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+ 45 kD a Environnement, exposition, sensibilisation allergique : Etude analytique dun modèle de pollen de cyprès en Méditerranée 1- ESPCI ParisTech, PECSA,

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1 + 45 kD a Environnement, exposition, sensibilisation allergique : Etude analytique dun modèle de pollen de cyprès en Méditerranée 1- ESPCI ParisTech, PECSA, UMR 7195 CNRS, Paris, France; 2- Unité dImmunologie, Autoimmunité et Hypersensibilité, Hôpital Bichat-Claude Bernard, Paris, France ; 3- Center of Molecular Allergology, IDIIRCCS, Rome, Italy, 4- Hôpital Nord, Marseille, France Y Shahali; LSABM, ESPCI-ParisTech, 24 novembre 2011 Colloque FGL Strasbourg

2 Allergie au pollen de Cupressacées dans le monde E Scala et coll ,077 patients ISAC 75 allergènes Cup a 1: 43% Colloque FGL Strasbourg

3 Source: RNSA 2003 Les risques allergiques en France Source: INRA 2010 Colloque FGL Strasbourg

4 Pollen de cyprès: aspects particulaires Pollen: µm de diamètre fragilité de lexine Orbicules Micrograph of an Arizonica cypress pollen Shahali et al. 2007, 2009 Orbicule: nm de diamètre 5 µm 300 nm Colloque FGL Strasbourg

5 Exposition expérimentale du pollen de cyprès au NO 2 Etude en collaboration avec le PC2A "Physicochimie des Processus de Combustion et de l'Atmosphère", Université Lille 1. Colloque FGL Strasbourg

6 Extraction aqueuse ex cy in Colloque FGL Strasbourg

7 Sensibilisationdégranulation symptômes cliniques Ag APC 1er contact antigénique Th2 IL-4 IL-13 Be IgE cytokines leukotriènes PAF prostaglandines enzyme 2e contact antigénique Ag HISTAMINE chemokines masto ou baso IgE du sérum, spécifiques des allergènes auxquels le patient est sensibilisé 1 – évaluer le répertoire des allergènes 2- évaluer le répertoire des IgE des patients allergiques Colloque FGL Strasbourg Mécanisme de lallergie et identification des allergènes

8 Différentes extractions des protéines du pollen 1975*TUC 1496SDS 150.5PBS 91H20 µg de protéine par gr de pollen méthodes dextraction Ratio *2 M Thiourea, 7 M Urea, 2% CHAPS Colloque FGL Strasbourg

9 Serums anti-HMW Serums anti-14 kDa Criblage en SDS-PAGE 1-D avec un extrait SDS Colloque FGL Strasbourg

10 H2O pI kDa a b c d 2 pI PBS Electrophorèse 2-D sur des extraits polliniques Cup s 1 PG ? Colloque FGL Strasbourg

11 Cinétique dextraction des protéines du cyprès de Provence en PBS kDa Colloque FGL Strasbourg

12 30.5%25%16.6%23.3% negative BP %44.5% HMW Comparaison de la réactivité IgE aux protéines du pollen de cyprès de Provence chez les patients Italiens et Français kDa Colloque FGL Strasbourg

13 Allergène de 14 kDa fortement exprimé dans le pollen de Cupressus sempervirens Cyprès dArizona Cyprès de Provence CaCs kDa Colloque FGL Strasbourg

14 Limportance des conditions dexposition et de lespèce sensibilisante Lapport de la biochimie analytique et de lallergologie moléculaire létude du répertoire des allergènes Lanalyse de la diversité de la réponse allergique (pollen, moisissures, acariens, aliments…) Le pollen de cyprès est une source importante de fines particules submicroniques Optimisation de lextrait de pollen de cyprès utilisation de détergents et dagents chaotropiques Révélation de nouveaux allergènes Deux profils dimmunoréactivité allergènes de haute masse moléculaire allergène de 14 kDa CONCLUSION Colloque FGL Strasbourg

15 Pascal PONCET Jean-Pierre SUTRA Gabriel PELTRE Hélène SENECHAL ESPCI ParisTech, LSABM Denis CHARPIN Hôpital Nord de Marseille Sylvie CHOLLET-MARTIN Pascale NICAISE INSERM U996, Paris Adriano MARI CMA, Rome, Italy Iman HADDAD Emmanuelle DEMEY Joëlle VINH ESPCI ParisTech, LSMBP Laurence GUILLOUX Biomnis, Lyon Philippe CHAFEY ICGM, Paris Remerciements


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