OVOGENESE-FOLLICULOGENESE Introduction Ovogenèse Folliculogenèse A-CROISSANCE FOLLICULAIRE Follicules primordiaux Follicules en croissance Follicules murs B-ATRESIE FOLLICULAIRE

OVOGENESE-FOLLICULOGENESE Ovulation Corps jaune Maturation ovocytaire Régulation de la folliculogenèse

STRUCTURE DES OVAIRES (1) Deux Fonctions / Une Unité Morphologique « LE FOLLICULE OVARIEN » FONCTION EXOCRINE Production du gamète femelle (Ovovyte II) FONCTION ENDOCRINE Oestrogènes / Progestérone / Androgènes Cellules de la thèque interne Cellules de la granulosa

STRUCTURE DES OVAIRES (2) ZONE CORTICALE Follicules ovariens -Follicules évolutifs F. Primordiaux F. Primaires F. secondaires F. tertiaires F de De Graaf -Follicules involutifs Corps Jaune Cyclique ou Gestatif Corpus Albicans (Corps Jaune Dégénératif)

STRUCTURE DES OVAIRES (3) ZONE MEDULLAIRE Tissu conjonctif Vaisseaux sanguins et lymphatiques Nerfs HÎLE OVARIEN

(FOLLICULE PRIMORDIAL AU FOLLICULE OVULATOIRE) OVOGENESE FORMATION CROISSANCE DIFFERENCIATION DU GAMETE FEMELLE FOLLICULOGENESE FORMATION CROISSANCE MATURATION DU FOLLICULE OVARIEN (FOLLICULE PRIMORDIAL AU FOLLICULE OVULATOIRE)

OVOGENESE Processus discontinu associant deux arrêts (Prophase I-Diplotène / Métaphase II) CROISSANCE MATURATION ATRESIE

9ème SEMAINE DE VIE EMBRYONNAIRE MIGRATION DES CELLULES GERMINALES PRIMORDIALES EMBRYONNAIRES (CORTEX OVARIEN) 10ème SEMAINE DE EMBRYONNAIRE / 20ème SEMAINE OVOGONIES DIVISIONS MITOTIQUES 11ème SEMAINE DE VIE EMBRYONNAIRE OVOCYTES I

Gros noyau à chromatine dispersée Un à deux nucléoles OVOGONIES Forme arrondie Gros noyau à chromatine dispersée Un à deux nucléoles Grandes mitochondries Reticulum endoplamisque peu développé Activité transcriptionnelle ++

Inactivation nucléolaire Augmentation des organites OVOCYTE I (1) Stade pré-leptotène Inactivation nucléolaire Augmentation des organites Stade zygotène Idem

Inactivation nucléolaire Réticulum Endoplasmique +++ OVOCYTE I (2) Stade pachytène Inactivation nucléolaire Réticulum Endoplasmique +++ Appareil de Golgi+++ Mitochondries+++

Activité transcriptionnelle maximale+++ Stade dyctié OVOCYTE I (3) Stade diplotène Grande cellule Activité nucléolaire Synthèse des ARNs+++ Mitochondries+++ Activité transcriptionnelle maximale+++ Stade dyctié In utero…Naissance…Puberté…Ménopause

Intense activité transcriptionnelle Intense activité traductionnelle OVOCYTE I POST-NATAL Follicule ovarien Intense activité transcriptionnelle Intense activité traductionnelle Croissance ovocytaire Maturation ovocytaire

Achèvement de la Méiose I Arrêt en Métaphase de Méiose II Fécondation OVOCYTE II (1) Post-ovulation Achèvement de la Méiose I Arrêt en Métaphase de Méiose II Fécondation Achèvement de la Méiose II

23 chromosomes (46 chromatides) 1er Globule Polaire Zone Pellucide OVOCYTE II (2) Ovocyte de 2ème ordre 23 chromosomes (46 chromatides) 1er Globule Polaire Zone Pellucide

23 chromosomes (23chromatides) 1er et 2ème Globules Polaires OVOCYTE FECONDE Noyau 23 chromosomes (23chromatides) 1er et 2ème Globules Polaires Zone Pellucide

