IMMUNOLOGIE titre.

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1 IMMUNOLOGIE titre

2 * 1. Rappels: les origines cellulaires.
2. Structure. * Structure de base. * Classes d’immunoglobulines. plan 1-2 2.3. Site de reconnaissance. * Structure du paratope. * Organisation des domaines V. * Remarque: AC particuliers.

3 3. Diversité des anticorps. 3.1. Recombinaison des chaînes légères.
* Principe. * Mécanisme. 3.2. Recombinaison des chaînes lourdes. plan 3 * Principe. * Mécanisme. Commutation de classe. * Switch. * Commutation m / d. 3.3. Diversité additionnelle. * Variabilité de recombinaison. Mutation somatique.

4 plan 4-5 4. Anticorps: outil d’analyse. * 4.1. Immuno-précipitation.
* Méthodes immuno-enzymatiques.

5 plan 4.1 4. Anticorps: outil d’analyse.
* Complexe immun et précipitation. * Immuno-précipitation. Précipitation en milieu liquide * Centrifugation. plan 4.1 Ring test. Néphélométrie. Précipitation en milieu gélifié. * Principe. * Diffusion simple: Mancini. * Diffusion double: Outcherlony. Immuno-électrophorèse. * - simple * - Electrosynérèse * - Electrophorèse en fusée. * Précipitation provoquée. PLAN

6 * 1. Rappels: les origines cellulaires.
Immunité cellulaire 1. Cell imm Thymus Lymphocyte T Lignée lymphoïde anticorps Cellules souches Immunité humorale PLAN Lymphocyte B plasmocyte

7 d’une immunoglobuline.
chaîne légère l et k * Structure de base 2.1 struct ponts disulfures chaîne lourde m, g, d, a et e fragment Fab fragment Fc

8 d’une immunoglobuline.
La structure et le rôle des différentes partie d’un immunoglobuline ont été étudiés par hydrolyse enzymatique ménagée. * Structure de base d’une immunoglobuline. 2.1 cliv PLAN

9 * 2.2. Classes d’immunoglobulines.
PLAN

10 liaisons électrostatiques
PLAN Ag 2.3.1 site R 2.3. Site de reconnaissance. * Structure du paratope. liaisons électrostatiques liaisons van der Waals La structure 3D définie une cavité de forme complémentaire de l’Ag. Les deux sites de reconnaissances sont identiques: mêmes domaines variables léger et lourd. liaison hydrogène Complémentaire de forme et de charge.

11 2.3. Site de reconnaissance.
Variabilité de la séquence des gènes du domaine variable de la chaîne légère. 3 domaines hypervariables = CDR « Complementary Determining Regions » 2.3.2 orga V 2.3. Site de reconnaissance. 4 segments intermédiaires: FR « Frameworks » = régions charpentes Ces 3 domaines correspondent à 3 replis peptidiques définissant l’espace du site de reconnaissance. * Organisation des domaines V. Variabilité de la séquence des gènes du domaine variable de la chaîne lourde. 3 domaines hypervariables 4 segments intermédiaires PLAN

12 Les intérêts de ce type d'AC sont multiples:
: les AC de lama. PLAN Les lamas possèdent, en plus des AC conventionnels, une sous classe d'AC dépourvus de chaîne légère. Les domaines variables des chaines lourdes contiennent à eux seuls le site de reconnaissance de l'Ag. ils sont nommés SdAbs ("Single Domain Antibodies") 2.4 nanobodies Les intérêts de ce type d'AC sont multiples: Le domaine variable peut-être séparé du reste de la molécule et former un nanobodie (= nano-antibodie). On dispose ainsi d'un paratope stable (les conditions intra-cytoplasmiques sont réductrices) et de petite taille que l'on peut introduire à l'intérieure même des cellules. Ils sont aisément clonables et produits par E.coli Ils possèdent une forte homologie avec les AC humains: leur immunogénicité est donc réduite. * Remarque: AC particuliers Ils sont stables et ne réagissent pas en milieu réducteur (pas de pont disulfure). Ils sont utilisés: pour la localisation in situ d'Ag spécifiques comme agents bloquants métaboliques

13 3.1. Recombinaison des chaînes légères. * 3.1.1. Principe. ADN
L: séquence signal (leader) V: séquence domaine variable J: séquence jonction k: séquence domaine constante 3.1. Recombinaison des chaînes légères. * Principe. ADN 3.1.1 géne L coupure et ligature ARNm Transcription et épissage protéine Traduction et maturation PLAN

14 3.1. Recombinaison des chaînes légères.
* Mécanisme. 3.1.2 méca L PLAN

15 3.2. Recombinaison des chaînes lourdes. * 3.2.1. Principe.
L: séquence signal (leader) V: séquence domaine variable J: séquence jonction D: séquence de diversité m, d, g, e, a : séquences des domaines constant C’est vraiment tout petit comme argument. Et l’animation? C’est quoi cette arnaque? 3.2. Recombinaison des chaînes lourdes. * Principe. 3.2.1 gène H T’es gentille, mais tu sais combien de temps ça prend? Au fait, je me demandais: est-ce que tu peux rougir? Peut-être, mais moi j’ai cinq doigts! Ce n’est pas une raison! PLAN

16 3.2. Recombinaison des chaînes légère..
3.2. Recombinaison des chaînes lourdes. * Mécanisme. 3.2.2 méca Let H PLAN

17 gène avant commutation gène après commutation
PLAN gène avant commutation IgM & IgD 3.2. Recombinaison des chaînes lourdes. comm cl gène après commutation Commutation de classe. * Switch. IgG-3 IgE IgA

18 PLAN ADN ARN épissage épissage épissage
3.2. Recombinaison des chaînes lourdes. comm m/d ARNm IgM circulant épissage Commutation de classe. * Commutation m / d. ARNm IgM membranaire épissage ARNm IgD épissage

19 * 3.3.1. Variabilité de recombinaison.
chaîne légère La diversité ne provient pas uniquement de la combinaison aléatoire des différents types de séquences codons modifiés 3.3.1 var recomb Elle résulte également des « erreurs » de coupures au cours de l’excision. Elles provoquent des « délétions » ou des « insertions » ainsi que des modifications de codon. Les termes dérivés de la mutagénèse (délétion, insertion) ne sont pas adaptés. Les recombinaisons ne sont pas des mutations car les variations qu’elles induisent ne sont pas transmissibles d’une génération (au niveau des organismes, pas de la lignée cellulaire) à l’autre. codon supprimé chaîne lourde codon additionnel * Variabilité de recombinaison. PLAN