Les frottis cervico-vaginaux

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1 Les frottis cervico-vaginaux

2 Définition C’est un examen de dépistage des cancers du col utérin dont le principe repose sur l’analyse microscopique de lames cellulaires après recueil des cellules du col utérin Le frottis cervico-vaginal est un examen incontournable pour le suivi gynécologique. Ce geste simple doit être pratiqué dès le début de l’activité sexuelle, puis à intervalles réguliers. Il est pratiqué soit par un gynécologue, soit par un médecin généraliste.

3 Pratique du frottis cervico-vaginal
Cet examen permet de dépister certaines maladies inflammatoires et tumorales. Il est habituel de pratiquer des frottis dès la première année qui suit le début des relations sexuelles. Ensuite la fréquence en est variable, avec un espacement qui va de un à trois ans selon les âges de la vie et les antécédents gynécologiques. Il constitue l’un des fondamentaux de la prévention du cancer du col de l’utérus.

4 Déroulement de l’examen
À l’aide d’une spatule ou d’une petite brosse spécialement adaptée et introduite en utilisant un speculum, le médecin va en frottant – d’où le terme de « frottis » - recueillir des cellules provenant de la muqueuse vaginale, du col et de l’endocol utérin. Les prélèvements sont ensuite adressés à un laboratoire où ils sont analysés par un médecin spécialisé, l’anatomopathologiste

5 Matériels Spéculum à deux valves
Spatule en plastique ou Spatule d'Ayre Brosse endocervicale Lame et fixateur pour le frottis sur lame Flacon contenant un conservateur pour le technique en couche mince Pince et coton

6 Fiche de renseignement
Obligatoirement jointe aux prélèvements, elle comporte : les éléments nécessaires à l'identification de la patiente (nom, prénom…) ; la date des dernières règles ; le moyen de contraception (Pilule, D.I.U : stérilet, ...); les antécédents gynécologiques récents ou anciens ; les traitements en cours ; les références des derniers examens ; le sigle « PF » si c'est le premier frottis. Après la lecture, les lames doivent être archivées et conservées pendant 10 ans.

7 Type de fiche de renseignement

8 Le prélèvement La partie la plus difficile du frottis est d'apprendre à repérer le col de l'utérus avec un spéculum à deux valves. Le frottis cervico-vaginal doit être réalisé avant le toucher vaginal. Pour les frottis conventionnels à étalement sur lame (et non pour les frottis en milieu liquide), il est important de moucher le col (essuyer avec une compresse) afin d'enlever la glaire cervicale souvent chargée en polynucléaires qui pourraient rendre difficile l'examen cytologique. Une fois le spéculum introduit et le col repéré, il faut s'assurer que la zone de jonction entre l'épithélium malpighien et l'épithélium glandulaire est visible. Cette zone est la zone de remaniement recouverte par un épithélium métaplasique. C'est au niveau de la zone de remaniement que se développe 99 % des cancers. Après la ménopause, la jonction pavimento-cylindrique tend à remonter dans le canal endocervical et devient moins facilement visible. Pour cette raison, il peut être nécessaire d’utiliser un outil de prélèvement endocervical, en plus de la spatule, pour obtenir un prélèvement adéquat chez les femmes plus âgées. Plusieurs techniques de prélèvement sont possibles : .

9 Si la zone de remaniement n’est pas visible et qu’il est difficile d’y accéder, il faut utiliser l’outil de prélèvement endocervical en plus de la spatule. On ne doit pas utiliser seul un outil de prélèvement endocervical. Pour utiliser la spatule, l’appliquer sur l’exocol, incluant la jonction squamo-cylindrique, et gratter la surface en effectuant une rotation de 360° tout en maintenant un contact constant avec le col. Avec une brosse endocervicale, la rotation ne doit être que de 90 degrés. Si l’on doit utiliser un outil de prélèvement endocervical, il faut avertir la patiente que l’intervention peut être désagréable et qu’elle comporte des risques de petites pertes sanguines. Le prélèvement se fait en deux temps : Il faut d'abord prélever l'exocol avec une spatule d'Ayre au niveau de la zone de jonction, puis étaler le prélèvement uniformément sur la lame et le fixer immédiatement avec un spray conventionnel. Ensuite, il faut prélever l'endocol à l'aide d'une brosse endocervicale dédiée type cytobrush (quand la jonction n'est pas visible ou que l'orifice cervical est sténosé). De même, le prélèvement doit être fixé immédiatement

