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La congélation d’ovocytes et du cortex ovarien

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Présentation au sujet: "La congélation d’ovocytes et du cortex ovarien"— Transcription de la présentation:

1 La congélation d’ovocytes et du cortex ovarien
Pr. Catherine POIROT UF Biologie de la Reproduction Groupe Hospitalier Pitié-Salpêtrière

2 Introduction Congélation du gamète féminin est une technique récente
Ovocyte mature Ovocyte immature

3 Indications Ovocyte mature Ovocyte immature Dans le cadre de l’AMP
Préservation de la fertilité Ovocyte immature

4 Dans le cadre de la préservation de la fertilité
Quand proposer ces techniques ?

5 Impact des traitements
RESERVE } EN CROISSANCE } Seulement certains traitements Action sur les mitoses REVERSIBLE IRREVERSIBLE

6 Traitements à haut risque pour la fonction ovarienne
Cyclophosphamide Chlorambucil Melphalan Busulfan Moutardes azotées Procarbazine Radiothérapie corporelle totale…..

7 Traitements à risque intermédiaire
Adriamycine Cisplatine

8 Traitements à risque faible ou sans risque
Méthotrexate 5-fluorouracile Vincristine Bléomycine Actinomycine D

9 A moduler en fonction de :
L’age De la durée Mode d’administration Dose totale

10 Congélation ovocyte mature
Inconvénients Rare Postpubère Stimulation de l’ovulation Délai hyperoestrogénie Congélabilité Avantages Gamète Pas de problème éthique « Cellule prête à l’emploi »

11 Congélation ovocyte mature
Première grossesse 1986 DEPUIS 1997 Taux de survie ovocytaire : 30 à 82% Technique de fécondation : ICSI Taux de fécondation : 50 à 89% GROSSESSES

12 Résultats Congélation lente Vitrification
3,3% de grossesses par ovocyte congelé Vitrification 6,8% de grossesses par ovocyte vitrifié

13 327 autres bébés ont été colligés TOTAL : 936 enfants nés
De 308 bébés nés : ovocytes congelés lentement 289 bébés nés : ovocytes vitrifiés 12 bébés nés « après les 2 méthodes » 327 autres bébés ont été colligés TOTAL : 936 enfants nés 12 malformations (1,3%) Noyes N et al. 2009

14 La cryoconservation de cortex ovarien

15 RATIONNEL Ovocyte mature : RARE Faible congélabilité,
CI à la stimulation de l’ovulation Ovocytes immatures Congélabilité CORTEX OVARIEN

16 Indications Absolues Autres Alkylants à forte dose
Radiothérapie corporelle totale Ovariectomies Autres «Prise en charge médicale susceptible d’altérer sa fertilité ou lorsque sa fertilité risque d’être prématurément altérée »

17 Cryoconservation de cortex ovarien
Avantages Nombreux ovocytes immatures Congélabilité Pas de stimulation de l’ovulation Age Inconvénients Technique nouvelle Prélèvement lors d’une intervention chirurgicale Cellule non prête à l’emploi : Utilisations? Peu de résultats en terme de grossesses

18 Particularités de la prise en charge
Semi urgence Multidisciplinarité +++ Cadre réglementaire Plus dans le cadre d’un protocole de recherche clinique Activité soumise à autorisation et à agrément Consentement Programmation

19 Différentes étapes

20 Prélèvement

21 Transport

22 PREPARATION DE L’OVAIRE au laboratoire

23 Congélation proprement dite

24 Descente en température : LENTE
-5 -10 -15 -20 -25 -30 -35 -40 TEMPERATURE -2°C/mn Seeding (-9°C) -0,3°C/mn -10°C/mn ( -140°C) -196°C 10 20 30 90 100 110 120 TEMPS (minutes)

25 ANATOMOPATHOLOGIQUE Médullaire Cortex Buts Compte des follicules
Localisation secondaire de la pathologie

26 *Autogreffe de cortex ovarien *Culture de follicules ovariens
DIFFICULTE UTILISATION DU TISSU OVARIEN *Autogreffe de cortex ovarien *Culture de follicules ovariens

27 Autogreffe de cortex ovarien

28 Auteurs (année) Age patiente au moment du prélèvement d’ovaire Pathologie au moment de la cryoconservation d’ovaire Localisation de la greffe Résultats Oktay K (2000) 29 ans Ménométrorragie Fossette ovarienne Développement folliculaire et sécrétion d’oestradiol après stimulation de l’ovulation Radford J (2001) 36 ans Maladie de Hodgkin Reste d’ovaire Restauration fonction ovarienne Callejo J 47 ans Périménopause Paroi abdominale (PA) Restauration fonction endocrine de l’ovaire (2004) 30 ans Cancer du sein Sous la peau de la PA Obtention d’un embryon Tryde Schmidt KL 32 ans Restauration de la fonction ovarienne Obtention d’un ovocyte en Métaphase II Donnez J 25 ans Maladie de Hodgkin, Stade IV Premier enfant né Kim S 37 ans Cancer du col de l’utérus, stade Ib Gaines musculaires (pectoral, droit) Meirow D (2005) 28 ans Lymphome non hodgkinien Un enfant Schmidt KL Ovaire et PA Ovaire Un embryon Wolner-Hanssen P Aplasie médullaire Avant bras Développement folliculaire après stimulation (2006) 21 ans Drépanocytose SS Ovaire et péritoine proche de l’ovaire Demeestere I 24 ans Péritoine et PA Fausse couche spontanée (9SA) Rosendhal M Ovaire, péritoine, PA Grossesse biochimique après transfert embryons venant de la localisation hétérotopique Demeestere I* (2007) Grossesse spontanée : petite fille Donnez J** (2008) 22 ans Maladie de Wegener Restauration des cycles et obtention ovocytes Restauration des cycles Andersen CY 26 ans 27 ans 25 ans (a) Sarcome d’Ewing Restauration activité du tissu ovarien Silber SJ Insuffisance ovarienne ovaire

