Pr BENMEZDAD A Candida et candidoses

Définition : Les candidoses = mycoses provoquées par le développement dans les tissus, de levures appartenant au genre Candida, - Superficielles Fréquentes, bénignes Muqueuses, Peau, Ongles - Profondes Graves, se développent sur des terrains particuliers avec présence de facteurs favorisants → Infections opportunistes

Épidémiologie : Classification : Selon la reproduction sexuée : Règne : Fungi (champignons) Division : Ascomycotina Classe : Ascomycètes Ordre : Saccharomycétales Fmille : Saccharomycetaceae Genre : Candida Plus d’une centaine d’espèces(196) a été décrite ; Candida albicans est l’espèce la plus souvent incriminée ( 70 à 80 %).

Morphologie : Candida = Levures = formes fongiques uni Cellulaires (2 - 4µ) Se multiplient par bourgeonnements Produisant un vraie mycélium, ou un pseudomycélium portant des blastospores , des chlamydospores

Pseudomycelium= fausse filamentation Morphologie   Pseudomycelium= fausse filamentation levures assemblées bout à bout simulant un filament mycélien

Morphologie Pseudomycélium spécifique de l’espèce C albicans Mycélium Vrai spécifique de l’espèce C albicans levure tube germinatif filament mycélien Responsable de l’invasion des tissus et des organes de l’hôte Mycélium Vrai Pseudomycélium

Spores terminales ou latérales arrondies , Morphologie  Chlamydospores Forme de résistance de Candida albicans Spores terminales ou latérales arrondies , de grande taille (8- 12 µm), entourées par une paroi épaisse. Utilisés comme critère diagnostic.

Habitat: Candida albicans et Candida glabrata sont des endosaprophytes naturels du tube digestif, les autres espèces de Candida (C. tropicalis, C. parapsilosis, C. kefyr, C. krusei, C. guilliermondii, etc.) peuvent survivre et se multiplier dans le tube digestif ; leur source est surtout alimentaire. Certains d'entre eux sont également présents dans le tractus uro-génital ou sur la peau (en particulier C. parapsilosis et C. guilliermondii, C famata ). C. albicans ne se trouve pas sur la peau dans des conditions normales. C. dubliniensis  longtemps confondu avec C.albicans et retrouvée (1995), au niveau de la cavité buccale de sujets séro (+) pour le VIH

Source et mode de contamination: - Contamination endogène : .cavité buccale, tube digestif : site habituel du champignon .vagin fréquent chez la femme enceinte .voies urinaires - Contamination : Mère → enfant - Extra humaine : air, matériel souillé (pose de cathéter)

5/ Facteurs favorisants :Responsables du passage de: l’état saprophytique → l’état pathogène. Facteurs locaux: - L’humidité ,macération , transpiration , brûlures…… . ménagères, plongeurs.. . vêtements ou chaussures serrées. - Les modifications du pH cutanés: . usage d’un savon acide . solution antiseptique sur la peau ou muqueuse (vagin) - Contact avec un milieu riche en sucre ( pâtissiers...)

Facteurs Physiologiques : Nourrissons + sujets âgés = mycoses buccales +++ .Grossesse → candidoses vaginales ( augmentées au «3ème trimestre Rôle des hormones de reproduction ( œstrogènes) qui fournissent une excellente source de carbone pour les candida Pathologiques: .Le diabète → Grands plis, Muqueuses ano- génitales … .Hypo et hyperthyroïdie, SIDA, tuberculose… .Maladies malignes: cancer, leucémie, lymphome… Iatrogènes : .ATB, corticoïdes, antimitotiques, chimiothérapie… .Agressions chirurgicales : Transplantation d’organe (rénale), chirurgie digestive, pose de cathéter, prothèses, sondes…

