EVALUATION DES PERFORMANCES ET DE LA PRATICABILITE DES TESTS RAPIDES POUR LE DEPISTAGE DES ANTICORPS ANTI-VIH Eric LAFORGERIE XXème Colloque de Virologie de Versailles, 25 novembre 2008

Le dépistage du VIH par les LABM : Place des TDR 2008 : environ 2850 LABM ayant déclaré à l’Afssaps pratiquer le dépistage des Ac anti-VIH % de résultats rendus dans les LABM par catégorie de tests (source DEEQ, opérations 08VIR1/ 06VIR1) : Avril 2008 Evolution / 2006 Test d’agglutination 2,1% - 1,7 % Tests rapides 21,5% + 0,9 % Test ELISA Ac 27,9% - 0,8 % Test combiné Ag-Ac 48,5% + 1,6 %

Le dépistage du VIH par les LABM : Place des TDR dans le double test Répartition des techniques dans le double dépistage (source 08VIR1) : T. Aggl TDR T. Ac T. Ag-Ac N.A. (arrêté du 28/04/2003) 1,3 % 3 % 9,7 % 33 % 2,5 % 40 % 10,5 % 86,5 %

Le marché des TDR en France (novembre 2008) NOM Fabricant Distrib. Matrices Core HIV 1/2 Core Diagn. (UK) 2004 S Determine HIV 1-2 Unipath Ltd (UK) 1998 S, P, ST Doublecheck II HIV 1/2 Orgenics Ltd (Is) 1999 S, P ImmunoComb II HIV1+2 Bispot 1994 Immunoflow HIV1-HIV2 2007 INSTI HIV-1 HIV-2 Biolytical (Ca) Oraquick Advance rapid HIV 1/2 antibody test Orasure (US) 2008 P, ST, Sal Retocheck HIV Qualpro Diagn. (In) Retroscreen HIV VIKIA HIV Biomerieux (Fr) S : sérum / P : plasma / ST : sang total capillaire ou veineux / Sal : prélèvement gingival

Etudes Afssaps de performances des TDR VIH : Déroulement 1ère phase : Performances en laboratoire et praticabilité : Objectifs : Etudier les performances des TDR VIH sur des échantillons sériques. Evaluer la praticabilité des tests Experts : F. Barin, J. Izopet, TD. Ly, F. Simon Déroulement : déc. 2007 – jan. 2008 2eme phase : Corrélation entre les matrices de prélèvement : Objectifs : Etude de la corrélation entre salive / sang total capillaire / sérum ou plasma Lieu : SMIT Pr JM Molina, Hôpital St Louis / Pr F. Simon Déroulement : nov. 2008- fév. 2009

Réactifs inclus dans première phase Tous les tests rapides marqués CE et présents sur le marché français fin 2007 : 8 tests Core HIV 1/2 Determine HIV 1-2 Doublecheck II HIV 1/2 ImmunoComb II HIV1+2 Bispot Immunoflow HIV1-HIV2 INSTI HIV-1 HIV-2 Retroscreen HIV VIKIA HIV

Protocole d’étude Etude des performances : Panel d’échantillons sériques (TD Ly, L. Maisonneuve, F. Simon / P. Palmer) 94 positifs (tests de dépistage et de confirmation positifs) : 46 B, 41 non-B et CRF, 2 VIH-1 O, 5 VIH-2 6 primo-infections : tests de dépistage positifs, profil WB avec réactivité probable (ANAES 2000) 50 négatifs Panels commerciaux de séroconversion : Zeptometrix 12007, HIV9032, HIV9079 Evaluation de la praticabilité en conditions « hors laboratoire »

Résultats panel d’échantillons sériques (1) Taux d’échec des essais : Contrôle interne : 7 réactifs sur 8 : aucun échec Doublecheck II : 10 tests invalides (spot contrôle -) sur des échantillons positifs forts (phénomène connu et précisé dans la notice du réactif)  dilution de l’échantillon Migration de l’échantillon : problèmes pour 3/1200 essais Spécificité : 7/8 réactifs : aucun faux positif 1 échantillon faussement positif avec Determine HIV 1-2

