DIFFERENTIAL REGULATION OF HOX GENES IN ENDOMETRIOSIS

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1 DIFFERENTIAL REGULATION OF HOX GENES IN ENDOMETRIOSIS
Delphine Héquet, Master 2 Reproduction et Développement, Paris 7 Institut Cochin, INSERM U1016, Daniel Vaiman, Bruno Borghese U1016 UMR 8104

2 ENDOMETRIOSE : pathologie métastatique bénigne
10 % des femmes en âge de procréer DOULEURS PELVIENNES CHRONIQUES ET INFERTILITE LOCALISATION ECTOPIQUE D’ENDOMETRE (GLANDES ET STROMA) PHYSIOPATHOLOGIE MAL CONNUE

3 ENDOMETRIOSE : hypothèses de physiopathologie

4 GENES HOX 39 GENES Modèle d’expression des gènes HOX chez les mammifères. D’après Veraska et al

5 GENES HOX ET CANCER

6 GENES HOX ET ENDOMETRIOSE
Puces à ADN 5600 genes dérégulés genes HOX-A et HOX-B réprimés genes HOX-C et HOX-D surexprimés Borghese et al, 2007

7 OBJECTIFS CONFIRMATION PAR PCRq WESTERN BLOT
EXPRESSION DES GENES HOX : ARN CONFIRMATION PAR PCRq NOUVELLE INFORMATION SUR ENDOMETRE TEMOIN EXPRESSION DES GENES HOX : PROTEINES WESTERN BLOT LOCALISATION DES HOX PAR IMMUNOHISTOCHIMIE MECANISMES DE REGULATION DES GENES HOX DANS L’ENDOMETRIOSE RECHERCHE D’ARN ANTISENS PAR RT-PCR SPECIFIQUES

8 HYPOTHESE CLUSTER HOX 5’ 3’
Gène 1 Gène 2 Gène 3 Gène 4 Gène 5 Gène 6 Gène 7 Gène 8 Gène 9 Gène 10 Gène 11 Gène 13 Gène 12 3’ Illustration schématique de la régulation des gènes HOX par des molécules d’ARN anti-sens. Le gène 13 est plus dérégulé que le gène 12 et ainsi de suite le long du cluster. 8

9 MATERIEL ET METHODES 1- ECHANTILLONS
Endomètre eutopique et ectopique (endométriome) d’une même patiente Endomètre témoin 2- PCR Specific antibodies against HOX proteins encoding by genes located at each extremity of clusters A and C 3- WESTERN BLOT RNA extraction, cDNA synthesis and qPCR with specific primers

10 MATERIEL ET METHODES 1- ECHANTILLONS
Endomètre eutopique et ectopique (endométriome) d’une même patiente Endomètre témoin 2- PCR Specific antibodies against HOX proteins encoding by genes located at each extremity of clusters A and C 3- ANTISENSE RNA RNA extraction, cDNA synthesis and qPCR with specific primers 10

11 RESULTATS 1- ECHANTILLONS
Endomètre eutopique et ectopique (endométriome) d’une même patiente Endomètre témoin 2- PCR Specific antibodies against HOX proteins encoding by genes located at each extremity of clusters A and C 3- ANTISENSE RNA RNA extraction, cDNA synthesis and qPCR with specific primers 11

12 CONCLUSION BETTER UNDERSTANDING OF PATHOGENESIS
DIFFERENCES BETWEEN A BENIGN METASTATIC DISEASE AND CANCER