Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Réalisation d’une Structure animalière protégée à l’Institut Pasteur pour la production et l’expérimentation sur animaux standardisés

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Objectifs  Production reproductive des animaux: Fournir des animaux standardisés  Expérimentation: avoir les conditions pour la réalisation de l’expérimentation dans les conditions requises pour le type de manipulation souhaitée.

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Référentiel normatif -1-  Directive CEE ( 24 novembre 1986) relative à la protection des animaux utilisés à des fins expérimentales ou à d’autres fins scientifiques: assurer aux animaux des soins adéquats et empêcher les douleurs ou souffrances inutiles

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Soins prodigués aux animaux  Conditions de vie hygiéniques;  Limiter au maximum les restrictions apportées au comportement des animaux.  Conditions physiques de l’environnement contrôlées;  Le bien-être de l’animal doit faire l’objet d’une observation par une personne compétente afin d’éviter toute souffrance.

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Référentiel normatif - 2-  Directive CEE: application des Bonnes Pratiques de Laboratoires telles que spécifiées par les directives de l’OCDE, traite de la conformité:  Des installations d’essais  Des modes opératoires normalisés

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Référentiel normatif  Directive CEE du 18 septembre 2000: protection des travailleurs contre les risques liés à des agents biologiques.  Classification des agents biologiques en fonction du danger qu’ils peuvent constituer pour le personnel et l’environnement,  Définition des niveaux de confinement

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Statut Génétique Statut Sanitaire Environnement Animaux standardisés  Trois paramètres :

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Définition  Animaux standardisés = animaux définis par rapport à:  Leur statut génétique,  Leur statut sanitaire, Maintenus dans un environnement contrôlé

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Environnement contrôlé Environnement protégé par:  Une barrière physique: maîtrise des paramètres de l’ambiance;  Séparation des secteurs: sale, propre et technique;  Procédures opératoires normalisées (soins et manipulations)

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Statut Génétique Dépend du système d’élevage : –Colonies non consanguines (panmictiques): génétiquement non définies sauf pour certains caractères = outbred (ex: souche SWISS); –Colonies consanguines: génétiquement définies; accouplement (FxS ) > 20 générations; gènes fixés à l’état homozygote = inbred ( ex: lignée Balb/C).

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Statuts génétiques Souris Non consanguines Swiss( OF1, NMRI…) Consanguines Balb/C; C57Black/6; CBA; DBA 2 MBT, MAI; PWK Rats Non consanguins Wistar Cobayes Albinos / Coloré HamstersConsanguins Doré (syrien)

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Statuts sanitaires  AXENIQUE ou GERM FREE (= 0 microbe) Redérivation.  GNOTOXENIQUE: mono-,… (Gnotobiotique).  HETEROXENIQUE(agnotobio- tique): EOPS(SPF); SSC; SOPF.  HOLXENIQUE: Conventionnel Néoholoxénique: conventionnalisé Élevage sous Barrière Élevage en isolateur Animalerie conventionnelle

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Animaux EOPS  Exempts d’Organismes Pathogènes Spécifiques  Synonyme = IOPS (Indemnes OPS) Bactéries :  Bactéries : Bordetella bronchiseptica Pasteurella sp. Salmonella Streptobacillus moniliformis Streptococci  hémolytiques(sauf groupe D) Maladie de Tyzzer Si lésions / signes cliniques : Clostridium sp. Dermatophytes Escherichia coli ( + sérotype) Klebsiella pneumoniae / oxytoca Proteus sp. Pseudomonas aeruginosa Staphylococcus aureus Treponema cuniculi (+ sérotype) Yersinia pseudotuberculosis

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Animaux EOPS Parasites :   Arthropodes   Helminthes   Eimeria sp.   Giardia sp.   Spironucleus sp.   Klosiella sp.   Encephalitozoon cuniculi   Toxoplasma gondii   Trichosomoides crassicauda Virus: Sérologie ( tous les 3 mois) :  Virus de la pneumonie de la souris (PVM)  Virus de la maladie hémorragique du lapin (RHDV)  Poxvirus du lapin (myxomatose)  Rotavirus du lapin  Virus Sendaï  Virus simien 5 (SV 5)

