Définition d’un système nerveux ?

+ de cellules gliales que la normale

DEVELOPPEMENT DES CELLULES GLIALES CHEZ LA DROSOPHILE

Repo (cellules gliales) SYSTEME NERVEUX = NEURONES + CELLULES GLIALES V E N T R A L SNC SNP L A T E R Cerveau Corde ventrale 22C10 (neurones) Repo (cellules gliales) Merge Le ratio neurones/cellules gliales augmente avec l‘évolution - drosophile: 10 neurones pour 1 cellule gliale - homme: 1 neurone pour 1 (10) cellule gliale

Fonction des cellules gliales ? - Support - Nutrition des neurones - Isolation électrique (Myelin) - Modulation de la transmission synaptique…

CELLULES GLIALES DU SNC EMBRYONNAIRE ET LARVAIRE DE DROSOPHILE SNC larve LIII Glial marqueur (Repo)

CELLULES GLIALES DU SNC ADULTE DE DROSOPHILE

DIFFERENTS LIGNAGES PRODUISENT DES CELLULES GLIALES Précurseurs neuraux purs Neuroblaste (NB) n GMC NB Glioblaste (GB) Plusieurs cellules gliales g GB

DIFFERENTS LIGNAGES PRODUISENT DES CELLULES GLIALES Précurseurs neuraux mixtes Précurseurs neuraux purs Neuroglioblaste (NGB) Neuroblaste (NB) n GMC NB Glioblaste (GB) Plusieurs cellules gliales g GB

DIFFERENTS LIGNAGES PRODUISENT DES CELLULES GLIALES

DIFFERENTS LIGNAGES PRODUISENT DES CELLULES GLIALES Neuroblaste ? Glioblaste ? Neuroglioblaste ?

gcm = glial cell missing LES GENES gcm ET gcm2 CODENT POUR DEUX FACTEURS DE TRANSCRIPTION HOMOLOGUES DANS LEUR DOMAINE DE LIAISON À L’ADN Définition d’un facteur de transcription ? gcm = glial cell missing Autorégulation

LES GENES gcm ET gcm2 CODENT POUR DEUX FACTEURS DE TRANSCRIPTION HOMOLOGUES DANS LEUR DOMAINE DE LIAISON À L’ADN DBD AD P E S T N L 1 504 DBD: DNA Binding Domain NLS: Nuclear Localisation Signal PEST: Protein degradation motif AD: Activation Domain Protéine Gcm Autorégulation des gènes gcm-gcm2 gcm gcm2 30B 30C 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1 kb Gcm Binding Site (GBS) = AT(G/A)CGGG(C/T)

Glial marqueur (Repo) PHENOTYPE DES MUTANTS gcm, gcm2 et gcm-gcm2 Sauvage Mutant gcm Mutant gcm2 Mutant gcm-gcm2 Glial marqueur (Repo) Comment expliquer que: 1) le mutant gcm2 n’a pas de phénotype ? 2) le phénotype du double mutant gcm-gcm2 est plus fort que celui du mutant gcm ?

SUREXPRESSION DES GENES gcm, gcm2 et gcm-gcm2 Sauvage GOF gcm GOF gcm2 GOF gcm-gcm2 Comment expliquer que le phénotype gain de fonction de gcm-gcm2 est plus fort que celui de gcm et gcm2 ?

A QUEL MOMENT LES GENES gcm-gcm2 SONT EXPRIMÉS ? Précurseurs neuraux mixtes Précurseurs neuraux purs Neuroglioblaste (NGB) Neuroblaste (NB) n GMC NB Glioblaste (GB) Plusieurs cellules gliales g GB

A QUEL MOMENT LES GENES gcm-gcm2 SONT EXPRIMÉS ? Précurseurs neuraux mixtes Précurseurs neuraux purs Neuroglioblaste (NGB) Neuroblaste (NB) n GMC NB Glioblaste (GB) Plusieurs cellules gliales g GB

LES GENES gcm ET gcm2 SONT NECESSAIRES ET SUFFISANTS POUR INDUIRE LA DIFFERENTIATION GLIALE Sauvage Mutant gcms Surexpression gcms Précurseur Neural (PN) PN NGB PN PN NGB NGB neurone Cellule gliale

Gène maître = suffisant pour induire un programme développemental LES GENES gcm ET gcm2 SONT NECESSAIRES ET SUFFISANTS POUR INDUIRE LA DIFFERENTIATION GLIALE Sauvage Mutant gcms Surexpression gcms Précurseur Neural (PN) PN PN PN NGB NGB NGB neurone Cellule gliale Gène maître = suffisant pour induire un programme développemental Pax6

LES GENES gcm ET gcm2 NE SONT PAS SUFFISANTS POUR INDUIRE LA DIFFERENTIATION GLIALE CHEZ LA LARVE Sauvage Gcm GOF Repo (cellules gliales) Comment expliquer que gcm-gcm2 sont capables d’induire de la gliogénèse chez l’embryon mais pas chez la larve ?

COMMENT IDENTIFIER LES GENES CIBLES DES GENES gcm-gcm2 ? Gcm et Gcm2 = facteurs de transcription Phénotypes perte et gain de fonction chez l’embryon

COMMENT IDENTIFIER LES GENES CIBLES DES GENES gcm-gcm2 ? Identification des séquences GBS dans le génome Analyse par hybridations sur puces à ADN (LOF/GOF)

COMMENT IDENTIFIER LES GENES CIBLES DES GENES gcm-gcm2 ?

ROLE NEUROGENIQUE DES GENES gcm-gcm2 CHEZ LA LARVE LPCs ARN gcm2 ARN gcm GPCs LN Sauvage gcm-gcm2 mutant Marqueur neuronal (Dac) Précurseurs gliaux (GPCs) et neuronaux (LPCs) de la lamina Comment des gènes gliogéniques peuvent avoir un rôle neurogénique ?

Sauvage c-gcm1 LOF c-gcm1 GOF Tuj1 GFP LE GENE gcm1 DE POULET EST NECESSAIRE ET SUFFISANT POUR INDUIRE DES NEURONES Sauvage c-gcm1 LOF c-gcm1 GOF Tuj1 GFP Tuj1 : marqueur neuronal