Equipe pédagogique du lycée Jean Moulin (Angers) POCHET- DURAND Neutralisation Année 2008 Equipe pédagogique du lycée Jean Moulin (Angers) POCHET- DURAND

Equipe pédagogique du lycée Jean Moulin (Angers) POCHET- DURAND Les antigènes Possédant une activité biologique comme : - Toxines - Enzymes - Hémagglutinines Reconnaissant spécifiquement une cible moléculaire Année 2008 Equipe pédagogique du lycée Jean Moulin (Angers) POCHET- DURAND

Exemple : La Streptolysine O (SLO) Toxine sécrétée par Streptococcus pyogenes se fixant sur les globules rouges provoquant leur lyse in vitro en formant des pores membranaires Année 2008 Equipe pédagogique du lycée Jean Moulin (Angers) POCHET- DURAND

Les anticorps neutralisants Bloquant l’activité biologique d’un Ag Par fixation sur l’épitope au site actif de l’Ag ou à proximité Empêchant l’action de l’Ag sur sa cible spécifique Année 2008 Equipe pédagogique du lycée Jean Moulin (Angers) POCHET- DURAND

Exemple : Anticorps antistreptolysine O (ASLO) Hématie SLO ASLO NEUTRALISATION : pas d’hémolyse Année 2008 Equipe pédagogique du lycée Jean Moulin (Angers) POCHET- DURAND

Dilutions préliminaires du sérum Protocole Dilutions préliminaires du sérum Dilution 1/10ème Dilution 1/50ème Sérum Année 2008 Equipe pédagogique du lycée Jean Moulin (Angers) POCHET- DURAND

Equipe pédagogique du lycée Jean Moulin (Angers) POCHET- DURAND Protocole Rejet : 50 µL Réactifs / protocole 1 2 3 4 5 6 7 8 A B Agitation puis 15 min – 37°C Agitation puis 30 min – 37°C Lecture Tampon ASO (µL) 50 50 50 50 50 50 50 50 Agitation puis 15 min. – 37°C Sérum 1/10 (µL) 50 50 50 50 50 50 50 50 25 25 25 25 25 25 25 25 SLO à 2UI/mL(µL) GR 3% (µL) 25 25 25 25 25 25 25 25 Tampon ASO (µL) 50 50 50 50 50 75 50 Sérum 1/50 (µL) 50 50 50 50 50 50 25 25 25 25 25 25 25 SLO à 2UI/mL (µL) Année 2008 GR 3% (µL) Equipe pédagogique du lycée Jean Moulin (Angers) POCHET- DURAND 25 25 25 25 25 25 25 25

Equipe pédagogique du lycée Jean Moulin (Angers) POCHET- DURAND Lecture Neutralisation totale de l’activité de la SLO par les ASLO Sédimentation avec surnageant incolore Absence d’hémolyse Point de sédimentation limité avec surnageant teinté Pas ou peu de neutralisation de l’activité de la SLO = Présence insuffisante d’ASLO pour neutraliser la SLO Hémolyse partielle Cupule uniformément teintée en rouge limpide Hémolyse totale Année 2008 Equipe pédagogique du lycée Jean Moulin (Angers) POCHET- DURAND

Equipe pédagogique du lycée Jean Moulin (Angers) POCHET- DURAND Résultats A B 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640 1/1280 1/2560 1 2 3 4 5 6 7 8 1/50 1/100 1/200 1/400 1/800 1/1600 TGR TSL Titre plus forte dilution du sérum neutralisant totalement l’activité de la streptolysine  1/200 TGR non hémolysé TSL hémolysé totalement Témoins conformes Année 2008 Equipe pédagogique du lycée Jean Moulin (Angers) POCHET- DURAND

Calculs et interprétation Les anticorps contenus dans la cupule titre contenant 50µL de sérum au 1/200 ont neutralisé 25 µL de SLO à 2 UI/mL. Dans le sérum pur, il y a donc : VSL x UI SL/mL x fD 25 x 2 x 200 UASLO = = = 200 UI ASL/mL VSe 50 Un titre en anticorps supérieur à 200 UI ASL/mL est significatif d’une infection évolutive à streptocoque A avec risque possible d’évolution en infections chroniques comme le Rhumatisme Articulaire Aigu (RAA) ce qui n’est pas le cas pour cet exemple Année 2008 Equipe pédagogique du lycée Jean Moulin (Angers) POCHET- DURAND