Contrôle de la croissance microbienne

Classes d’Antimicrobiens Les désinfectants Produits visant à réduire d'au moins 5 puissances de 10 (99,999 %) les microorganismes et/ou virus présents sur des milieux inertes Les antiseptiques Produits visant à réduire d'au moins 5 puissances de 10 (99,999 %) les microorganismes et/ou virus présents sur les tissus vivants

Classes d’Antimicrobiens (suite) Les drogues Antibiotique ou Antibactérien Contre les bactéries Antifongique Contre les champignons Antiviraux Contre les virus

Désinfectants et Antiseptiques Caractéristiques idéales Spectre d’action étendu Puissant, faible quantité requise pour une efficacité élevée Faible niveau de toxicité chez les humains Pas corrosif Stable Hydrophilique et hydrophobique Faible tension de surface Sans odeur ou une odeur agréable

Savons/Détergents Antiseptique/Désinfectant Hydrocarbones de sulfate ou de sodium Amphipathiques Émulsifiant/surfactant Dissout membranes lipidiques

Les Drogues: Les Antibiotiques Définitions: Littérale: Anti (contre) biotique (la vie ) Ancienne déf.: Tout composé fabriqué par un microorganisme qui inhibe ou tue les bactéries Nouvelle déf.: Tout composé qui inhibe ou tue les bactéries

Caractéristiques Désirées Toxicité sélective élevée Doit tuer ou inhiber l’organisme ciblé avec un minimum d’effets dérisoires sur l’hôte Pénicilline: (Toxicité sélective élevée) Cible la parois cellulaire Cyanure: (Toxicité sélective faible) Cible transport d’e- des eucaryotes/procaryotes

Caractéristiques Désirées (suite) Dose toxique élevée (DL50) Concentration de l’agent auquel il est toxique pour l’hôte Pénicilline: (Dose toxique élevé) Cyanure: (Dose toxique faible) Dose thérapeutique faible Concentration de l’agent nécessaire pour le traitement clinique d’une infection Pénicilline (dose thérapeutique faible) Sel de table (dose thérapeutique élevée)

L’Indice Thérapeutique Dose toxique/Dose thérapeutique Désire un indice thérapeutique? Élevée

Spectre d’Action Étroit: Large: Efficacité restreinte à certains types de microorganismes Ex. Agit seulement contre les Gram - Large: Efficace contre une grande diversité de microorganismes Ex. Agit sur les Gram + et -

Cibles des Antibactériens Synthèse de la paroi Les ß-lactamines Synthèse d’ADN Les quinolones Traduction Transcription A B Métabolisme Synthèse d’ARN Les macrolides Synthèse des protéines Les aminoglycosides Les macrolides Les tétracyclines

Mode d’Action Bactériostatique: Bactériocide Bactériolytique Temps Compte direct Compte viable # Bactériostatique: Inhibe croissance Non-létale Réversible Bactériocide Tue Irréversible Bactériolytique Tue Lyse cellulaire Irréversible

Les Bêta-Lactamines Bactériolytiques Inhibent synthèse de la paroi cellulaire Agissent sur bactéries en croissance seulement! Pénicillines Céphalosporines Carbapenems Monobactames Tous possèdent l’anneau de Bêta-lactamine

Les Quinolones Bactéricide Inhibe la synthèse de l’ADN Spectre large Effets secondaires: Troubles sévères gastro-intestinaux Ex. Ciprofloxacin

Les Tétracyclines Bactériostatique Inhibe synthèse protéique Spectre large Effets secondaires: Toxicité hépatique Toxicité rénale Déficience vitaminique

Les Macrolides Bactériostatique Inhibe synthèse protéique Spectre étroit Effets secondaires Diarrhées Dommages hépatiques Ex. Érythromycine & Clarithromycine

Les Aminoglycosides Bactéricide Spectre étroit Inhibe synthèse protéique Haut niveau de toxicité Effets secondaires: Allergies Dommages rénaux Surdité Ex. Gentamycine, streptomycine

Thérapies Antimicrobiennes Empirique L’organisme infectieux est inconnu Antibiotique a spectre large préconisé Définitive L’organisme infectieux a été identifié Une thérapie spécifique est choisie Antibiotique à spectre étroit préconisé Prophylactique ou préventive Prévenir une infection initiale ou la réinfection

Essai de Diffusion de Disques de Kirby-Bauer Gélose est inoculé avec la bactérie test Disques imprégnés d’antibiotique sont placé sur la gélose L’antibiotique diffuse dans le milieu créant un gradient Suite à l’incubation les zones d’inhibitions sont mesurées Les tailles des zones sont comparées à celles établies pour déterminer si l’organisme est susceptible ou résistant

Détermination de l’Efficacité CMI/CMB Concentration Minimale Inhibitrice Culture avec différentes concentrations d’antibiotique 100 50 25 12 6 3 CMI=12μg/ml Concentration Minimale Bactéricide Sous culture sans d’antibiotique CMB=50μg/ml

Diamètres d’Inhibitions Vs Conc. 27mm = au CMI < 27mm = Conc. > CMI > 27mm = Conc. < CMI Gradient de concentration + -

La Susceptibilité In Vivo La concentration in vivo n’est pas constante! Influencer par la physiologie humaine Une étendue de concentration est maintenue (C1-C2) La concentration au site d’infection doit être supérieure au CMI Si <CMI = résistance

La Susceptibilité In Vivo Pathogène sensible CMI est plus bas que la plus faible conc. maintenue in vivo Pathogène résistant CMI est plus élevé que la conc. la plus élevée maintenue in vivo Pathogène de sensibilité intermédiaire CMI se situe entre la conc. la plus faible et la plus élevée maintenue in vivo Combinaison d’antibiotiques préconisée

Exemple Conc. in vivo d’antibiotique “A” = 5-40µg/ml Donc: CMI ≤ 5 µg/ml = sensible CMI ≥ 40µg/ml = résistant CMI entre 5 -40 µg/ml = susceptibilité intermédiaire

Temps de Réduction Décimal Valeur D Temps requis pour tuer 90% des microorganismes à une température donnée Temps requis pour réduire la population d’un facteur 10 à une température donnée Temps requis pour réduire la population d’un log10 à une température donnée

1 X 106 1 X 105 1 log # Bactéries 1 X 104 120 D 100 D =12min 1 X 103 5 10 15 20 25 30 35 40 Temps (min.)

Problème À 75oC cela prend 18 min. pour réduire une population de microorganismes de 109 à 106 qu’elle est la valeur D75 ? 18 minutes pour passer de 109 à 106 3 log 3 log = 3D75 Donc 3D75 = 18minutes D75=6minutes