FOLLICULOGENESE CROISSANCE DE L’OVOCYTE AU SEIN D’UN FOLLICULE FOLLICULES PRIMORDIAUX FOLLICULES EN CROISSANCE FOLLICULES MURS FOLLICULES DEGENERATIFS

FOLLICULES PRIMORDIAUX (1) LES PLUS NOMBREUX (50µm) OVOCYTE I ou OVOCYTE de 1er Ordre 30µm Grand Noyau central : Vésicule Germinative Chromatine fine réticulée et dispersée Volumineux Nucléole actif

FOLLICULES PRIMORDIAUX (2) LES CELLULES FOLLICULEUSES Une seule assise de cellules aplaties LA MEMBRANE DE SLAVJANSKI En formation

Follicules En Croissance

FOLLICULES PRIMAIRES (1) Premier stade d’évolution (60 à 80µm) OVOCYTE I ou OVOCYTE de 1er Ordre 40 à 50µm Mitochondries++/Appareil de Golgi++ Réticulum endoplasmique granuleux++ Grand Noyau central : Vésicule Germinative Microvillosités membranaires

FOLLICULES PRIMAIRES (2) LA ZONE PELLUCIDE FINE (ME) Enveloppe Hyaline (Glycoprotéines) LES CELLULES FOLLICULEUSES Une seule assise de cellules cubiques LA MEMBRANE DE SLAVJANSKI Plus apparente

FOLLICULES SECONDAIRES (1) Follicule plein ou pré-antral 80 à 200µm OVOCYTE I ou OVOCYTE de 1er Ordre 60 à 70µm Mitochondries+++/Appareil de Golgi+++ Réticulum endoplasmique granuleux+++ Grand Noyau central : Vésicule Germinative Microvillosités membranaires++

FOLLICULES SECONDAIRES (2) LA ZONE PELLUCIDE FINE (MO) Epaississement Expansions cytoplasmiques ovocytaires et folliculeuses (GAP JUNCTIONS) LES CELLULES FOLLICULEUSES 4 à 20 assises : Granulosa (Récepteurs FSH) Corps de Call et Exner (Antrum) : Follicule préantral

FOLLICULES SECONDAIRES (3) LA MEMBRANE DE SLAVJANSKI LA THEQUE INTERNE Stroma conjonctif Plusieurs couches cellulaires fusiformes puis cubiques Récepteur à LH ACTIVITE DE SYNTHESE Faible synthèse des stéroïdes

FOLLICULES TERTIAIRES (1) Follicule cavitaire ou antral 200µm à 10-12mm : CROISSANCE IMPORTANTE 2mm : Accélération de la croissance OVOCYTE I ou OVOCYTE de 1er Ordre 100µm Fragmentation de l’Appareil de Golgi : Granules corticaux Accumulation : Ribosomes, Vésicules, ARNm+++ Grand Noyau Excentré : Vésicule Germinative

FOLLICULES TERTIAIRES (2) LA ZONE PELLUCIDE FINE (MO) 15 à 20µm Expansions cytoplasmiques LES CELLULES FOLLICULEUSES Cumulus oophorus/Corona radiata Multiplication des cellules (Millions) Granulosa (Récepteurs FSH) non vascularisée Synthèse d’Oestrogènes

FOLLICULES TERTIAIRES (3) L’ANTRUM Liquide folliculaire (Acide Hyaluronique) LA MEMBRANE DE SLAVJANSKI LA THEQUE INTERNE Vascularisée Glandulaire (Androgènes) Récepteurs LH et FSH LA THEQUE EXTERNE Fibreuse

Follicules Murs

FOLLICULES MURS (1) Grand follicule cavitaire ou antral Follicule de De Graaf / Préovulatoire 18-20mm : FIN DE LA CROISSANCE OVOCYTE I ou OVOCYTE de 1er Ordre 150 à 180µm Granules corticaux Arrêt des synthèses Grand Noyau Excentré : Vésicule Germinative

FOLLICULES MURS (2) LES CELLULES FOLLICULEUSES Arrêt de la prolifération Granulosa : récepteurs à FSH et LH L’ANTRUM Volumineux LA MEMBRANE DE SLAVJANSKI

FOLLICULES MURS (3) LA THEQUE INTERNE Vascularisée Glandulaire (Androgènes) Récepteurs LH et FSH LA THEQUE EXTERNE Fibreuse

Ovulation

FOLLICULE DEHISCENT (1) LIBÉRATION DE L’OVOCYTE PAR RUPTURE DU FOLLICULE MÛR OVOCYTE I Modifications nucléaires Modifications cytoplasmiques Reprise de la Méiose I  Rupture de l’enveloppe nucléaire  Arrêt en Métaphase II

FOLLICULE DEHISCENT (2) EXPANSION DU CUMULUS Perte des jonctions Ovocytes / Cellules Folliculeuses Acide Hyaluronique : Dissociation du Cumulus

FOLLICULE DEHISCENT (3) REACTION INFLAMMATOIRE -Mécanisme enzymatique -Mécanisme vasculaire -Contraction musculaire Augmentation de la cavité Ischémie : épithélium ovarien Hyperhémie thèque (Prostaglandines, Histamine)

Follicules Involutifs

ATRESIE FOLLICULAIRE (1) INVOLUTION DES FOLLICULES De la vie fœtale à la Ménopause In utero 7 Millions Naissance 900 000 Puberté 300 000 20 ans 100 000 45-50 ans 100 300 à 400 Cycles Menstruels / Follicules Murs 2 Ovocytes fécondés

ATRESIE FOLLICULAIRE (2) 99,9% des Follicules Maximale -Naissance -Puberté -Grossesse Mort ovocytaire Altération des cellules folliculeuses Altération de la thèque interne

ATRESIE FOLLICULAIRE (3) APOPTOSE <ANTRUM : OVOCYTE >ANTRUM : GRANULOSA Follicules dégénératifs : Follicules jeunes Follicules hémorragiques : Petits Follicules Cavitaires Follicules kystiques : Follicules Cavitaires Moyens Follicules thécogènes : Grands Follicules Cavitaires

Corps Jaune

Glande Endocrine Temporaire Transformation du Follicule Déhiscent CORPS JAUNE (1) Glande Endocrine Temporaire Transformation du Follicule Déhiscent FORMATION DU CORPS JAUNE Invasion Vasculaire Coagulum Central Lutéinisation: -Granulosa : Grandes Cellules Lutéales -Thèque Interne : Petites cellules Lutéales

CORPS JAUNE (2) Corps Jaune Cyclique ou Progestatif 27e Jour du cycle Progestérone et Oetrogènes Lutéolyse : Corpus Albicans Corps Jaune Gestatif 21e Jour du Cycle au 3e Mois de la Grossesse 6e Mois : Corpus Albicans

Régulation de la Folliculogenèse

PRESENTATION REGULATION GENERALE / ENDOCRINE REGULATION LOCALE / PARACRINE

+HYPOTHALAMUS LHRH-GnRH +HYPOPHYSE FSH/LH +OVAIRES OESTRADIOL PROGESTERONE ANDROGENES

BIOSYNTHESE DES STEROIDES OVARIENS CHOLESTEROL (PRECURSEUR DES STEROIDES) DEUX VOIES DE BIOSYNTHESE VOIE DES 4-STEROIDES VOIE DES 5-STEROIDES PREGNENOLONEANDROSTENEDIONE

Voie Δ5 Voie Δ4

Voie Δ4 Voie Δ5

LE FOLLICULE OVARIEN VOIE DES 5-STEROIDES (ANDROSTENEDIONE) OESTRADIOL++++ OESTRONE++++ VOIE DES 5-STEROIDES ANDROGENES+ (ANDROSTENEDIONE) PROGESTERONE/PREGNENOLONE/17-HYDOXYPROGESTERONE

LE CORPS JAUNE PROGESTERONE++++ ANDROGENES++ (ANDROSTENEDIONE) OESTRADIOL/OESTRONE (VOIE DES 4-STEROIDES)++ PREGNENOLONE/17-HYDOXYPROGESTERONE++

