Les Différents Types De Cultures Cellulaires En Biotechnologie Et Leurs Applications – Introduction –La culture animale –La culture végétale.

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1 Les Différents Types De Cultures Cellulaires En Biotechnologie Et Leurs Applications – Introduction –La culture animale –La culture végétale

2 Introduction Généralités Définition des termes : « culture cellulaire » « culture primaire » « lignées continues » « cellules souches » « biotechnologie » « virologie »

3 Généralités La Culture cellulaire ou culture in vitro est un ensemble de techniques qui combinent l’asepsie à un environnement parfaitement contrôlé (milieu défini ). Ces méthodes s’appliquent aux plantes, aux cellules animales mais aussi aux tissus et bien entendu à des cellules plus ou moins isolées

4 La Culture Cellulaire C’est l’ensemble des techniques de laboratoire permettant l’accroissement et la multiplication de cellules en dehors de l’organisme.

5 Culture Primaire La culture primaire est la mise en culture des cellules de l’organe ou du prélèvement. Les cellules récupérées par des techniques de dissociation cellulaire sont placées dans des milieux à fin de proliférer

6 Lignées Continues Les lignées continues sont des cellules qui sont devenues immortelles comme dans le cas des cellules tumorales. Elles se multiplient de façon anarchique dans la boite c’est à dire que les couches se superposent, se sont des cellules transformées

7 Les Cellules Souches Ce sont des cellules de l’embryon ou de certains tissus de l’adulte ayant la faculté de de se diviser indéfiniment et donnant, à chaque division, une cellule identique à elle-même et une cellule qui donnera à son tour des cellules spécialisées. Les cellules souches peuvent ainsi engendrer tous les types cellulaires de l’organisme, leur utilisation a donné naissance à de nombreuses applications dans la biotechnologie et le médical

8 La Biotechnologie C’est l’ensemble des techniques produisant par manipulations génétiques des molécules biologiques ou des organismes transgéniques, en vue d’applications dans l’industrie et dans la médecine (les nouvelles biotechnologies sont le génie génétique, la fusion cellulaire, la culture cellulaire et la technologie d’immobilisation des enzymes)‏

9 La Virologie C’est une branche de la biotechnologie qui étudie le développement et la mise en culture des virus à fin de fabriquer des vaccins

10 La Culture Animale A)Un peu d’histoire … A)La technique A)Les applications

11 Un Peu D’histoire … Première culture de cellules souches embryonnaires humaines Th omson 1998 Première culture de cellules souches embryonnaires de souris M artin 1986 Introduction de la mort cellulaire après un nombre défini de divisions HAYFLICK 1961 Recherche sur les besoins des cellules en culture E agle 1955 Première lignée de cellules HeLa G rey 1952 Montre que la survie des cellules dépend de l’apport en nourriture stérile C arrel 1913 Première culture de moelle épinière H arrison 1907

12 La Technique 3 points essentiels : Travailler avec un personnel formé Dans des conditions d’asepsie Avec des milieux appropriés

13 Travailler Avec Un Personnel Formé Il y a différentes formations possibles dans le domaine dont le BTS Biotechnologie

14 Dans Des Conditions D’asepsie Pour avoir des conditions d’asepsie optimales on utilise des hottes à flux laminaire préalablement stérilisées aux UV et à l’alcool Un équipement personnel réservé à la discipline Et un matériel stérilisé par autoclavage ou par l’alcool

15 Avec Des Milieux Appropriés 1) Le milieu est maintenu à 37°C (température optimale de développement)‏ 2) Pression en CO 2 à 5% dans le MEM utilisé en laboratoire de BCM

16 3) Le pH doit être au alentour de 7- 7.7 Les tampons utilisés sont le HCO 3 - ou le tampon HEPES 4) L’osmolarité est comprise entre 250 et 320 mOsm /L 5) Le milieu doit contenir l’ensemble des oligoélément, sucres, acides aminés, et vitamines nécessaires à la croissance des cellules

17 Les Applications 1)Virologie 1)Biopharmacie 1)Application médicale

18 Virologie La virologie utilise la culture cellulaire à fin de diagnostiquer et de conserver des virus pour faire des vaccins.

19 Biopharmacie Dans la biopharmacie, on se sert des cellules pour synthétiser des molécules complexes comme certaines protéines ou des anticorps

20 Application Médicale Grâce à la biotechnologie, il est possible de recréer des morceaux de peau lésée ( pour les grands brûlés) à partir d’un échantillon de 2 cm 2 d’épiderme sain. Au bout de 3 semaines, on obtient 1m 2 de peau « artificielle ». Les premières expériences date de 1979, et ont été réalisées par l’équipe de Mr Howard Green

21 La Culture Végétale A)Quelques dates … A)La technique A)Les applications

22 Quelques Dates … Obtient la première carotte entière à partir d’un seule cellule Kato 1964 Premier à obtenir un explant avec une culture suffisante pour être autotrophe White 1932 Reprise des expériences et du milieu de Haberlandt, les cellules ne survivent pas longtemps Kotte & Robin 1922 Premières expériences sur la culture végétale et premier milieu de culture Haberlandt 1902

23 La Technique 3 points essentiels : Travailler avec un personnel formé (vue dans la partie culture animale )‏ Dans des conditions d’asepsie (vue dans la partie culture animale )‏ avec des milieux appropriés

24 Avec Des Milieux Appropriés

25 Les Applications L’application majeure de la culture végétale in vitro est la modification et la production de masse pour les pays en voie de développement La seconde est la conservation de plantes a intérêt économique et/ou menacées par une épidémie ou une surexploitation

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27 Conclusion Aujourd’hui l’étique est le principal frein de l’avancée de la culture cellulaire surtout depuis que l’on a la possibilité de faire des expérimentations sur des cellules souches embryonnaires humaines. MAIS que nous réserve l’avenir ?…