REGULATION DIFFERENTIELLE DES GENES HOX DANS L’ENDOMETRIOSE

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1 REGULATION DIFFERENTIELLE DES GENES HOX DANS L’ENDOMETRIOSE
Delphine Héquet, Master 2 Reproduction et Développement, Paris 7 Institut Cochin, INSERM U1016, Daniel Vaiman, Bruno Borghese Service de Gynécologie-Obstétrique Saint-Vincent de Paul, Pr Chapron UMR 8104

2 ENDOMETRIOSE : pathologie métastatique bénigne
10 % des femmes en âge de procréer DOULEURS PELVIENNES CHRONIQUES ET INFERTILITE

3 GENES HOX 39 GENES, 4 CLUSTERS
A (chromosome 7) B (chromosome 17) C (chromosome 12) D (chromosome 2) Modèle d’expression des gènes HOX chez les mammifères. D’après Veraska et al

4 GENES HOX ET ENDOMETRIOSE
Puces à ADN 5600 genes dérégulés genes HOX-A et HOX-B réprimés genes HOX-C et HOX-D surexprimés Borghese et al, 2007

5 OBJECTIFS ET METHODES 1- EXPRESSION DES GENES HOX PCRq et Western Blot
1-a Confirmation de la dérégulation : Endomètre eutopique et ectopique 1-b Nouvelle information : Endomètre témoin 2- LOCALISATION DES PROTEINES HOX Immunohistochimie Endomètre eutopique et ectopique Endomètre témoin 3- MECANISMES DE REGULATION : RECHERCHE D’ARN ANTISENS RT-PCR Spécifique

6 HYPOTHESE : ARN anti-sens
CLUSTER HOX 5’ Gène 1 Gène 2 Gène 3 Gène 4 Gène 5 Gène 6 Gène 7 Gène 8 Gène 9 Gène 10 Gène 11 Gène 13 Gène 12 3’ 6

7 METHODES RT-PCR spécifique CLUSTER HOX A 5’ 3’ 7 A13 A11 A10 A9 A7 A6
Amorce(s) 7

8 RESULTATS 1- EXPRESSION
ARN : HOX A *** *** * * *** ** 2ΔCt témoin endomètre endométriome témoin endomètre endométriome 2ΔCt n= n= n=16 n= n= n=16 8

9 RESULTATS RESULTATS 1- EXPRESSION
ARN : HOX C *** *** *** * ** 2ΔCt témoin endomètre endométriome témoin endomètre endométriome 2ΔCt n= n= n=16 n= n= n=16 9

10 RESULTATS RESULTATS 1- EXPRESSION
PROTEINES 10

11 RESULTATS 2- LOCALISATION
HOX A1 Témoin n=4 Endomètre n=4 Endométriome n=4 HOX A10 11

12 RESULTATS 2- LOCALISATION
HOX C4 Témoin n=4 Endomètre n=4 Endométriome n=4 HOX C8 12

13 RESULTATS 3- MECANISME ARN ANTI-SENS n=3 CLUSTER HOX A 5’ 3’ 13
Amorce(s) n=3 13

14 CONCLUSION Confirmation d’une dérégulation des gènes HOX dans l’endométriose Expression opposée à celle du cancer de l’ovaire Existence d’un ARN antisens