ORIGINE CELLULAIRE DES STEROIDES OVARIENS (1) FOLLICULE OVARIEN THEQUE INTERNE +J0…J10 ANDROGENES +J10…J14 ANDROGENES/OESTROGENES GRANULOSA +J0…J14 OESTROGENES PRODUCTION D’OESTROGENES : AROMATASE

ORIGINE CELLULAIRE DES STEROIDES OVARIENS (2) CORPS JAUNE THEQUE INTERNE  PETITES CELLULES LUTEALES PROGESTERONE GRANULOSA  GRANDES CELLULES LUTEALES OESTROGENES LUTEINISATION

REGULATION DE LA STEROIDOGENESE (1) ANTEHYPOPHYSE:FSH/LH 1-FOLLICULE DEVELOPPEMENT MATURATION SECRETION RUPTURE DU FOLLICULE

REGULATION DE LA STEROIDOGENESE (2) ANTEHYPOPHYSE:FSH/LH 1-CORPS JAUNE FORMATION MAINTIEN SECRETION

FSH RECEPTEURS : GRANULOSA ACTION 1-PROLIFERATION DES CELLULES DE LA GRANULOSA *STIMULE AROMATASE 2-SYNTHESE D’OESTRADIOL *SENSIBILISATION DES CELLULES DE LA GRANULOSA A LA FSH *APPARITION DES RECEPTEURS A LA LH

LH (1) RECEPTEURS : THEQUE INTERNE GRANULOSA CORPS JAUNE ACTION *SYNTHESE DES ANDROGENES *PIC DE LH : INHIBE LA STEROIDOGENESE

LH (2) ACTION 2-GRANULOSA *RECEPTEURS EN FIN DE PHASE FOLLICULAIRE *ARRET DE LA PROLIFERATION *DIMINUTION DES RECEPTEURS A FSH *SECRETION INTAFOLLICULAIRE DE PROGESTERONE

LH (3) ACTION 3-CORPS JAUNE *SYNTHESE DE PROGESTERONE *MAINTIEN DU CORPS JAUNE CYCLIQUE

STEROIDES OVARIENS ANDROGENES  GRANULOSA 1-SYNTHESE DES OESTROGENES *STIMULATION DE L’ACTIVITE AROMATASE/FSH 2-SYNTHESE DE PROGESTERONE OESTROGENES/FSH *FORTE DOSE / INHIBITION DE LA STEROIDOGENESE

REGULATION GENERALE / ENDOCRINE FSH/LH : SOUTIENNENT LA CROISSANCE FOLLICULAIRE FSH/LH : SOUTIENNENT LA STEROIDOGENESE OVARIENNE REGULATION LOCALE / PARACRINE OESTROGENES/ANDROGENES/PROGESTERONE INHIBINE

CYCLE MENSTRUEL

Maturation folliculaire/maturation ovocytaire PHASE FOLLICULAIRE (1) Maturation folliculaire/maturation ovocytaire RECRUTEMENT (J0) *FOLLICULES CAVITAIRES (1 à 8, 4mm) *FSH+++ LH BASAL *CROISSANCE FOLLICULAIRE *SYNTHESE D’OESTRADIOL *MULTIPLICATION DES RECEPTEURS A FSH (GRANULOSA)

Maturation folliculaire/maturation ovocytaire PHASE FOLLICULAIRE (1) Maturation folliculaire/maturation ovocytaire RECRUTEMENT (J0) *FOLLICULES CAVITAIRES (1 à 8, 4mm) *FSH+++ LH BASAL *CROISSANCE FOLLICULAIRE *SYNTHESE D’OESTRADIOL *MULTIPLICATION DES RECEPTEURS A FSH (GRANULOSA)

PHASE FOLLICULAIRE (2) SELECTION DU FOLLICULE DOMINANT (J6) *DIMINUTION DES TAUX DE FSH (INHIBINE /GRANULOSA) *FOLLICULES DOMINANTS / AUGMENTATION DES RECEPTEURS A FSH *ATRESIE DES AUTRES FOLLICULES *AUGMENTATION DE LA SECRETION D’OESTRADIOL

PHASE FOLLICULAIRE (3) DOMINANCE (J6 A J14) *ARRET DU RECRUTEMENT *ATRESIE DES AUTRES FOLLICULES *GRANULOSA : APPARITION DES RECEPTEURS A LH SYNTHESE DE PROGESTERONE

PHASE LUTEALE (1) FORMATION DU CORPS JAUNE *J14…J19 PETITES CELLULES LUTEALES PROGESTERONE GRANDES CELLULES LUTEALES OESTROGENES MAINTIEN DU CORPS JAUNE *J19…J24 LUTEOLYSE...LUTEOLYSE *J24…J28 :   17-E2+  Inhibine   FSH

Mâturation ovocytaire

DEFINITION (1) MODIFICATIONS NUCLEAIRES MODIFICATIONS CYTOPLASMIQUES MODIFICATIONS QUI INTERVIENNENT DANS L ’OVOCYTE I DU FOLLICULE MÛR POUR LE TRANSFORMER EN OVOCYTE II (DECHARGE OVULATOIRE DE LH) MODIFICATIONS NUCLEAIRES MODIFICATIONS CYTOPLASMIQUES

DEFINITION (2) MODIFICATIONS NUCLEAIRES REPRISE DE LA MEIOSE (VG  METAPHASE II) MODIFICATIONS CYTOPLASMIQUES APTITUDE A ÊTRE FECONDE ET A ASSURER UN DEVELOPPEMENT EMBRYONNAIRE NORMAL

MATURATION OVOCYTAIRE RELATIONS ENTRE CELLULES FOLLICULEUSES ET OVOCYTES MODIFICATIONS MORPHOLOGIQUES MITOCHONDRIES GRANULES CORTICAUX MATURATION NUCLEAIRE MODIFICATIONS BIOCHIMIQUES SYNTHESE DES ARNs SYNTHESE DES PROTEINES

MATURATION NUCLEAIRE (1) RUPTURE DE LA VESICULE GERMINATIVE GVBD DISPARITION DU NUCLEOLE CONDENSATION DES CHROMOSOMES AVANT ET APRES GVBD MIGRATION DES CHROMOSOMES ARRET DES TRANSCRIPTIONS

MATURATION NUCLEAIRE (2) FORMATION DU FUSEAU MEIOTIQUE SANS CENTRIOLE (MTOC) PASSAGE ET ARRÊT EN METAPHASE II MATURATION OVOCYTAIRE FINALE / REPRISE DE MEIOSE

MATURATION CYTOPLASMIQUE MIGRATION DES GRANULES CORTICAUX SOUS-CORTICALE  CORTICALE MIGRATION DES MITOCHONDRIES ET DE L’APPAREIL DE GOLGI (PERINUCLEAIRE) DISPARITION DES MICROVILLOSITES PRES DU MATERIEL NUCLEAIRE

MODIFICATIONS BIOCHIMIQUES OVOCYTAIRES DIMINUTION DES FACTEURS INHIBITEURS O.M.I : OOCYTE MEIOSIS INHIBITING FACTOR AMPc INTRAOVOCYTAIRE GMPc  GRANULOSA ACTIVATION DU M-PF (M-PROMOTING FACTOR) G2  M CONSEQUENCE RUPTURE DE LA VESICULE GERMINATIVE

PROPHASE I  METAPHASE II MATURATION MEIOTIQUE PROPHASE I  METAPHASE II G2  M Pré-MPF (Phosphorylé/Inactif)  MPF (Déphosphorylé/Actif) PROGESTERONE MPF : Hétérodimère constitué de deux sous-unités (i) catalytique (1) (CDK1 : cyclin dependant kinase) et (ii) régulatrice (2) (cycline B)

MATURATION OVOCYTAIRE FINALE REPRISE DE MEIOSE +HYPOTHALAMUS PIC LHRH +HYPOPHYSE PIC LH +FOLLICULE PROGESTERONE 24 HEURES : MEIOSE I  MEIOSE II 36 HEURES : OVULATION  LUTEINISATION