Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants Le constat de gestation chez les ruminants Prof. Ch. Hanzen Faculté de Médecine Vétérinaire Service de Thériogénologie des animaux de production   Année 2009-2010 Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants Objectif général Ce chapitre a pour but de présenter les méthodes hormonales et non hormonales pour confirmer la gestation chez les ruminants. Selon les cas elles font l’objet de rappels anatomiques et physiologiques pour en faciliter leur compréhension et justification pratique. Le diagnostic échographique a été présenté dans le chapitre relatif aux applications de l’échographie en reproduction bovine. Le lecteur consultera avec profit l’iconographie du chapitre présentée dans un fichier Power Point annexé. Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Objectifs spécifiques de connaissance Enumérer trois critères de choix d’une méthode de constat de la gestation Enumérer les méthodes de constat de gestation utilisées en pratique chez la vache. Enoncer les stades d'application au constat de gestation des dosages hormonaux Enoncer les contraintes des prélèvements en vue d'un dosage de la progestérone et de la PAG Enoncer les principaux critères de confirmation de la gestation par palpation manuelle transrectale en fonction du stade de gestation chez la vache Enoncer les critères de constat de la gestation par échographie au cours des deux premiers mois de gestation chez la vache Enumérer les méthodes de diagnostic de gestation qui chez les petits ruminants ont trouvé une application en pratique Enoncer les critères de constats de gestation par échographie transabdominale chez les petits ruminants Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Objectifs spécifiques de compréhension Justifier les intérêts d'un constat précoce (<60 jours) de gestation chez la vache Justifier les intérêts d'une constat tardif (>=60 jours) de gestation chez la vache Comparer les avantages et inconvénients des méthodes hormonales et non hormonales de diagnostic de gestation utilisés en pratique chez la vache. Comparer les avantages et inconvénients des méthodes de diagnostic de gestation utilisés en pratique chez les petits ruminants Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants Généralités Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Le constat de gestation : préambule Constat de gestation ou de non-gestation ? = méthode de lutte contre l ’infécondité décision de réforme optimisation de la période de reproduction : espèces saisonnières Autres objectifs Nombre de fœtus : jument, petits ruminants ... Sexe du fœtus : jument, vache… Viabilité fœtale Quantification de la ME Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants Critères de choix d’une méthode de diagnostic de gestation ou de non gestation Précocité du diagnostic Stade de gestation possible de l ’animal Sensibilité ou spécificité de la méthode Degré d’exactitude Matériel à mettre en œuvre Expérience du clinicien ….. Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Méthodes de constat de gestation Méthodes hormonales : identification de modifications spécifiques ou non de la gestation Méthodes non-hormonales : identification de modifications physiques ou comportementales inhérentes à la gestation Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants Méthodes hormonales Méthodes non hormonales Progestérone PAG (PSPB) eCG (PMSG) Oestrogènes EPF Zygotine Hormone placentaire Trophoblastine (interféron) Facteurs de croissance Détection des chaleurs Taxis externe Développement abdominal Développement de la glande mammaire Palpation transrectale Palpation transabdominale Echographie : mode A et B Radiographie Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Méthodes spécifiques (+ en pratique) bo cv ov po ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- Détection des chaleurs + + + + Biopsie vaginale - - + + Induction d’œstrus - - - + Early Pregnancy Factor + + + + Progesterone + + + + PMSG (eCG) - + - - Oestrogènes + + + + PSPB (PAG) + - + - Développement de la mamelle + + + + Taxis externe + + + - Palpation transrectale + + - - Radiographie - - + + Echo Doppler + + + + Echo mode A + + + + Echo mode B + + + + ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------ Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Diagnostic hormonal de la gestation chez les ruminants Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Le diagnostic de gestation par la progestérone NG G J21 IA Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants Progestérone Méthodes : sang, lait (RIA ou ELISA) Avantages Précocité Sensibilité élevée (97 %) vs spécificité (75 %) Valeur prédictive des Dg - élevée : 95 % vs 85 % (Dg +) : ME Inconvénients Prélèvements de sang Conservation du prélèvement Laboratoires (RIA) Date d’insémination : fausses interprétations possibles Non spécifique de la gestation Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Dosage de la progestérone dans le sang J 20 à J 23 après l'insémination sur tube hépariné centrifugation dans l'heure suivant le prélèvement pipetage du plasma identification du tube congélation ou envoi au laboratoire (CER Marloie) sur tube sec contenant de l'azide de sodium (5 mg/ml de sang) conservation à 4°C et envoi au laboratoire Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Dosage de la progestérone dans le lait premiers jets (moins riches en MG) de la traite du matin J 21 à J 23 après la dernière insémination tube renfermant un agent conservateur, le dichromate de potassium (500 mg/ml) identification du tube conservation à 4°C et envoi au laboratoire (CER Marloie) Résultats >= 2 ng (sang) ou >= 5 ng (lait) : confirmation de la gestation < 2 ng (sang) ou < 5 ng (lait) : exclusion de la gestation Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants Valeurs prédictives du diagnostic de gestation par dosage de la progestérone (Prof. N. Hagen ENV Toulouse) d’après Thibier et al., 1977 Valeurs prédictives (%) Groupes de femelles nombre DG + DG - Génisses de races 336 65 93 à viande Vaches allaitantes 201 75 98 Génisses de races 1394 74 94 laitières Vaches laitières Plasma 189 62 96 Lait 466 63 94 Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants La PAG (Pregnancy Associated Glycoprotein) ou PSPB (Pregnancy Specific Protein type B) Espèces concernées : vache, chèvre, brebis, chevreuil, renne Concentrations (vache) J20 à J30 : augmentation J30 à J35 : détection plasmatique J35 à J280 : augmentation progressive J0 à J100 : diminution progressive (demi-vie : 7 jours) Prélèvements de sang Tube sec ou hépariné Conservation 9 à 15 jours à 4°C Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Evolution des concentrations sériques de PSPB au cours de la gestation d’après Sasser et al, 1986 900 PSPB (ng/mL) 500 100 80 50 20 20 10 mise bas jours 20 80 160 240 320 Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants Valeurs prédictives du diagnostic de gestation par dosage de la PSPB plus de 30 jours après IA et de la progestérone à 21 jours d’après Humblot, 1991 nombre valeurs prédictives (%) d’animaux DG+ DG- PSPB 617 88 98 P4 617 71 98 Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants Evolution des concentrations de progestérone et de PSPB après avortement induit à J40 d’après Humblot et Gary, 1994 65 60 55 50 45 40 35 30 2 4 6 8 10 12 14 1 3 Jours après IA Progestérone (ng/mL) PSPB PGF2 alpha Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Dosage du sulfate d'oestrone d’après Tainturier et al, 1987 Principe : Aromatisation placentaire des androgènes fœtaux  Viabilité unité foeto-placentaire 10 30 100 150 200 250 temps (jours) 2000 1000 sulfate d’œstrone (pg/mL) 4262 mise bas Evolution du taux de sulfate d’œstrone plasmatique au cours de la gestation chez une génisse Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Dosage du sulfate d’œstrone Plasma ou lait 100 jours après l’IA ou la saillie : seuil 150 pg/mL Dosage radioimmunologique Valeurs prédictives proches de 100% Diagnostic tardif, confirmation de gestation Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Diagnostic non hormonal de la gestation : la palpation transrectale Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Données anatomiques de l ’utérus gestant (vache) J Corne Cotylédon A. utérine