Manifestations cliniques: Manifestations cutanées: Les Intertrigos: On distingue 2 types *Intertrigos des grands plis: -Plis inguinaux, axillaires, sous mammaires, inter fessiers…. -Particulièrement chez les obèses, diabétiques -Diagnostic différentiel avec les dermatophytes . -Lésions élémentaires= vésiculo- pustuleuse -Débute au fond du pli→ Fissuré → Parfois recouvert d’1 enduit blanchâtre -Atteinte symétrique à contour mal limité→ nappe érythémateuse, lisse, rouge foncé -Prurit intense

* Intertrigo des petits plis: Interorteils, interdigitaux, ombilicaux, rétro- auriculaires, commissures labiales.. Atteinte des mains : est la plus fréquente Desquamation prurigineuse Extension → autres espaces + dos et paume des mains, contour irrégulier et déchiqueté. Atteinte des pieds : plus rare .Intertrigo prurigineux, non spécifique, simule un pied d’athlète à dermatophyte avec lequel il Peut coexister. Extension au dos du pied: reste limité autour du pied , rougeâtre et irritatif . Par contre l’extension plantaire donne un aspect macéré blanchâtre criblé de vésicules.

Onyxis et périonyxis: Onychomycose candidosique - fréquente chez la ♀ - doigts +++, rarement → orteils - professions exposées : pâtissiers, ménagères, blanchisseuses, plongeurs… - microtraumatismes :(Soins de manicure excessive..) - utilisation d’irritants chimiques, diabète… Le Candida → Pénètre la partie proximale de l’ongle Provoque un périonyxis subaiguë= Inflammation sous forme d’1 bourrelet rouge, douloureux. périonyxis =paronychie

Onyxis et périonyxis périonyxis L’altération unguéale est IIaire → Ongle devient rugueux, strié, brunâtre Plus rarement, le début est distal → tache brun- jaunâtre ou bleu noir médiane ou latérale, qui progresse vers la matrice Parfois l’ongle se décolle→ onychodystrophie totale ou subtotale ( onycholyse). Extension aux autres ongles de la main

Candidoses des muqueuses : Candidoses buccales et péribuccales : - Le muguet : Candida albicans est toujours isolé Très fréquent (Nné, prématuré), VIH+, de diag facile se caractérise par un enduit crémeux, blanchâtre , parfois pseudo-membraneux( face interne des joues, gencives, langue, voile, palais, luette et pharynx). Signes fonctionnels :sensation de cuisson ou de goût métallique avec dysphagie Muguet

La langue noire villeuse : étiologie mal connue Une surinfection par C. albicans ou C. glabrata est possible La langue est noir ou marron avec hypertrophie et allongement des papilles linguales. Rôle possible du tabac, ATB, abus des boissons alcooliques ou une mauvaise hygiène buccale. Langue noire

  Candidoses chroniques atrophiques : Atteint électivement les sujets porteurs de dentiers et les sujets infectés par le VIH. La langue est rouge, luisante et dépapillée , souvent douloureuse La perlèche candidosique : fissuration douloureuse , suintantes + enduit blanchâtre au niveau des commissures labiales La chéilite candidosique : Lésion érythémateuse et érosive du vermillon des lèvres candidoses œsophagiennes : dysphagie douloureuse, c’est un marqueur du sida ( CD4 <100/mm3). - La candidose vulvo-vaginite ( CVV) :fréquente chez la femme enceinte( 3ème trimestre) .Leucorrhées blanchâtres, en « lait caillé »,prurit et œdème vulvaire+enduit blanchâtre. - Chez l’homme: balanite candidosique , méatite…… - Candidose urinaire: dysurie, cystite - Anite et périanite candidosique: prurit intense

Manifestations digestives : - Candidoses gastriques → brûlures gastriques, VMS - Candidoses intestinales→ gastro-entérite, douleur abd diffuse… e/ Candidoses systémiques ou invasives : Se situent au 4eme rang des infections hospitalières Services: Cancérologie, hématologie , chirurgie, transplantation, réanimation, grands brulés..