Résultats panel d’échantillons sériques (2) Sensibilité diagnostique VIH-1 sous types B : Aucun résultat faussement négatif sur 46 échantillons VIH-1 sous-types non B (n=41) : 1 échantillon sous-type A : négatif pour 3/8 réactifs (Core, Immunoflow, Retroscreen) VIH-1 groupe O (n=2) : 1 faux négatif avec 1 réactif :Core VIH-2 : Aucun faux négatif parmi les 5 échantillons / réaction croisée HIV-1/HIV-2 pour les 3 réactifs permettant de différentier les virus.

Echantillons de séroconversion Echantillons de séroconversion du panel sérique Reconnaissance des 6 échantillons (minimum gag +/- pol) Taux global de reconnaissance de 53 à 76% pour les échantillons commerciaux (per-séro + séro) Résultats obtenus lors des contrôles réalisés par l’Afssaps (2005-2007) : 30-68% (per-séro + séro) (Tests ELISA et ELISA combinés : 70-96%)

Résultats étude de praticabilité dans le cadre d’une utilisation hors laboratoire (1) Utilisation des tests par des professionnels de santé Utilisation hors laboratoire : 10 TDR, mais seulement 4 pouvant être utilisés hors laboratoire (à partir d’échantillons de sang total capillaire ou « salivaire ») : Determine HIV 1-2 : pour l’instant système de prélèvement et tampon pour sang total « en option » INSTI HIV-1 HIV-2 : kits individuels avec système de prélèvement de sang capillaire. Oraquick Advance rapid HIV ½ antibody test : kit individuel avec système de prélèvement « salivaire » et sang total capillaire. Vikia HIV : kits individuels avec système de prélèvement de sang capillaire en préparation.

Résultats étude de praticabilité dans le cadre d’une utilisation hors laboratoire (2) Présentation générale : Conditionnement : unitaire possible pour les 4 produits, sauf Determine (x10) Conservation à température ambiante Péremption : généralement à 12 mois, sauf Oraquick : 6 mois Notices d’utilisation : Adaptées à un usage par des biologistes Limites des tests clairement exprimées Schéma concernant le prélèvement pour 3 des 4 réactifs Schéma d’interprétation des résultats pour les 4 réactifs disponibles

Nombre d’opérations (1) Résultats étude de praticabilité dans le cadre d’une utilisation hors laboratoire (3) Réalisation du test Nombre d’opérations (1) Lecture Determine <1’ 1 15’ - 60’ INSTI 1’ 4 Immédiat - 5’ Oraquick 1 (salive) 2 (sang capillaire) 20’ – 40’ Vikia 30’ 1 – hors prélèvement / lecture

Conclusions Etudes réalisées dans le cadre du travail de la HAS sur l’évolution du dépistage VIH. Recommandations CNS : « Elargir, après évaluation de leurs performances par les autorités compétentes, l’utilisation des tests rapides sanguins …. »  Bonne performance générale en ce qui concerne les échantillons positifs sériques.  Différences importantes de sensibilité sur les échantillons de séroconversion entre les TDR Praticabilité dans le cadre d’une utilisation par des professionnels de santé, hors LABM : Seuls 3 tests (+ Oraquick) utilisables hors laboratoire Différences dans la mise en œuvre des tests

Perspectives Nécessité de poursuivre l’évaluation sur des échantillons de sang total capillaire + salive = seconde phase de l’étude Afssaps (en cours) 4 tests inclus dans l’étude 200 patients séropositifs VIH Professionnels de santé hors LABM Place des TDR combinés Ag / Ac arrivant sur le marché Evaluation des nouveaux tests sang total arrivant sur le marché ?