibles à partir de solutions plus fortes Exemple : Faire du jus d’orange à partir de concentré. Mélanger une cannette de concentré de jus d’orange congelé avec trois (3) cannettes d’eau

12 Dilutions (suite) Les dilutions sont exprimées comme le volume de la solution étant diluée par le volume total final de la dilution Dans l’exemple du jus d’orange, la dilution serait exprimée comme 1/4, pour une cannette de jus à un TOTAL de quatre cannettes de jus dilué. Quand on parle de la dilution, vous diriez pour l’exemple du jus : « un dans quatre ».

13 Dilutions (suite) Un autre exemple :
Si vous diluez 1 ml de sérum avec 9 ml de salin, la dilution serait écrite 1/10 ou dite « un dans dix », car vous exprimez le volume de la solution étant diluée (1 ml de sérum) par le volume final TOTAL de la dilution (10 ml totaux).

14 Dilutions (suite) Un autre exemple :
Une (1) partie d’acide concentré est diluée avec 100 parties d’eau. Le volume total de solution est 101 parties (1 partie d’acide parties d’eau). La dilution est écrite comme 1/101 ou dite “un dans cent un ”.

15 Dilutions (suite) Remarquez que les dilutions N’ONT PAS d’unités (cannettes, ml, ou parties) mais sont plutôt exprimées comme un nombre par rapport à un autre nombre Exemple : 1/10 ou « un dans dix»

16 Dilutions (suite) Les dilutions sont toujours exprimées avec la substance originale étant diluée comme étant un (1). Si plus d’une partie de la substance originale est initialement utilisée, il est nécessaire de convertir la partie de la substance originale à un (1) quand la dilution est exprimée.

17 Dilutions (suite) Exemple:
Deux (2) parties d’un colorant sont diluées avec huit (8) parties de diluant. Le volume total de solution est 10 parties (2 parties de colorant + 8 parties de diluent). La dilution est initialement exprimée comme 2/10, mais la substance originale doit être exprimée comme étant un (1). Pour convertir le volume original à un (1), utiliser une équation de rapport et de proportion. Rappelez-vous que les dilutions sont exprimées en terme de 1 à quelque chose : __2 parties de colorant = ___1.0___ Volume total de 10 parties x 2 x = x = La dilution est exprimée comme étant 1/5.

18 Dilutions (suite) La dilution n’est pas toujours comme des nombres entiers. Exemple: Deux parties (2) de sang sont diluées avec cinq (5) parties de saline. Le volume total de solution est sept (7) parties (2 parties de sang + 5 parties de saline). La dilution serait 2/7, ou plus précisément 1/3.5. Encore une fois, ceci est calculé en utilisant une équation de rapports et de proportions. Rappelez-vous que les dilutions sont exprimées en terme de 1 à quelque chose: __2 parties de sang_____ = ___1.0___ Volume total de 7 parties x 2 x = x = La dilution est exprimée comme 1/3.5

19 Qu’est que cela veut dire??
Si une solution possède une dilution de 1/10 le nombre représente 1 partie de l’échantillon ajouté à 9 parties de diluant. Donc les volumes utilisés seraient 10-1= 9. Ceci représente 1 partie d’échantillon ajoutée à 9 parties de diluant. Comment est-ce que vous ferriez une dilution de 1/10 dans un volume final de 3 ml?

20 Dilutions Si une dilution de 1/8 d’une solution mère est faite suivie par une dilution de 1/6 quelle est la dilution finale. La dilution finale est: 1/8 x 1/6 = 1/48

21 Facteur de Dilution EXEMPLE: Quel est le facteur de dilution si vous ajoutez 0.1 mL d’un spécimen à 9.9 mL de diluant? Le volume final est égal au volume de l’échantillon PLUS le volume du diluent: mL mL = 10 mL Le facteur de dilution est égal au volume final diviser par le volume de l’échantillon : 10 mL/0.1 mL = Facteur de dilution de 100X

22 Exemple d’un Problème Quel est le facteur de dilution quand 0.2 mL est ajouté à 3.8 mL de diluant?

23 Établir le Problème Facteur de dilution = Volume final/Volume d’échantillon = 4.0 volumes totaux 4.0/0.2 = Facteur de dilution de 20X

24 Dilutions Moyen de réduire une concentration
Dilution: Une fraction du facteur de dilution Facteur de dilution = Conc. que j’ai Conc. que je veux Ex. Vous avez une solution de 25 mg/mL et désirez une solution de 5mg/mL Facteur de dilution = 25mg/mL 5mg/mL = 5X Dilution = 1/le facteur de dilution = 1/5 = 1 partie/5 parties Totales

25 Exemple Préparer 25mL d’une solution de 2mM à partir d’un stock de 0.1M Facteur de dilution = 100mM/2mM=50X Dilution = 1/50 parties Donc un 1/50e de la solution doit être représenté par la solution stock 1/50e de 25mL=25/50=0.5 Donc = 0.5mL soluté mL solvant

26 Les Dilutions en Série

27 Dilutions en Série Une dilution en série est n’importe quelle dilution ou la concentration diminue par une quantité donnée dans chaque étape successive. Les dilutions sont multiplicatives.

28 Les Dilutions en Série – des Fractions en Série
Exemple 1mL 0.5mL 9mL 3mL The fraction = The dilution A1: 1/10 A2: 1/4 A3: 0.5/1.5 = 1/3 The final dilution of the series = (A1 X A2 X A3) = 1/120 La fraction = La dilution A1: 1/10 A2: 1/4 A3: 0.5/1.5 = 1/3 La dilution finale de la série = (A1 X A2 X A3) = 1/120

29 Dilutions Si une dilution de 1/8 d’une solution mère est faite suivi par une dilution de 1/6 quelle est la dilution finale. La dilution finale est: 1/8 x 1/6 = 1/48

30 Les Dilutions en Série Rappelez-vous que les dilutions en série sont multiplicative et sont faites en prenant une quantité donnée d’une dilution initiale et de l’ajouter de façon successive à des tubes de diluent Donc chaque dilution successive serait multipliée par le prochain facteur de dilution

31 Exemple de Dilutions en Série
Tube 1 2 3 4 Aliquot 0.2 Diluent 3.8 Math 4/0.2 1/20x1/20 1/400x1/20 1/8000x1/20 Dilution 1/20 1/400 1/8000 1/160,000

32 Exemple d’un Problème Tube 1 2 3 4 Aliquot 0.2 0.1 Diluent 3.8 4.8
Math Dilution