Endogènes: foyer digestif Candidoses systémiques ou invasives : Endogènes: foyer digestif Porte d’entrée (C.albicans) Exogènes : cathéter, prothèses, alimentation parentérale (C.tropicalis, C.albicans) Elles regroupent : → Candidoses disséminées → Candidoses profondes → Septicémie à Candida Candidose disséminée (ou systémique) = septicémie à candida compliquée d’une atteinte d’au moins 2 organes ou sites stériles non contiguës Candidose profonde= atteinte d’1 seul site stérile avec ou sans septicémie à Candida

Tableau clinique= fièvre prolongée rebelle aux ATB, troubles CVx, AEG, Septicémie à Candida : Tableau clinique= fièvre prolongée rebelle aux ATB, troubles CVx, AEG, Elles se compliquent souvent par des atteintes viscérales : Candidoses systémiques ou invasives : *Localisation respiratoire: pneumonies et bronchopneumonie à Candida *Endocardite à Candida : Pronostic grave et toujours fatal *Candidoses rénales : de plus en plus fréquentes *Méningite à Candida : Rare→ diag difficile→ LCR → levure est rarement isolée

Candidoses systémiques ou invasives : *Candidoses ostéoarticulaire  *Candidoses hépatosplénique  Endophtalmie: nodules rétiniens blanchâtres ou jaunâtres et duveteux *Candidoses cutanées des septicémies à Candida : Lésions maculo- papuleuses 0,5 à 1cm, monomorphe rose- rouge ou purpurique siègant au nv du tronc, abd et membres

Autre candidoses : Candidose cutanéo muqueuse chronique : le granulome à candida :Assez rare, Touche → jeunes enfants ayant un déficit spécifique de l’immunité Caire ( anti Candida) → Atteinte : ongle, face, C. chevelu, extrémités des membres Candidoses des héroïnomanes: Fait suite à l’injection IV d’1 héroïne souillée par la levure du genre candida Fièvre, myalgie, éruption papuleuse ou papulo- nodulaire au nv de la barbe, C. chevelu Signes de disséminations Rechercher les atteintes profondes (oculaires++) Asthme à Candida : peut guérir si on traite le foyer digestif Autres : Eczéma, urticaire, rhinite, sinusite, kératite …

IV- Diagnostic : - Fiche de renseignement : indispensable I. compétent: Mycoses superf - Contexte clinique (muguet, vaginite..) I. déprimés: Mycoses superficielles sont plus fréquentes mais également des Mycoses profondes - Contexte épidémiologique: Existence de facteurs favorisants - Arguments paracliniques: Imagerie médicale PN < 500 elts / ml, chez I. déprimés LymphT (CD4 <100)

Isolement sur Sabouraud + ATB ± ATF - Diagnostic mycologique : Mise en évidence des Candida Sur prélèvements: Cutanés, unguéaux, buccaux, selles, urines, LCR, sang, aspirations bronchiques, biopsies d’organes, liquide de dialyse péritonéale… Démarche diagnostic d’une levure Produit pathologique ↓ Examen direct Isolement sur Sabouraud + ATB ± ATF 24 à 48h Culture

Culture ↓ Noter l’abondance des colonies Vérifier la présence de levure par l’examen direct Repiquage sur PCB ou Test de filamentation Rice Cream ↓ 3h ( 37°C) ↓ 24 à 48( 27°C) (+) →C.albicans Pseudo filaments + Absence de pseudofilaments Pseudomycélium Chlamydospores ↓ + ↓ .Candida non filamenteux Blastospores C.albicans (exp : C.glabrata) ↓ C.dubliniensis Ou autres genres genre Candida (exp :Cryptococcus) Fermentation des sucres Assimilation des sucres Résistance à l’actidione Réduction du chlorure triphényl tétrazolium (R.T.T )

1/ Prélèvement : Prélèvements→ sur lésions non traités depuis plusieurs jours → par grattage à la curette, bistouri ou vaccinostyle → déposé dans une boite de Pétri stérile → Ecouvillon→ pour lésions suintantes des muqueuses ou lésions ouvertes Les squames, débris d’ongles sont examinés dans la potasse à 30% + noir chlorazol Les liquides pathologiques, lésions suintantes→ sur frottis colorés au Gram ou MGG

2/ Examen direct : La présence + abondance des levures bourgeonnantes et filaments mycéliens → généralement une signification pathologique → levures 2 à 4 µ avec ou sans FM La présence de levures à l’ED ne dispense pas de poursuivre les recherches par isolement et identification des Candida

3/ Isolement des Candida : Culture à 25-30° sur gélose de Sabouraud + ATB + Actidione permet l’isolement rapide en 24- 48h de colonies levuriformes blanches et crémeuse L’actidione→ permet d’éviter le développement des moisissures saprophytes → permet de différencier certaines espèces de levures exp : .C.albicans, C. kefyr…→ pousse en présence de l’actidione .C.tropicalis→ ne pousse pas en présence de cet ATF

Colonies de Candida sur Sabouraud

4/ Identification du genre Candida: Sur milieu de Sabouraud en 24- 48h→ formes levures → leur identification est impossible Le genre Candida est caractérisé par la filamentation et la production de blastospores On obtient cette morphologie dans les cultures âgées sur milieu de Sabouraud ou Après repiquage sur milieu PCB, Rice cream… a/ Identification de l’espèce : Candida albicans : Basée sur la production de"Chlamydospores" sur Rice cream, PCB… - PCB (pomme de terre- carotte- bile): La culture obtenue sur milieu de Sabouraud est repiquée sur milieu PCB: Quelques stries dans le fond du tube, puis une strie longitudinale légèrement en profondeur ( 27 à 28°C)

Après 24 à 48h, Prélever un fragment de gélose dans les zones filamenteuses développée légèrement en profondeur dans le milieu, Écraser entre lame et lamelle et observer au M.O Au microscope: Les Chlamydospores de C.albicans = spores terminales ou latérales, rondes ou ovales, ≈ 6 à 12 µ de Ө à paroi épaisse, à double contour

- Rice cream: *Ce milieu se présente en boite de Pétri solide, *On réalise une suspension en stérile *On verse qlq gouttes à la surface et à l’aide d’1râteau on badigeonne la surface, *Placer 2 à 3 lamelles *On ferme la boite et on incube 24 à 48 h à 27-28°C *On observe directement la boite sous microscope au nv des lamelles *S’il y a seulement des levures→ Inidentifiables *S’il y a formation de mycélium ou pseudomycélium + Chlamydospores→C.albicans

Filamentation dans le sérum (test de Blastèse) : Un bon procédé d’identification de C.albicans basée sur : La rapide germination des levures et formation d’un filament (tube germinatif) dans du sérum animal ou humain à 37°C et en 4h (0,5 ml de sérum+qlq gttes d’une suspension de levures)

b/ Identification des autres espèces de Candida : C. dubliniensis retrouvé chez l’ID ( HIV) donne les mêmes résultats que C.albicans ( pseudomycélium, filaments, blastospores et chlamydospores) Si la levure isolée ne donne pas de Chlamydospores → utiliser d’autres tests pour l’identification des espèces - Sensibilité à l’actidione: (milieu de Sabouraud + Actidione 0,5g%) Permet de caractériser certaines espèces de candida exp: le C. tropicalis, qui ne pousse pas sur ce milieu Réduction du chlorure triphényl tétrazolium (RTT): Milieu de Sabouraud tétrazolium - Auxanogramme du carbone: assimilation des sucres(aérobiose) Zymogramme: Fermentation des sucres(anaérobiose) Milieu chromogène: hydrolyse spécifique d’un substrat chromogène présent dans le milieu grâce à l’activité enzymatique des Candida

La galerie « Auxacolor » - Auxacolor : Auxanogramme colorimétrique .pour l’identification des principales levures d’intérêt médical .Repose sur l’assimilation des sucres + activité enzymatique particulière .La croissance des levures est visualisée par le virage d’un indicateur PH (bromocrésol pourpre) La galerie « Auxacolor » Il existe sur le marché de très nombreux types de galeries proposant des clés d’identification : *le système API 32C® *Fungiscreen *Milieu CHROMagar = Fungichrome®→ pigmentation spécifique exp :Candichrom II, Candiselect 4

Exp : isolement sur milieu chromogène candi 4 C.albicans→ colonies rose violet C.tropicalis→ colonies turquoise

- Pour C.albicans et C. krusei : On dispose de test qui utilisent des Ac monoclonaux reconnaissant des Ag spécifiques de la paroi de ces 2 levures = .Bichrolatex albicans® et .Krusei color® Ces tests sont rapides, spécifique et s’utilisent directement sur un échantillon de la culture

Culture ↓ Noter l’abondance des colonies Vérifier la présence de levure par l’examen direct Repiquage sur PCB ou Test de filamentation Rice Cream ↓ 3h ( 37°C) ↓ 24 à 48( 27°C) (+) →C.albicans Pseudo filaments + Absence de pseudofilaments Pseudomycélium Chlamydospores ↓ + ↓ .Candida non filamenteux Blastospores C.albicans (exp : C.glabrata) ↓ C.dubliniensis Ou autres genres genre Candida (exp :Cryptococcus) Fermentation des sucres Assimilation des sucres Résistance à l’actidione Réduction du chlorure triphényl tétrazolium (R.T.T )

- Cas particulier des Hémoculture : .Les hémocultures manquent de sensibilité  .Milieu pour hémocultures bactériennes Castaneda, Sabouraud liquide .De nombreuses méthodes sont disponibles mais malgré l’amélioration de ces milieux, la sensibilité reste faible exp : Isolator®, Fungus bactec® Typage génotypique des souches : utilisation de sondes moléculaires et la technique de la PCR mais le coût important actuel ne permet par leur usage en routine

- Réactions sérologiques: 1/ Recherche d’Ac circulants : IFI, HGP, ELISA, I. diffusion, Eléctrosynérèse , IEP … - Pour le diag (+) des candidoses profondes, il faut exiger au moins 3arcs de précipitations. - L’ascension du Tx des Ac qui se traduit par l’ du nbre d’arcs (IEP) permet d’apporter une réponse sur le caractère invasif ou non du champignon 2/ Recherche d’Ag circulants : Intérêt: Chez l’ I. déprimé - Les R° sérologiques sont parfois difficilement interprétables ou faussement (−) - La (+) des Ag précède l’ascension des Ac

Ag→ Issus le plus souvent de la paroi des levures= Mannanes - Il sont recherchés dans le Sang, LCR, Urines, LBA - Des tests sont commercialisés : *Cand tec®: utilise des particules de latex sensibilisés par un Ac polyclonal→ résultats immédiat mais ce test manque de sensibilité et de spécificité *Pastorex Candida® : même principe, sensibilisé par un Ac monoclonal Anti mannane→ spécificité 98% , Manque de sensibilité

- Examen Anapath : Consiste à rechercher les Candida dans les tissus (biopsies, pièces d’exérèse chirg) → Coloration: PAS, Gomori-Grocott Pouvoir pathogène pour les animaux : Le lapin = animal de choix, le plus sensible Souches inoculés→ IV→ provoque la mort de l’animal en 3 à 7 j Autres animaux : souris, rat - Imagerie médicale : Rx, Scanner, IRM → Nécessaire pour faire le bilan d’extension de certaines mycoses, Le plus souvent non spécifique (atteinte pulmonaire)