29 Auteurs (année) Age patiente au moment du Prélèvement d’ovaire Pathologie au moment de la cryoconservation d’ovaire Localisation de la greffe Résultats Donnez J (2004) 25 ans Maladie de Hodgkin, Stade IV Reste d’ovaire Premier enfant né Meirow D (2005) 28 ans Lymphome non hodgkinien Un enfant Demeestere I (2006) 24 ans* Maladie de Hodgkin Péritoine et PA Fausse couche spontanée (9SA) Rosendhal M Ovaire, péritoine, PA Grossesse biochimique après transfert embryons venant de la localisation hétérotopique (2007) Ovaire et PA Grossesse spontanée : petite fille Andersen CY (2008) 26 ans 27 ans** Sarcome d’Ewing Ovaire Silber SJ Insuffisance ovarienne Sanchez M (2010) 36 ans K du sein Jumeaux Roux C 20 ans Drépanocytose Péritoine Ernst E Un (2ème) enfant

30 Autogreffe de cortex ovarien
24 patientes 11 grossesses 1 naissance en 2004 (Donnez) 1 naissance en 2005 (Meirow) 1 FCS 2006 (Demeestere) 1 grossesse biochimique en 2006 (Rosendhal) 1 naissance en 2007 (Demeestere) 3 naissances en 2008 (Andersen, Silber) 1 naissance de jumeaux en 2009 (Sanchez-Serrano) 2 naissances en 2010 (Roux, Ernst) Une autre naissance française : 2009 (Limoges)

31 11 enfants nés

32 Autogreffe de tissu ovarien
Questions posées Localisation Vascularisation Durée de vie du greffon Nombre de greffons……

33 Autogreffe de tissu ovarien
Avantages Grossesses naturelles Fonction endocrine Inconvénients FIV Réintroduction de la pathologie

34 Pathologies à risque de localisation ovarienne
Risque faible Tumeur de Wilm Sarcome d’Ewing Cancer du sein (I-III) LNH Hodgkin…… Risque modéré Adénocarcinome du col K du colon K du sein (IV)

35 Risque élevé Leucémies Neuroblastome Lymphome de Burkitt

36 Croissance folliculaire in vitro

37 Croissance folliculaire in vitro
Principaux résultats acquis Obtention de jeunes Souris ( Spears, 1994; Eppig, 1996; Cortvrindt, )

38 Culture folliculaire in vitro
Avantages Pas de risque de réintroduire la pathologie Inconvénients Folliculogenèse longue Gros follicule Conditions de culture?

39 FICHIER NATIONAL DU GRECOT
(GROUPE DE RECHERCHE ET D’ETUDE DE LA CRYOCONSERVATION OVARIENNE ET TESTICULAIRE) PECH J.C; POIROT C; PIVER P; RAYNAUD K.

40 LIEUX DES PRELEVEMENTS
AMIENS (8) ROUEN (50) LILLE (53) (12) BOIS GUILLAUME (10) REIMS PARIS NANCY (7) CAEN (10) (402) STRASBOURG (17) ANGERS (1) BESANCON (10) TOURS (10) NANTES (70) CLERMONT-FERRAND (26) LYON LIMOGES (99) (26) SAINT-ETIENNE BORDEAUX (1) (11) NICE (1) TOULOUSE (19) MARSEILLE (11) MONTPELLIER (2)

41 DISTRIBUTION PAR GROUPE D’AGE
M = 17,5 ans +/- 9

42 EVOLUTION DU NOMBRE DE PRELEVEMENT

43 DISTRIBUTION PAR GROUPE DE PATHOLOGIE

44 REPARTITION DES INDICATIONS PAR TRANCHE D’AGE

45 DISTRIBUTION DES PATHOLOGIES HEMATOLOGIQUES MALIGNES

46 DISTRIBUTION DES TUMEURS SOLIDES

47 DISTRIBUTION DES PATHOLOGIES NON MALIGNES
Hémoglobinopathies Drépanocytoses homozygotes SS (27) Thalassémies majeures (7) Autre (1) Maladies auto-immunes : LEAD (9) PAN (2) Maladie de Wegener (3) Syndrome de Goodpasture Purpura thrombopénique idiopathique Vascularite auto-immune Polyangite microscopique Myélite auto-immune Autre Maladies génétiques IOP Syndrome de Turner (5) Délétion gène FOXL2/BPES (2) Galactosémie congénitale hétérozygote Aplasie médullaire Anémie de Fanconi Lymphohistyocytose familiale Maladie de Shwachman Maladie de Chediak-Higashi Mutation BRCA1 Autres : Ovotestis Kystes ovariens organiques (5) Déficit immunitaire sévère (6) Néphropathie avec hyalinose segmentaire et focale

48 DISTRIBUTION DES TRAITEMENTS CASTRATEURS

49 Conclusions Techniques récentes Nombreuses questions
Peu de résultats en terme de grossesses Important de proposer ces techniques Bien cerner la profondeur de l’insuffisance ovarienne éventuelle pour PROPOSER UNE TECHNIQUE ADAPTEE AU RISQUE Ne pas être plus délétère avec les techniques de préservation de fertilité qu’avec le traitement


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