Contrôle de la croissance microbienne

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1 Contrôle de la croissance microbienne

2 Classes d’Antimicrobiens
Les désinfectants Produits visant à réduire d'au moins 5 puissances de 10 (99,999 %) les microorganismes et/ou virus présents sur des milieux inertes Les antiseptiques Produits visant à réduire d'au moins 5 puissances de 10 (99,999 %) les microorganismes et/ou virus présents sur les tissus vivants

3 Classes d’Antimicrobiens (suite)
Les drogues Antibiotique ou Antibactérien Contre les bactéries Antifongique Contre les champignons Antiviraux Contre les virus

4 Désinfectants et Antiseptiques
Caractéristiques idéales Spectre d’action étendu Puissant, faible quantité requise pour une efficacité élevée Faible niveau de toxicité chez les humains Pas corrosif Stable Hydrophilique et hydrophobique Faible tension de surface Sans odeur ou une odeur agréable

5 Les Drogues: Les Antibiotiques
Définitions: Littérale: Anti (contre) biotique (la vie ) Ancienne déf.: Tout composé fabriqué par un microorganisme qui inhibe ou tue les bactéries Nouvelle déf.: Tout composé qui inhibe ou tue les bactéries

6 Caractéristiques Désirées
Toxicité sélective élevée Doit tuer ou inhiber l’organisme ciblé avec une effet néfaste minimale sur l’hôte Pénicilline: Cible la parois cellulaire Cyanure: Cible transport d’e- des eucaryotes/procaryotes

7 Caractéristiques Désirées (suite)
Dose toxique élevée (DL50) Concentration de l’agent auquel il est toxique pour l’hôte Pénicilline Cyanure Dose thérapeutique faible (CMI ou CMB) Concentration de l’agent nécessaire pour le traitement clinique d’une infection Sel de table

8 L’Indice Thérapeutique
Dose toxique/Dose thérapeutique Désire un indice thérapeutique?

9 Spectre d’Action Étroit: Large:
Efficacité restreinte à certains types de microorganismes Ex. Agit seulement contre les Gram - Large: Efficace contre une grande diversité de microorganismes Ex. Agit sur les Gram + et -

10 Cibles des Antibactériens
Synthèse de la paroi Les ß-lactamines Synthèse d’ADN Les quinolones Traduction Transcription A B Métabolisme Synthèse d’ARN Les macrolides Synthèse des protéines Les aminoglycosides Les macrolides Les tétracyclines Chloramphénicol

11 Mode d’Action Bactériostatique: Bactériocide Bactériolytique Temps
Compte direct Compte viable # Bactériostatique: Inhibe croissance Non-létale Réversible Bactériocide Tue Irréversible Bactériolytique Tue Lyse cellulaire Irréversible

12 Les Bêta-Lactamines Bactériolytiques
Inhibent synthèse de la paroi cellulaire Agissent sur bactéries en croissance seulement! Pénicillines Céphalosporines Carbapenems Monobactames Contiennent tous l’anneau de Bêta-lactamine

13 Les Quinolones Bactéricide Inhibe la synthèse de l’ADN Spectre large
Effets secondaires: Troubles sévères gastro-intestinaux Ex. Ciprofloxacin

14 Les Tétracyclines Bactériostatique Inhibe synthèse protéique
Spectre large Effets secondaires: Toxicité hépatique Toxicité rénale Déficience vitaminique

15 Les Macrolides Bactériostatique Inhibe synthèse protéique
Spectre étroit Effets secondaires Diarrhées Dommages hépatiques Ex. Érythromycine & Clarithromycine

16 Les Aminoglycosides Bactéricide Spectre étroit
Inhibe synthèse protéique Haut niveau de toxicité Effets secondaires: Allergies Dommages rénaux Surdité Ex. Gentamycine, streptomycine

17 Thérapies Antimicrobiennes
Empirique L’organisme infectieux est inconnu Antibiotique a spectre large préconisé Définitive L’organisme infectieux a été identifié Une thérapie spécifique est choisie Antibiotique à spectre étroit préconisé Prophylactique ou préventive Prévenir une infection initiale ou la réinfection

18 Essai de Diffusion de Disques de Kirby-Bauer
Gélose est inoculé avec la bactérie à tester Disques imprégnés d’antibiotique sont placé sur la gélose L’antibiotique diffuse dans le milieu créant un gradient Suite à l’incubation les zones d’inhibitions sont mesurées Les tailles des zones sont comparées à celles établies pour déterminer si l’organisme est susceptible ou résistant

19 Diamètres d’Inhibitions Vs Conc.
27mm = au CMI < 27mm = Conc. > CMI* > 27mm = Conc. < CMI * Gradient de concentration + - *CMI = Concentration minimale d’inhibition

20 Détermination de l’Efficacité CMI/CMB
Concentration Minimale Inhibitrice Culture avec différentes concentrations d’antibiotique 100 50 25 12 6 3 CMI=12μg/ml Concentration Minimale Bactéricide Sous culture sans d’antibiotique CMB=50μg/ml

21 E-test

22 La Susceptibilité In Vivo
La concentration in vivo n’est pas constante! Influencer par la physiologie humaine Une étendue de concentration est maintenue (CMax-CMin) La concentration au site d’infection doit être supérieure au CMI Si <CMI = résistante à l’antibiotique

23 La Susceptibilité In Vivo
Pathogène sensible CMI est plus bas que la plus faible conc. maintenue in vivo Pathogène résistant CMI est plus élevé que la conc. la plus élevée maintenue in vivo Pathogène de sensibilité intermédiaire CMI se situe entre la conc. la plus faible et la plus élevée maintenue in vivo Combinaison d’antibiotiques préconisée

24 Exemple Conc. in vivo d’antibiotique “A” = 5-40µg/ml Donc:
CMI ≤ 5 µg/ml = sensible CMI ≥ 40µg/ml = résistant CMI entre µg/ml = susceptibilité intermédiaire

25 Temps de Réduction Décimal
Valeur D Temps requis pour tuer 90% des microorganismes à une température donnée Temps requis pour réduire la population d’un facteur 10 à une température donnée Temps requis pour réduire la population d’un log10 à une température donnée

26 Temps de Réduction Décimal
1 X 106 1 X 105 1 log # Bactéries 1 X 104 120 D 100 D =12min 1 X 103 5 10 15 20 25 30 35 40 Temps (min.)

27 Problème À 75oC cela prend 18 min. pour réduire une population de microorganismes de 109 à 106 qu’elle est la valeur D75 ? 18 minutes pour passer de 109 à 106 3 log 3 log = 3D75 Donc 3D75 = 18minutes D75=6minutes