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La CELLULE BACTÉRIENNE OU PROCARYOTE
novembre 2006 Cellule procaryote
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1. LE MICROSCOPE novembre 2006 Cellule procaryote
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1.1. Microscope optique a. Histoire novembre 2006 Cellule procaryote
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Microscope optique b. Le microscope actuel Oculaires (2)
Objectifs (4) sur tourelle (3) Vis de réglage (macrométrique et micrométrique) en hauteur de la platine (15) Platine (9) Condenseur avec diaphragme (10-13) Source de lumière (14) Statif novembre 2006 Cellule procaryote
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novembre 2006 Cellule procaryote
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exemples Photographie de frottis de bouche (coloration de Gram)
novembre 2006 Cellule procaryote
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c. Huile d’immersion novembre 2006 Cellule procaryote
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d. Techniques particulières : fond noir
Photographies de protozoaire ( novembre 2006 Cellule procaryote
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e. techniques particulières : contraste de phase et interférentiel
Pour le contraste de phase (ou la microscopie interférentielle) Voir en Sciences physiques… Photographies de protozoaire ( novembre 2006 Cellule procaryote
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f. Profondeur de champ novembre 2006 Cellule procaryote
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1.2. Microscope électronique
novembre 2006 Cellule procaryote
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MET Canon à électrons Condenseur électromagnétique
Objet sur une grille Objectif électromagnétique Oculaire électromagnétique Observateur au travers de la vitre Écran fluorescent novembre 2006 Cellule procaryote
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Exemples Microscope optique Microscope électronique
Photographie de cellule novembre 2006 Cellule procaryote
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MEB Protozoaire de la panse de ruminant recouvert de bactéries
novembre 2006 Cellule procaryote
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Zoom sur un microbe (E. coli) en MEB
Pointe d’une aiguille trempée dans une suspension d’E. coli novembre 2006 Cellule procaryote
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BILAN : Attention : l’échelle est logarithmique… novembre 2006
Cellule procaryote
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BILAN : novembre 2006 Cellule procaryote
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2. LA CELLULE BACTÉRIENNE AU MICROSCOPE
novembre 2006 Cellule procaryote
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Coques ronds en amas : Staphylococcus Coques en tétrade : Micrococcus Coques en chaînettes : Streptococcus Bacilles : Escherichia coli Coques à l’intérieur de leucocytes ou à l’extérieur : Streptococus pneumoniae ou pneumocoque Gros bacilles dans le sang (hématie de 8 µm) : Bacillus anthracis Chancres syphilitiques : Treponema pallidum novembre 2006 Cellule procaryote
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Gram (deux types de bactéries)
Mélange Clostridium et Escherichia coli Mélange Staphylococcus et Escherichia coli novembre 2006 Cellule procaryote
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au Microscope électronique (transmission)
novembre 2006 Cellule procaryote
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(microscope électronique)
Autres éléments Capsule Spore Pili et flagelles (microscope électronique) novembre 2006 Cellule procaryote
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CONSTITUANTS « TOUJOURS » PRÉSENTS
Schéma général CONSTITUANTS FACULTATIFS CONSTITUANTS « TOUJOURS » PRÉSENTS Paroi Pili Membrane plasmique Capsule Cytoplasme et ribosomes Flagelle ou Cil DNA (ADN) ou chromosome bactérien Plasmide (DNA) novembre 2006 Cellule procaryote
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3. ÉLÉMENTS CONSTANTS DES BACTÉRIES
novembre 2006 Cellule procaryote
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3.1. DNA ET SON EXPRESSION E. coli éclaté Plasmide novembre 2006
Cellule procaryote
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4 3 1 2 DNA sans … Paroi DNA avec … Cytoplasme
Bacillus cultivé sur un milieu contenant de la thymidine radioactive. Microscopie électronique en autoradiographie : les zones très noires signent la présence de la radioactivité novembre 2006 Cellule procaryote
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Plasmide novembre 2006 Cellule procaryote
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Expérience de Cairns novembre 2006 Cellule procaryote
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novembre 2006 Cellule procaryote
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novembre 2006 Cellule procaryote
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Transcription (photo)
Segment inactif du chromosome Segment actif du chromosome novembre 2006 Cellule procaryote
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Transcription (schéma)
novembre 2006 Cellule procaryote
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Traduction novembre 2006 Cellule procaryote
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3.2. MEMBRANE PLASMIQUE novembre 2006 Cellule procaryote
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MEMBRANE PLASMIQUE phospholipides protéines
Cholestérol (absent chez les bactéries) novembre 2006 Cellule procaryote
