BTS DIETETIQUE 1 TD DE BIOCHIMIE TD 5 : LES AMINOACIDES.

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1 BTS DIETETIQUE 1 TD DE BIOCHIMIE TD 5 : LES AMINOACIDES

2 Exercice 1 : Vrai ou faux Spectre d’absorbance des acides aminés aromatiques

3 Exercice 1 : Vrai ou faux Etats de la glycine pH Forme cationique A+
pHi pH H3O+ H2O H3O+ H2O Forme cationique A+ Zwitterion A Forme anionique A–

4 pH [A+] = [A] [A] = [A–] A+ A A– Forme cationique Zwitterion
50 100 [A+] = [A] [A] = [A–] A+ A A– pHi pH H3O+ H3O+ H2O H2O H3O+ H3O+ H2O H2O Forme cationique Zwitterion Forme anionique A+ A A–

5 pKa = pH de demi-ionisation des fonctions ionisables
% forme pH = pKa1 pH = pKa2 [A+] = [A] [A] = [A–] 50 100 A+ A A– pHi pH pKa = pH de demi-ionisation des fonctions ionisables Si pH = pKa1  [COOH] = [COOH] Si pH = pKa2  [NH2] = [NH3+]

6 Exercice 4 : Electrophorèse
Zone de dépôt Papier – + Tampon pH = 6 DÉPOT Cathode Anode G +

7 Exercice 6 : Analyse peptide
Acides aminés HYDROLYSE TOTALE Ct Nt Détermination Nt et Ct Protéine Oxydation S–S DENATURATION

8 LIBERATION DE TOUS LES AA
Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Méthode de Sanger (au FDNB) H2N COOH FDNB HN COOH DNP HCl LIBERATION DE TOUS LES AA HN DNP SEUL AA Nt EST MARQUE

9 Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Méthode d’Edman
H2N COOH PITC PITC PTC PITC PITC PITC PITC PITC

10 Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Méthode d’Edman
H2N COOH PITC PITC PITC PITC PITC PITC

11 Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Méthode d’Edman
H2N H2N COOH PITC PITC PITC PITC PITC PITC

12 Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Méthode d’Edman
H2N H2N COOH PITC PITC PITC PITC PITC

13 Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Méthode d’Edman
H2N H2N H2N COOH PITC PITC PITC PITC PITC

14 Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Méthode d’Edman
H2N H2N H2N COOH PITC PITC PITC PITC

15 Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Méthode d’Edman
DETECTEUR H2N H2N H2N H2N COOH MÉTHODE RÉCURRENTE PITC PERMET LE SÉQUENÇAGE PITC PITC PITC

16 Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Aminopeptidase
DETECTEUR H2N COOH

17 Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Aminopeptidase
DETECTEUR H2N H2N COOH

18 Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Aminopeptidase
DETECTEUR H2N H2N H2N COOH

19 Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Aminopeptidase
DETECTEUR H2N H2N H2N H2N COOH METHODE RECURENTE LENTE AVEC CERTAINS AA

20 Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de C-terminal Carboxypeptidase
Dégradation de la protéine par le Ct

21 Exercice 6 : Analyse peptide
Acides aminés HYDROLYSE TOTALE Ct Nt Détermination Nt et Ct Protéine Oxydation S–S SEQUENCAGE DENATURATION TRYPSINE CHIMOTRYPSINE Arg ou Lys Phe, Tyr, Trp