AG 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Florence Buseyne ANRS-EP38-IMMIP AG 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Florence Buseyne F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

ANRS-EP38-IMMIP Inclusions et caractéristiques des sujets 93 patients inclus Février 2007-Février 2009 prélèvement sanguin unique Infection périnatale par le VIH-1 >15 ans Statut thérapeutique inchangé depuis au moins 6 mois Age médian : 17 ans (15-24) 57% Filles 85% HAART, dont 75% ARN VIH <80 copies/ml 66% CD4 > 500 cellules/µl F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

ANRS-EP38-IMMIP : Objectifs Naissance --------- >15 ans Clinique Traitement CD4 Virus Le statut immunitaire et virologique actuel Analyses univariées : Wilcoxon/Spearman ou Pearson Analyses multivariées : régression linéaires F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

Différentiation des lymphocytes T (CD4 et CD8) Périphérie Tissus lymphatiques Moelle osseuse Thymus Mémoire Naive Naive Mémoire Mémoire Naive Antigène Mémoire Mémoire Naive Naive Destruction VIH La taille du compartiment T naif  est liée à la diversité du répertoire et la capacité des lymphocytes T à contrôler de nouvelles infections F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Méthode : analyse des cellules du sang périphérique par cytométrie en flux central naive effecteur Adapté de Maecker, NRI, 2012 F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Les proportions de lymphocytes T CD4 naifs sont préservées chez les sujets de l’étude «Témoin » : intra-laboratoire, adultes non infectés VIH et non infectés VHC «Témoin » : Littérature CD4 Médiane (10-90th) CD8 Médiane (10-90th) IMMIP 15-24 ans 56 (37-70) 31 (15-56) Non infectés  (US 12-18 ans) 51 (31-65) 56 (42-73) CD4 Médiane (25-75th) CD8 IMMIP 15-24 ans 56 (44-64) 31 (22-45) Non infectés (US Adultes) 50 (41-58) 52 (41-59) F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Shearer, JACI, 2003 Roederer, JCI, 1995

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Les proportions de lymphocytes T CD4 et CD8 naifs sont corrélés au nombre de lymphocytes T CD4 F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Les proportions de lymphocytes T CD4 et CD8 naifs ne sont pas liées à l’âge/durée d’infection par le VIH Pas d’association avec l’âge au nadir de CD4, ni avec l’âge à l’initiation des HAART F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

Différentiation des lymphocytes T CD4 et CD8 et les infections virales VIH Mémoire Naive Mémoire Mémoire Antigène Naive Mémoire CMV Mémoire Naive Naive Destruction VIH VIH Les infections par le VIH et le CMV induisent une diminution des % de lymphocytes T naifs chez l’adulte F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Les proportions de lymphocytes T CD8 naifs sont diminués chez les sujets ayant une réplication active du VIH et chez les sujets co-infectés par le CMV F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Les proportions de lymphocytes T CD4 naifs ne sont pas diminués chez les sujets ayant une réplication active du VIH et chez les sujets co-infectés par le CMV Résultat paradoxal lien CD4 chez les sujets de l’étude Littérature adultes Mildvan JID 2004 F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

Suite de la présentation Histoire de la maladie et lymphocytes naifs → Analyses stratifiées selon ARN VIH plasmatique au moment du prélèvement (interactions) Présentation limitée : → aux sujets dont l’ARN VIH était < 80 copies/ml au moment du prélèvement → aux lymphocytes T CD4 F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Les proportions de lymphocytes T CD4 naifs sont positivement corrélés avec la virémie cumulée au cours des 10 ans précédant le prélèvement Sujets ARN VIH < 80 copies/ml au moment du prélèvement F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Les % de lymphocytes T CD4 naifs sont plus élevés chez les sujets ayant des virus X4R5 Tropisme génétique =virus « archivé » Virus X4R5/R5 : Stades avancés de la maladie (déplétion CD4) Plus infectieux pour les lymphocytes T CD4 naifs que les virus R5 Sujets ARN VIH < 80 copies/ml au moment du prélèvement F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Les % de lymphocytes T CD4 naifs ne sont pas liés à la sévérité clinique/immunologique de la maladie Sujets ARN VIH < 80 copies/ml au moment du prélèvement F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

Les % de lymphocytes T CD4 naifs « émigrants thymiques récents » Kohler, Blood 2009 L’expression de la molécule CD31 définit deux populations de lymphocytes T CD4 naifs Le % de lymphocytes T CD4 naifs CD31+ parmi les lymphocytes naifs est un marqueur de l’activité thymique PBMC congelés, n=57, cytométrie en flux F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Les % de lymphocytes T CD4 naifs « émigrants thymiques récents » sont plus élevés chez les sujets ayant un ARN VIH plasmatique détectable <15 ans :80-95% 20-30 ans : 60-80% Kimmig JEM 2002 Tous les sujets de l’étude F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Les % de lymphocytes T CD4 naifs « émigrants thymiques récents » sont positivement corrélés au nombre de lymphocytes T CD4 = %CD4 naifs Sujets ARN VIH < 80 copies/ml au moment du prélèvement F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Les % de lymphocytes T CD4 naifs « émigrants thymiques récents » sont négativement corrélés à l’immunosuppression antérieure, ne sont pas liés à l’histoire virologique antérieure ≠ %CD4 naifs Sujets ARN VIH < 80 copies/ml au moment du prélèvement F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

