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Publié parJean Bouchard Modifié depuis plus de 9 années
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On recueille une dizaine d’échantillons dans des tubes Falcons
ÉCHANTILLONAGE LAC ST-JOSEPH LAC ST-CHARLES On recueille une dizaine d’échantillons dans des tubes Falcons
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Première méthode utilisée
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INOCULATION Filtre millipore de 0.44 um Échantillon d’eau
On filtre les échantillons à l’aide d’un système de filtration sous vide
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INOCULATION On referme avec un bouchon de mousse (permet les échanges gazeux) On retire le filtre 0.44um après la filtration On insère dans un erlenmeyer contenant 50ml de milieu BG11* et/ou BG11o* Incubation sur une plaque agitatrice, avec une lampe fluorescente (12h/12h), à une température de 22°C
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ISOLEMENT Lorsqu’il y a apparence de croissance* On retire le filtre
On le place sur un Pétri BG11 Incubation sous une lampe fluorescente (12h/12h) à une température de 22°C *X - vert forêt : algues V - vert pomme : cyanobactéries
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On attend qu’une croissance verte prenne le dessus
ISOLEMENT On attend qu’une croissance verte prenne le dessus On prend une portion de croissance, et on procède à une striation en 3 étapes Ces deux méthodes d’isolement sont employés en tandem, pour évaluer celle qui fonctionnera le mieux On prend une portion de croissance, et on procède à l’isolement par phototactisme
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Deuxième méthode utilisée
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On transfert directement dans 50 ml de milieu BG11
INOCULATION On incube sur une plaque agitatrice, sous une lampe fluorescente (12h/12h), à une température de 22oC On prend 1ml du dessus de la colonne de Winogradsky (qui est susceptible de contenir des cyanobactéries) On transfert directement dans 50 ml de milieu BG11
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ISOLEMENT On passe directement aux méthodes d’isolement sur milieu solide Lorsqu’on observe une croissance suffisante dans l’erlenmeyer (coloration verte)
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