V- Traitement : Il faut améliorer l’état général et éliminer les conditions favorisantes : 1/ Candidoses superficielles : TRT local, dans certains cas justifient l’utilisation d’un antifongique par voie systémique - Candidoses cutanées: Kétoconazole (Kétoderm®): crème 2%→1app 2x /semaine Econazole (Pevaryl®) : lait 1%, crème 1%, spray→ 1app 2x/j 1à 2 semaines Amphotéricine B (Fungizone®): lotion → 2 à 4 app/ j 2 semaines Ciclopiroxolamine (Mycoster®): crème, spray →2 app/ j 3 semaines Miconazole (Daktarin ®): gel, lotion → 2 app/ j 1à 2 semaines

- Candidose unguéale : TRT local : Antifongique local En cas d’échec ou de lésions multiples ou trop évoluées: Kétoconazole (Nizoral®)→200 à 400 mg / j pendant 3 mois - Candidoses oro-pharyngées : TRT local : (Mycostatine, Amphotéricine B, Miconazole) per os Chez l’I.déprimés→TRT systémique : Fluconazole (Triflucan®): 100 à 200 mg / j 2 semaines +++ ou Kétoconazole en cas d’échec: Itraconozole (Sporanox®) 200 à 400mg / j →5 à14 j Ampho B IV Voriconazole(Vfend®) PO ou IV

- Candidoses génitales : TRT local : sous forme d’ovules ou de crème vaginales, Durée du TRT →3 à 6 j (Mycostatine, Miconazole…) Formes récidivantes : 2 cp / j de Nizoral®→1mois 150 mg de Triflucan® en 1seule prise TRT du partenaire : s’il présente une balanite Candidosique 2/ Candidoses profondes : Consensus international: traiter toute candidémie même isolée+ enlever ou changer si possible les cathéters vasculaire. 15 jours après la dernière hémoculture positive et / ou la disparition des symptômes TRT par voie systémique dépend du terrain ( statut immunitaire ) et des manifestations cliniques * Amphotéricine B désoxycholate (Ampho B) 0,5 à 1,5 mg / Kg / j en IV + 5 flucytosine (Ancotil®)100 à 200mg / j en per os ou en perf

Ancotil ® : Jamais donné seul→ apparition de résistances Associé à l’Ampho B→ meilleurs résultats Effet IIaires :Troubles digestifs, hématologiques, hépatiques dose dépendante Ampho B→ effets IIaires : K  , Mg , I. rénale, fièvre, frisson lors de l’injection, cytopénie *Dérivés lipidiques de l’Ampho B : AmB liposomiale (ABLP) = Ambisome® : 3 à 5mg / Kg / j ,IV AmB lipid Complex (ABLC) = Abelcet®: 5 mg / Kg / j IV, Mêmes effets IIaires que l’Ampho B mais fréq moindre, tolérance sup pour l’Ambisome

*Azolés : . Fluconazole (Trifulcan®) : IV / PO 400 à 800 mg /j . Itraconazole (Sporanox®) : IV / PO Attaque : IV : 200mg /12h Entretien: IV : 200 mg/j PO: 400 à 600 / 24 h PO : 400 mg/j . Voriconazole (Vfend®): IV / PO 6 mg / Kg / 12h à J1, puis 4mg / Kg / 12h *Echinocandines: .Caspofungine (Cancidas®) : IV, 70 mg → J1 puis 50 mg Effet IIaires : peu fréq et bénin . Intérêt de l’association Ambisome® + Caspofungine dans le TRT . TRT chirurgical: Endocardites Splénectomie→ qd persistance des abcès splénique malgré leTRT

Prophylaxie: La prophylaxie est réservé aux patients présentant des facteurs de risques majeurs (Neutropéniques, ATB à large spectre et prolongée, hémodialysés…) Le Fluconazole (400mg/J) actif sur C.albicans est proposé,mais son utilisation en prophylaxie a été rendue responsable de l’émergence croissante des autres espèces opportunistes du genre Candida notamment C. krusei et C. glabrata ( sélection de levures résistantes) .

Merci