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Exemple de résultat obtenu avec la technique du FRAP

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Présentation au sujet: "Exemple de résultat obtenu avec la technique du FRAP"— Transcription de la présentation:

1 Exemple de résultat obtenu avec la technique du FRAP
Fluorescens recovery after photobleaching

2 Expérience (Frye et Edidin – 1970)
A – fluorescence d’un fibroblaste murin (ac anti-protéines mb marqués par fluorescéine) B – fluorescence d’un fibroblaste humain (ac anti-protéines mb marqués à la rhodamine) C – fluorescence juste après l’hybridation des deux fibroblastes D-E ; fluorescence des deux marqueurs à t = 20 mn F-G : fluorescence des deux marqueurs à t = 40 mn

3 MEC Structure tripartite MIC Electronographie (x ) de la membrane d’une hématie

4 Spectrine et actine s’associent pour former le cytosquelette de l’hématie

5 Les deux protéines transmembranaires principales sont
Tiré de Histologoie Faculté Lyon nord Jonctions serrées au MET Jonctions serrées (cryodécapage) Les deux protéines transmembranaires principales sont l’occludine et la claudine

6 Diversité des jonctions au niveau de l’entérocyte

7 Immunofluorescence montrant le réseau intracellulaire et les desmosomes

8 Membrane plasmique (structure tripartite)

9 Ceinture d’adhérence dans les membranes des entérocytes

10 GAP junctions dans une synapse électrique

11 Un liposome Les liposomes sont constitués à partir de phospholipides, ces derniers s’organisent en minimisant les interactions de leur chaîne hydrocarbonée avec l’eau. Ces systèmes miment les membranes biologiques et ont permis les premières études sur la perméabilité membranaire. Utilisations actuelles: - en imagerie médicale par introduction de substances fluorescentes ou radiomarquées dans la recherche pharmaceutique comme vecteurs de médicaments, leur structure très proche de celle des membranes cellulaires leur permet de fusionner avec elles libérant des principes actifs.

12 Première loi de Fick Adolph FICK

13 Découvertes en 1993, les aquaporines permettent le passage de l'eau de part et d'autre de la membrane tout en empêchant les ions de pénétrer dans la cellule.

14 Modèle de fonctionnement d’une perméase à glucose : GluT1
GluT1 est présent dans presque toutes les cellules animales

15 Transport actif primaire : un exemple l’H+ ATPase classe V du lysosome

16 Transport actif secondaire du glucose dans l’entérocyte
(le symporteur est une pompe, mode de fonctionnement Différent de gluT1)

17 Enregistrement du potentiel de membrane

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20 La phagocytose

21 L'hypothèse SNARE était à l'origine basée sur la découverte dans une fraction 20S d'un homogénat de cerveau centrifugé en gradient sucrose, d'un complexe stœchiométrique composé de v– et t–SNARE associé à SNAP et NSF . En présence d'ATP tous les composants du complexe 20S sont nécessaires et suffisants pour assurer la fusion des vésicules entre elles. On sait maintenant que ce sont les SNAREs qui sont responsables de la fusion et que SNAP et NSF servent à garder les Q– et R–SNAREs dans un état dissocié et donc potentiellement compétents pour la fusion.

22 Observation au microscope optique de mésentère (x1000)
Fibres d’élastine Mastocyte Fibre de collagène Fibroblaste Vaisseau sanguin

23 Fibroblaste en présence d’anticorps
Antivinculine ( la partie intracellulaire de l’intégrine est liée à la vinculine)

24 Modèle d’organisation de la matrice
du tissu conjonctif Organisation d’un protéoglycane Le collagène

25 La paroi primaire

26 Modèle d’organisation de la paroi primaire
et mise en place de la paroi secondaire


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