Lg foetus Lg de la tête ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------ 30 2 - 4 cm 4 - 6 mm 1 cm 40 4 - 6 4 - 6 2 50 5 - 7 4 - 6 3.5 - 5.5 60 6 - 9 4 - 6 6 - 8 70 7 - 10 0.5 - 0.75 cm 5 - 7 7 - 10 1.5 cm 80 9 - 12 0.5 - 1.0 5 - 7 8 - 13 3.5 90 10 - 13 1.0 - 1.5 5 - 7 13 - 17 5.5 120 13 - 18 1.5 - 2.5 7 - 9 22 - 32 10.5 150 18 - 23 2.5 - 4.0 7 - 10 30 - 45 180 4.0 - 5.0 9 - 13 40 - 60 210 5.0 - 7.5 13 - 15 55 - 75 240 6.0 - 9.0 13 - 15 60 - 85 8.0 - 12.0 15 - 19 70 – 100 --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Données anatomiques de l ’utérus gestant J Taille Position Migration du fœtus de l ’utérus de l ’utérus --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 30 Pelvienne 40 Pelvienne 50 Pelvienne 60 Souris Pelvienne 70 Pelv.-abdo. Descente 80 Pelv.-abdo Descente 90 Rat Pelv.-abdo Descente 120 Petit chat Pelv.abdo Descente 150 Gros chat Abdominale basse 180 Beagle Abdominale basse 210 Abdominale Remontée 240 Abdominale haute Remontée Abdominale haute ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Photos : gestation de 37 et 60 jours Gestation 60 Jours Gestation 37 jours Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Photos et schéma : gestation de 60 jours Gestation 60 jours Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Photos et schéma : gestation de 105 jours Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Schémas : gestation de 2 mois et 7 mois Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Photo et schéma d’une gestation extra -omentale à gauche (coupe L3) Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Schéma d’une gestation extra -omentale à gauche coupe L3 Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Photos : divers stades de gestation (1 à 3 mois) Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Photos : gestation de 2 à 3 mois Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants Caractéristiques fœtales en fonction du stade de gestation (Mialot 2006) AGE LONGUEUR POIDS CARACTERES MORPHOLOGIQUES (mois) (cm) VEAU (race Salers) 1 2,5 cm 0,6 g Ebauches membres et paupières 2 8 cm 20 g Paupières couvrant globe oculaire Division doigts, fermeture sternum 3 13-15 cm 170 g Compartiments gastriques distincts 4 23 cm 800 g Sabots jaune opaque 5 37 cm 2,4 kg Taches onglons, descente testicules 6 50 cm 8 kg Pigmentation, pilosité périphérie, cils 7 60 cm 15 kg Crins queue, poils phalanges, coudes, nuque 8 80 cm 25 kg Poils courts et doux (sauf ventre, face int. membres) 9 85 cm 35 - 45 kg Poils longs, incisives, molaires… AGNEAU - CHEVREAU 1 1 cm Division doigts 3 15 - 16 cm Peau nue 4 32 cm Premiers poils 5 45 - 50 cm Toison complète Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

L ’examen échographique de l ’utérus gravide Evolution de l'image échographique de la vésicule embryonnaire et de l ’embryon au cours de la gestation Détermination de l’âge de l ’embryon/fœtus Détermination du sexe fœtal Gémellité Changements de position Diagnostic de la ME Résultats des diagnostics de gestation Echographie et prélèvement de liquides foetaux Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Echographie et 1ers stades de gestation - 0 h : zygote : 0.1 mm + 72 à 96 h : arrivée dans l’utérus + 5 J : morula + 6 J : jeune blastocyste : 100 cellules + 7 J : blastocyste : 0.16 mm 9 J : hatching (sortie de la pellucide) + 16 J : vésicule embryonnaire : phase d’élongation + 20 J : cellules binuclées : phase d’adhésion + 21 J : diagnostic de gestation par la progestérone + 25 J : diagnostic de gestation par échographie + 35 J : diagnostic de gestation par la PSPB (PAG) + 50-60 J : fin de l’organogénèse: embryon : 50 mm Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants

Le diagnostic de gestation chez les petits ruminants Palpation transabdominale : parfois difficile et tardif Diagnostic transrectal (tige rigide) : risque de lésions rectales Dosages hormonaux problèmes pratiques  J18ème J19ème : progestérone >J25 : PAG Chèvre : > J50 sulfate d’oestrone dans le lait ou le sérum Radiographie abdominale > J65 mais problèmes pratiques Echographie : the best Prof. Ch. Hanzen- Le constat de gestation chez les ruminants