Analyses multivariées Sujets ARN VIH indétectable-%CD4 naifs Naive T CD4 (% among CD4 lymphocytes) Estimate [ 95% CI] P Age 15-17 years 18-19 years 20-24 years Reference 2.7 -2.4 [-4.8;10.3] [-11.0;6.2] 0.54 CD4 cell count Per 100 cells/µl 1.7 [0.40;3.99] 0.01 Viral tropism X4R5 R5 -9.9 [-16.4;-3.5] 0.004 Cumulative viremia (10 yrs) Per 1000 log10 copie x days 0.90 [-0.12;1.93] 0.08 F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

Analyses multivariées Sujets ARN VIH indétectable-%CD4 RTE (% among naive CD4) Estimate [ 95% CI] P Age 15-17 years 18-19 years 20-24 years Reference -2.4 -1.1 [-6.4;1.6] [-5.5;3.4] 0.47 CD4 cell count Per 100 cells/µl 0.93 [0.21;1.65] 0.01 Lifetime duration of CD4% <15% Per 100 months -5.7 [-10.3;-1.1] 0.02 Sex Male Female 4.5 [1.0;8.0] Plasma IL-10 (100x per pg/ml) 1.3 [-0.2;2.9] 0.09 F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Conclusions Les proportions de lymphocytes T CD4 naifs et l’activité thymique (%RTE) → Sont positivement corrélées au nombre de lymphocytes T CD4 (≈adultes) Li CID 2011 → Ne sont pas diminuées/sont augmentées par la réplication du VIH (≠ adultes) Comparaison sujets ARN VIH détectable/indétectable Histoire virologique chez les sujets ARN VIH indétectable (%CD4 naifs) Interprétation : chez les sujets de l’étude IMMIP, la destruction des lymphocytes T CD4 par la réplication du VIH est compensée par une production accrue de lymphocytes T CD4 naifs Décrit chez l’enfant infecté Saitoh JID 2006 Décrit chez certains adultes (<40 ans) et avant immunosuppression sévère McCune JCI 1998, Gautier JVirol 2007 Nobile Blood 2004 F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Discussion Maintien d’une activité thymique élevée et de proportions de lymphocytes T CD4 naifs préservées avec ou sans suppression de la réplication virale → Résultat remarquable compte tenu des caractéristiques des sujets IMMIP médiane 17 ans après l’infection, nadir %CD4 = 8% (5-11) Puberté : début involution du thymus (Mackall, NEJM, 1995) → Chez les sujets IMMIP : Equilibre virologique/immunologique a des caractéristiques « pédiatriques », déjà observé via l’absence d’association ADN VIH-CD4 si réplication est supprimée (Avettand-Fenoel, JID, 2012) → Un bémol : Chez les sujets avec suppression de la réplication virale, la proportion de RTE est négativement corrélée à la durée d’immunosuppression sévère → Une inconnue : combien de temps cette activité thymique élevée va-t-elle durer? → Work in progress : impact des autres mécanismes immunologiques (activation, homéostasie, …) F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Remerciements INSERM U1018 Y. Benmebarek N. Bouallag-Bonnet J. Lechenadec J. Warszawski ANRS M. Trumeau L. Marchand Sites hospitaliers ANRS-CO-10 S. Blanche, F. Veber, M.C. Mourey A. Chacé, M. Bonnard C. Dollfus, G. Vaudre G. Firtion, N. Boudjoudi M. Levine, A. Faye, C. Poder, S. Leveillé A. May J.P.Viard, A. Maignan C. Floch-Tudal S. Lemerle V. Jeantils, S. Tassi Laboratoire de virologie-EA3620 U. René Descartes V. Avettand-Fenoel C. Rouzioux Institut Pasteur de Paris UPIPV puis EPVO F. Buseyne C. Clairet P. Louche T. Montange Y. Rivière URIR C. Didier D. Scott-Algara Support financier ANRS Fondation AREVA F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Acknowledgments The present work was supported by the « Agence Nationale de la Recherche sur le SIDA et les Hépatites » and the « Fondation AREVA ». We thank all patients who agreed to participate in this study. Institution and investigators of the ANRS-EP38-IMMIP study were : Pédiatrie-néonatologie Hôpital Louis Mourier, Colombes (Floch-Tudal Corinne) ; Gynécologie-Obstétrique, Groupe Hospitalier Cochin Tarnier-Port-Royal (Firtion Ghislaine) ; Pédiatrie-Centre Hospitalier Intercommunal, Créteil (Lemerle Sophie) ; Pédiatrie-Centre Hospitalier Intercommunal, Villeneuve Saint-Georges (Chace Anne) ; Immuno-Hématologie Pédiatrique, Groupe Hospitalier Necker (Blanche Stéphane, Veber Florence) ; Pédiatrie-Centre Hospitalier Sud-Francilien, Evry (May Adrien) ; Maladies Infectieuses Hôpital Jean Verdier, Bondy (Jeantils Vincent) ; Onco-Hématologie Pédiatrique Hôpital Trousseau (Dollfus Catherine) ; Pédiatrie-Hôpital Robert Debré (Levine Martine, Faye Albert) ; Immunologie clinique adulte-Groupe Hospitalier Necker (Viard Jean-Paul). We are grateful to Sandrine Leveillé ( Hôpital Robert Debré), Geneviève Vaudre (Hôpital Trousseau), Sylvie (Hôpital Jean Verdier), Nora Boudjoudi (Hôpital Port Royal) and Marie-Christine Mourey (Hôpital Necker). K.M. Kean, a native English speaker, has verified the English language of the text.

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F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Les % de lymphocytes T CD4 naifs « émigrants thymiques récents » sont plus élevés chez les filles Sujets ARN VIH < 80 copies/ml au moment du prélèvement F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre