Le développement embryonnaire des Amphibiens : de l’ovocyte à la larve Frédéric Sevelinge Décembre 2004 Introduction/Objectifs I) Fécondation et segmentation chez le xénope 1) L’ovocyte avant la fécondation 2) Réalisation d’une fécondation in vitro chez l’Amphibien Xenopus laevis 3) Observation des stades précoces du développement embryonnaire : de l’ovocyte fécondé à la blastula II) La gastrulation chez les Amphibiens 1) Méthodes d’étude et carte des territoires présomptifs 2) Observation histologique d’une gastrula 3) Analyse des mouvements morphogenétiques III) Détermination des axes et inductions embryonnaires 1) Rotation corticale et détermination de l’axe dorso-ventral 2) Induction et régionalisation du mésoderme 3) Induction neurale 4) Observations histologiques au stade neurula et bourgeon caudal IV) Deux exemples d’organogenèse 1) Organogenèse du système nerveux central 2) Organogenèse de l’oeil Conclusion Mots clefs : -Xénope -Pleurodèle -Pôles animal et végétatif -hCG -Rotation corticale -Micromères/mésomères/macromères -Blastula -Gastrula/gastrulation -Neurula/neurulation -Invagination -Epibolie/intercalation -Cellules en bouteille -Transition blastuléenne -Délamination -Carte des territoires présomptifs -Inductions -Centres de Niewkoop et Spemann -Bourgeon caudal -Vésicules céphaliques -Cupule optique -Vésicule cristalinnienne

Bibliographie : -F.GILBERT : Biologie du développement ; De Boeck Université 1996 -A.LEMOIGNE et J.FOUCRIER : Biologie du développement ; Dunod 5ème édition 2001 -L.WOLPERT : Biologie du développement : les grands principes ; Dunod 2000 -T.DARRIBERE : Introduction à la biologie du développement ; Belin 2002 -T.DARRIBERE : Biologie du développement : le modèle amphibien ; Diderot éditeurs 1997 Corrélations : Leçons de démonstration secteur A : -Informations de position lors du développement embryonnaire -Les mouvements lors du développement embryonnaire -Les gènes du développement Leçons de contre-option ab : -Gamètes et fécondation chez les animaux -Les phénomènes d’induction lors du développement embryonnaire -Vitellus et vitellogenèse -Les axes de polarité de l’organisme animal

Intoduction/Objectifs : -Connaissance du développement embryonnaire des Amphibiens car développement modèle -En maîtriser les aspects morphologiques, histologiques, cellulaires et moléculaires -Connaître les avantages et les limites du modèle Amphibien -Comprendre la démarche expérimentale qui a permis de caractériser ce développement -Acquérir une bonne connaissance des inductions embryonnaires -Réaliser une manipulation de fécondation in vitro qui peut être faite en lycée Les deux modèles utilisés : Avantages et limites du modèle amphibien : Fécondation et segmentation chez le xénope : 1) L’ovocyte avant la fécondation :

2) Réalisation d’une fécondation in vitro chez Xenopus laevis : -Protocole -Effets de la fécondation : Création de la membrane de fécondation et rotation d’équilibration :

Rotation corticale : -Dégangage et élevage des embryons : -Cycle de développement : 1er clivage : 1 heure et demi après fécondation Durée de la segmentation : 8 heures Durée de la gastrulation : 10 à 12 heures Durée de la neurulation : 10 à 12 heures

3) Observation des stades précoces du développement embryonnaire : de l’ovocyte fécondé à la blastula :

II) La gastrulation chez les Amphibiens : 1) Méthodes d’étude et carte des territoires présomptifs :

2) Observation histologique d’une gastrula :

3) Analyse des mouvements morphogénétiques :

III) Détermination des axes et inductions embryonnaires : 1) Rotation corticale et détermination de l’axe dorso-ventral :

2) Induction et régionalisation du mésoderme :

3) L’induction neurale :

4) Observations histologiques au stade neurula et bourgeon caudal :

IV) Deux exemples d’organogenèse : 1) Organogenèse du SNC :

2) Organogenèse de l’œil :