Questions posées Comment est créée la grande diversité des différents types neuronaux (1 gène, 1 neurone ?)? Comment sont-ils positionnés correctement.

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1 Questions posées Comment est créée la grande diversité des différents types neuronaux (1 gène, 1 neurone ?)? Comment sont-ils positionnés correctement (de façon reproductible ?) Comment est contrôlée la forme cellulaire des neurones et ses variations (dendrites, axones ?) Comment un axone retrouve sa cible ? Comment peut-il y avoir des gradients d’innervation (conservation de la topologie)? Comment se mettent en place les synapses ? Quelle est leur plasticité au cours du temps ? Périodes critiques ?

2 Techniques utilisées

3 Techniques utilisées Observation in situ (dans l’organisme en développement) Importance techniques de marquage cellulaire et d’imagerie Utilisation d’organismes modèles (génétique) A ce moment là, j’ai parlé de la technique grasp, que je venais d’apprendre en congrès, et qui permet de marquer les synapses entre neurones Idée qu’on ne connaît pas encore tout le réseau ! Même chez l’homme

4 Techniques utilisées Observation in situ (dans l’organisme en développement) Importance techniques de marquage cellulaire et d’imagerie Utilisation d’organismes modèles (génétique) - Nématode (C. elegans) - Drosophile (D. melanogaster) - Zebrafish (Poisson zèbre, D. reno) - Xénope - Souris

5 Techniques utilisées Observation in situ (dans l’organisme en développement) : microscopie Nomarski ou DIC (differential interference contrast)

6 Techniques utilisées Observation in situ (dans l’organisme en développement) : microscopie Nomarski ou DIC (differential interference contrast)

7 Techniques utilisées Observation in situ (dans l’organisme en développement) : microscopie Nomarski ou DIC (differential interference contrast) Développement Nématode

8 Techniques utilisées Observation in situ (dans l’organisme en développement) : microscopie Nomarski ou DIC (differential interference contrast) Développement précoce Nématode

9 Techniques utilisées Observation in situ (dans l’organisme en développement) : microscopie à fluorescence

10 Techniques utilisées Observation in situ (dans l’organisme en développement) : microscopie à fluorescence

11 Techniques utilisées Observation in situ (dans l’organisme en développement) : microscopie à epifluorescence (champ plein)

12 Techniques utilisées Observation in situ (dans l’organisme en développement) : microscopie à epifluorescence (champ plein)

13 Techniques utilisées Observation in situ (dans l’organisme en développement) : microscopie à fluorescence CONFOCALE

14 Techniques utilisées Observation in situ (dans l’organisme en développement) : microscopie à fluorescence CONFOCALE

15 Techniques utilisées Observation in situ (dans l’organisme en développement) : microscopie à fluorescence CONFOCALE

16 Techniques utilisées Observation in situ (dans l’organisme en développement) : microscopie à fluorescence CONFOCALE

17 nc82 Tautrap glomérules Lobes antennaires 50 µm Lobe optique calyces
Confocal Tautrapnc82 40x (à chaque image, un plan confocal sélectionné) 1024 pixels = 325,8 µm Lobe optique fait 813 pixels de large (258 µm) Lobes antennaires font 876 pixels de large (278 µm) Calyces font 1008 pixels de large (325 µm) Barre d’échelle de 50 µm par image 50 µm Lobe optique calyces

18 Le développement chez la droso

19 Le développement précoce chez la droso

20 Le développement précoce chez la droso

21 Le développement du tissu nerveux chez la droso

22 Le développement du tissu nerveux chez la droso

23 Le développement du tissu nerveux chez la droso

24 Le développement du tissu nerveux chez la droso

25 Le développement du tissu nerveux chez la droso

26 Le développement du tissu nerveux chez la droso

27 Le développement du tissu nerveux chez la droso

28 Le développement du tissu nerveux chez la droso

29 Le développement du tissu nerveux chez les Vert

30 Le développement du tissu nerveux chez les Vert

31 Le développement du tissu nerveux chez les Vert

32 Le développement du tissu nerveux chez les Vert
Cellules crête neurale : Mélanocytes Os, cartilage Cellules gliales SNP

33 L’organisateur de Spemann

34 L’organisateur de Spemann
Domaine présomptif Détermination cellulaire (cellular commitment) Le tissu nerveux est déterminé après la gastrulation et le réarrangement cellulaire qui s’y produit (Hamburger 1969)

35 L’organisateur de Spemann
Expérience de Spemann et Mangold - sont-ce les cellules greffées qui forment l’ensemble des tissus du second axe ? Embryon pigmenté

36 L’organisateur de Spemann
Expérience de Spemann et Mangold - sont-ce les cellules greffées qui forment l’ensemble des tissus du second axe ? Embryon pigmenté Notion d’induction

37 L’organisateur de Spemann
De 1932 aux années 50 : plus de 100 études essayant de caractériser l’activité inductrice - à partir de lèvres de blastopores : nature chimique (lipide extractible ou non …) - pour avoir plus de tissu, essais à partir d’autres tissus pour voir s’ils ont une activité inductrice ou non (souvent oui, par ex foie et reins) A partir des années 80, utilisation des techniques de biologie moléculaire