10 Déroulement de l’examen
Comment se déroule l’examen La patiente est allongée en position gynécologique (les pieds dans les étriers). Le médecin se sert d’un des instruments évoqués ci-dessous pour pouvoir voir le col de l’utérus et recueillir des cellules qui seront analysées par un laboratoire. Cet examen n’est pas douloureux, seulement désagréable pour certaines femmes.` Qui est habilité à pratiquer le frottis ? N’importe quel médecin généraliste, sage femme ou gynécologue est habilité à pratiquer le frottis. Quel instrument est utilisé ? ​Il existe deux types d’instruments utilisés selon la préférence des médecins, sans différence d’efficacité. Le premier se présente sous la forme d’une languette ou spatule en bois alors que le second ressemble à un long coton-tige dont l’extrémité est en poils souples. Comment récupère-t-on les résultats ? ​Chaque médecin travaille avec un ou plusieurs laboratoires qui lui fournissent le matériel nécessaire à l’examen et l’enveloppe pour envoyer ces prélèvements. C’est la patiente qui est généralement chargée d’envoyer les échantillons au laboratoire qui lui retourne alors les résultats ainsi qu’au médecin.

11 Technique du prélèvement

12 Soit par la technique classique sur lames
(une lame pour le frottis de l'exocol et la jonction endo-exocervicale, puis une deuxième lame pour le frottis de l'endocol). Le prélèvement se fait par frottement à l'aide : d'une petite spatule en bois (à extrémité simple et extrémité bifide) afin de réaliser les prélèvements au niveau de la muqueuse tapissant la portion vaginale du col utérin ; ce prélèvement doit être obligatoirement réalisé au niveau de la jonction entre la muqueuse de l'exocol et la muqueuse de l'endocol. d'un écouvillon (une tige en bois portant à son extrémité un petit bourgeon en coton) ou d'une petite brosse pour faire le prélèvement de la muqueuse tapissant l'endocol (le canal cervical). Remarque : quand on réalisait le frottis cervico-vaginaux (FCV), il fallait effectuer, à l'aide d'une spatule en bois, un troisième prélèvement au niveau de la muqueuse tapissant la partie la plus profonde du vagin (cul-de-sac vaginal postérieur) ; puis ce prélèvement était déposé sur une troisième lame.

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14 Soit par la technique dans un milieu liquide
: le frottis est effectué à l'aide d'une brosse spéciale permettant d'effectuer simultanément un prélèvement cellulaire au niveau de l'exocol, de la ligne de jonction endo-exocervicale et de l'endocol (canal cervical) ; ensuite cette brosse est introduite dans le flacon de recueil. En frottant, par quelques mouvements, la brosse sur la paroi de ce flacon, une grande partie des cellules prélevées au niveau des différentes muqueuses tapissant col utérin va être libérée dans le liquide de conservation cellulaire contenu le flacon. Après fermeture du flacon contenant le prélèvement cervico-utérin et aussi la brosse qui a servi à faire ce prélèvement, le tout est adressé au laboratoire d'anatomopathologie dans le but :d'analyser le frottis cervico-utérin du point de vu cytologique ; Aussi, dans certains cas particuliers, sur ce prélèvement il est possible de rechercher la présence de virus HPV potentiellement oncogènes et détecter la présence dans les cellules, de certains types de protéines comme la P16 (une protéine normale du cycle cellulaire surexprimée dans les cellules dysplasiques) et de certains marqueurs comme KI-67 (marqueur de la prolifération cellulaire). La recherche, dans des cas particuliers, de ces deux indicateurs aide à approfondir l'analyse des cellules étudiées afin de donner le meilleur diagnostic possible puis la meilleure prise en charge future.

15 Prélèvement en milieu liquide

16 Etalement sur lame

17 Fixation des lames

18 Technique de coloration
Les lames doivent être fixées soit dans un mélange d’alcool-éther, soit à l’aide d’une laque fixative. Les lames sont directement plongées dans un bain d’alcool à 80°, puis dans plusieurs bains d’eau courante. • Hématoxyline de Harris (5 min.) • Rinçage à l’eau courante jusqu’à bleuissement des frottis (si les frottis ne bleuissent pas assez, les plonger dans une solution d’eau ammoniacale. Rincer alors à l’eau courante avant de continuer). Passer rapidement dans des bains d’alcool à 70° et 95°. • Colorer les lames par la solution d’Orange G * (5 min.) Passer rapidement (30 sec.) dans deux bains d’alcool à 95°. • Colorer les lames par la solution polychrome EA50 * (5 min.) Passer rapidement (30 sec.) dans deux bains d’alcool à 95°, puis dans deux bains successifs d’alcool absolu. Passer dans deux bains successifs de Xylène. Monter

19 Résultat de Coloration de Papanicolaou :
c’est la coloration de routine en cytologie gynécologique. Noyaux bleu Cytoplasme des cellules profondes bleu Cytoplasme des cellules superficielles rose