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3.3. PAROI Milieu extérieur Membrane externe Peptido- glycane
Membrane plasmique cytoplasme 10 nm = 0,010 µm = 0, mm novembre 2006 Cellule procaryote
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6 4 5 2 1 3 novembre 2006 Cellule procaryote
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novembre 2006 Cellule procaryote
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novembre 2006 Cellule procaryote
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Osmose (Bacillus) En eau distillée En eau physiologique + lysozyme
En eau distillée + lysozyme Microscopie optique en contraste de phase novembre 2006 Cellule procaryote
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Osmose (Bacillus) En eau distillée En eau physiologique + lysozyme
Microscopie optique en contraste de phase novembre 2006 Cellule procaryote
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Protoplastes Bacillus Escherichia coli novembre 2006
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Action Pénicilline sur Vibrio
En eau distillée En eau physiologique + pénicilline novembre 2006 Cellule procaryote
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Gram Action du violet cristal et du lugol Action de l’éthanol
Action de la fuchsine novembre 2006 Cellule procaryote
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Gram (résultats) Mélange Clostridium et Escherichia coli
Mélange Staphylococcus et Escherichia coli novembre 2006 Cellule procaryote
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Gram (résultats) Coques Gram + Staphylococcus Streptococcus
novembre 2006 Cellule procaryote
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Gram (résultats) E. coli novembre 2006 Cellule procaryote
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Gram (résultats) Neisseria gonorrheae (=gonocoques) novembre 2006
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4. ÉLÉMENTS FACULTATIFS DES BACTÉRIES
novembre 2006 Cellule procaryote
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4.1. Capsule Streptococcus pneumoniae novembre 2006 Cellule procaryote
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4.2. Cils et flagelles Clostridium botulinum Pseudomonas
MICROSCOPIE OPTIQUE Vibrio Salmonella novembre 2006 Cellule procaryote
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MICROSCOPIE ÉLECTRONIQUE
Cils et flagelles E.coli Vibrio MICROSCOPIE ÉLECTRONIQUE Proteus vulgaris novembre 2006 Cellule procaryote
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Cils et flagelles Leptospira icterohemorragiae
Provoque maladie professionnelle des égoutiers et des baigneurs en eau douce (la bactérie provient de l’urien du rat). novembre 2006 Cellule procaryote
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Cils et flagelles novembre 2006 Cellule procaryote
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Cils et flagelles novembre 2006 Cellule procaryote
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4.3. Pili et flagelles E.coli novembre 2006 Cellule procaryote
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Pili « sexuel » novembre 2006 Cellule procaryote
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4.4. Spore coloration de Moeller Bacillus état frais
contraste de phase Bacillus anthracis novembre 2006 Cellule procaryote
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Spore au MET (TEM) Bacillus novembre 2006 Cellule procaryote
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Bacillus thuringiensis
Cristal parasporal (protéine) Chenilles processionnaire du Pin novembre 2006 Cellule procaryote
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novembre 2006 Cellule procaryote
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Résistances à de nombreux agents chimiques (Imperméabilité)
Composition chimique de la spore : Pauvreté en eau Accumulation de dipicolinate de calcium : 10 % de la masse Propriétés de la spore : Capacité de germer Résistances à de nombreux agents chimiques (Imperméabilité) Résistance à la chaleur (jusqu’à 120°C) novembre 2006 Cellule procaryote
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Stérilisation à 120°C en atmosphère humide donc sous 200 kPa
Autoclaves Stérilisation à 120°C en atmosphère humide donc sous 200 kPa novembre 2006 Cellule procaryote
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novembre 2006 Cellule procaryote
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Durée : 6 heures Formation d’un filament axial après replication :
Séparation des deux filaments : l’un des filaments s’entoure d’une membrane Les enveloppes se complètent puis le DNA externe est lysé. Durée : 6 heures L’endospore est libérée par lyse de la paroi bactérienne. novembre 2006 Cellule procaryote
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Spore (germination) novembre 2006 Cellule procaryote
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Mécanismes de la germination :
Facteur déclenchant : usure des couches externes destruction de ces couches en particulier par un CHOC THERMIQUE Durée : 0,5 heure Phénomènes : la déchirure des enveloppes provoque une entrée d’eau qui active les enzymes détruisant le cortex (peptidoglycanases) l’eau peut alors pénétrer dans le cytoplasme : le dipicolinate est excrété et le métabolisme redémarre : sysnthède d’une nouvelle couche de peptidoglycane, de ribosomes… novembre 2006 Cellule procaryote
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FIN novembre 2006 Cellule procaryote
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