Méthodes de dosage d’un antigène par ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay)
Principe général Dosage d’un antigène par le test ELISA en sandwich (sans compétition) Jeffrey M. Vinocur Fixation de l’anticorps de capture (+ lavage) Ajout de l’échantillon à tester (+ lavage) Ajout d’un anticorps de détection (+ lavage) Ajout de l’anticorps secondaire lié à l’enzyme (+ lavage) Ajout du substrat de l’enzyme => mesure du signal et report sur la courbe d’étalonnage => dosage
Principe général Dosage grâce au test ELISA par compétition Source : BMedia
Applications Dosage de protéines en recherche (nécessité de contrôles) Dosage d’allergènes alimentaires Dépistage de nombreuses pathologies en particulier du VIH Exemples d’enzymes utilisées : peroxydase, béta-galactosidase plaque de microtitrage à 96 puits
Avantages Test simple, rapide, peu coûteux Détection spécifique Technique sensible Pas besoin d’appareil spécialisé pour détecter le signal
Inconvénients Dépendante des conditions du milieu Limité par la disponibilité en anticorps spécifique Risque de faux positifs Limite de détection moins bonne qu’en RIA