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Statut Génétique Statut Sanitaire Environnement Animaux standardisés + confinement  Quatre paramètres : confinement

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Le niveau de confinement  La manipulation d’agents biologiques (virus, bactéries, parasites…) est la composante majeure de l’expérimentation animale.  L’évaluation du risque inhérent à la manipulation d’agents pathogènes a généré la même classification que pour les laboratoires de même ordre.

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Le niveau de confinement  Cette classification a été étendue à la manipulation des Organismes Génétiquement Modifiés = OGM  À chaque niveau de risque correspond un niveau de confinement:

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Correspondance LaboratoireAnimalerie L1 A1(P1) conventionnel L2A2(P2) L3A3(P3) L4A4(P4)

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Définitions Niveau 1 Risque faible (individu et collectivité) Niveau 2 Risque modéré pour l’individu, limité pour la collectivité Niveau 3 R. élevé pour l’individu faible pour collectivité Niveau 4 Risque élevé (individu et collectivité)

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Caractéristiques du projet Création d’une animalerie répondant aux standards internationaux avec: Création d’une animalerie répondant aux standards internationaux avec:  Une zone de production : élevages reproducteurs d’animaux standardisés;  Une zone d’expérimentation: boxes individualisés comportant une aire de manipulation et une aire de stabulation

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Principes généraux 1- Séparation des types d’activité: 1- Séparation des types d’activité: REPRODUCTION REPRODUCTION/EXPERIMENTATION 2- Séparation des espèces, des souches et des lignées 2- Séparation des espèces, des souches et des lignées 3- Etage technique accessible de l’extérieur 3- Etage technique accessible de l’extérieur

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Etage technique

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Zone de reproduction: Animalerie d’élevage pour animaux EOPS

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Capacités de production escomptées Au démarrage:  Souris: de diverses souches et colonies.  Rats: Non consanguins  Cobayes:  Hamsters: syriens

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Principaux éléments de la barrière:  Zone d’élevage isolée par une barrière de pressions positives  Accès réglementé  Matériel autoclavé, à l’entrée  Flux unidirectionnels  Séparation des zones " Sales / Propres" " Sales / Propres"

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Paramètres physiques Environnement: 6 salles d’élevage indépendantes, de 30 m 2 chacune (ILAR*)  P° positives;  θ = °C;  H° = %;  Ventilation: 20 renouvellements horaires;  Filtres HEPA (H14) au niveau de chaque salle  Filtration de l’air à l’extraction :HEPA + Charbon * Institute For Laboratory Animals Research

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Schéma de principe: gradient de pressions Couloir sale Zône centrale propre Élevage PROPREPROPRE SALESALE SALESALE Élevage +2

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Schéma de principe: les flux Couloir sale Matériel stérile Arrivé personnel Zône centrale propre Élevage PROPREPROPRE Arrivée animaux SALESALE SALESALE Élevage

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai zone d’expérimentation de niveau II

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai La Barrière et le confinement  Zone d’élevage isolée (pression positive)  Accès réglementé  Matériel autoclavé, stérilisé à l’entrée  Flux unidirectionnels  Séparation des zones " Sales / Propres" " Sales / Propres"  Confinement II

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Structure d’un boxe d’expérimentation PSM II Paillasse Stabulation PROPREPROPRE COULOIR SALE SALESALE

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Ventilation des boxes Air neufAir viscié

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Prestations à l’échelle du pays En 3 phases: 1.2ème semestre 2008: fourniture d’animaux, 2.Année 2009: accueil d’expérimentateurs sur cahier de charge et établissement d’un devis, 3.Plus tard(?): réalisation d’études à façon.

Z. Benlasfar / congrès "a3p" / Hammamet mai Merci pour votre attention..!..