Etude de la migration des neurones en cas de perturbation de la mitose. Anaïs Elodie Marylou Jannaïs Maïmouna Amandine Jessica Loïc Quentin. INMED Marseille,

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1 Etude de la migration des neurones en cas de perturbation de la mitose. Anaïs Elodie Marylou Jannaïs Maïmouna Amandine Jessica Loïc Quentin. INMED Marseille, Mars 2009

2 I Observation II Hypothèses III Expériences IV Analyser les résultats des expériences V Conclusion VI Perspective SOMMAIRE

3 I) Observations Echographie de cerveau à 8mois Individu normal Pathologie?

4 II) Hypothèses (Problématique) On suppose une hétérotopie, c’est-à-dire un amas de neurones mal localisés, donc risque de connexion aberrante entrainant une épilepsie. L’hétérotopie est souvent causée par un problème de migration des neurones.

5 III) Expériences A) Modèle animal C’est pour cela que nous simulons une hétérotopie en inhibant la mitose, injectant un agent antimitotique (le MAM) B) Protocole B-1)Coloration solution crésyl violet Etapes: - solution de crésyl violet 15mn - Bain d’eau distillé - Bain d’alcool de 70% à 100% (déshydratation) - Montage entre lame et lamelle

6 B-2) Double marquage On marque les 2 types cellulaires: CELLULES GLIALES & CELLULES NEURONALES Système révélate Traceur Système révélateur Anticorps Anticorps secondaire Cellule GLIALE primaire Antigène = GFAP Système révélate Traceur Système révélateur Anticorps Anticorps secondaire Cellule NEURONALE primaire Antigène = MAP2 Anti-lapin Cy3 Anti GFAP GFAP Gliale Fibrillary Protein Anti-souris FITC Anti MAP2 MAP2 Microtubule Associated Protein

7 IV)Analyser les résultats des expériences A) Différence entre un cerveau normal et un cerveau MAM chez la souris MAMCONTROLE Vue dorsale Vue ventrale

8 B) Coupe de cerveau colorée au crésyl violet CONTRÔLEMAM

9 C) Double marquage visualisé au confocal MARQUAGE GLIAL (zoom de l’hippocampe) CONTRÔLE MAM ??? Moins de marquage glial pour la tranche MAM autour des neurones ???

10 IV) CONCLUSION  Echelle macroscopique (cerveau entier) => différences significatives / importantes de morphologie.  Echelle microscopique (tranche de cerveaux) => pas de différences visibles (mauvaise localisation sur l’axe dorso- ventral).  Echelle cellulaire (zoom de l’hippocampe) => possibles différences au niveau du marquage glial et absence de marquage neuronal (problème de protocole?)

11 V) PERSPECTIVE Etudier l’organisation des neurones et des cellules gliales au sein d’une autre structure que l’hippocampe, dans le cortex par exemple.