BIOLOGIE DU LUPUS Pr Zahir AMOURA Service de Médecine Interne (Pr Piette), Hôpital Pitié-Salpétrière, Paris e-mail: zahir.amoura@psl.ap-hop-paris.fr

Intérêts de la biologie - diagnostic positif et différentiel - extension de la maladie - réponse thérapeutique

Examens spécifiques

Les Anticorps AntiNucléaires

Les Anticorps AntiNucléaires Examen de Dépistage Anticorps anti-immunoglobulines humaines marqués à la fluorescéine Sérum du patient NOYAU

Les Anticorps AntiNucléaires - Intérêt diagnostique +++ (99% LS) - Faible spécificité (Dg différentiel) - Pas d ’intérêt pour le suivi - Eliminer inducteurs

Les Anticorps Anti-ADN double brin - dépistage +/- fluorescence homogène AAN - 3 méthodes de détection directe > Immunoprécipitation (test de Farr) > IFI sur Crithidia luciliae > ImmunoEnzymatique (ELISA)

Les Anticorps Anti-ADN double brin Test de Farr Antigène Marqué (ADN double brin)  Radioactivité globale + Sérum du patient Précipitation des Complexes Immuns Centrifugation Radioactivité proportionnelle à Nbre de CI proportionnelle à Nbre Ac

Les Anticorps Anti-ADN double brin Test de Farr > Gold standard pour anti-ADN - Haute spécificité - Faible Sensibilité - Résultat quantitatif - Corrélation avec activité du LS - Titres élevés corrélés avec risque de Gnite - Méthode isotopique - Intérêt pour suivi (poussées) - Moins d ’intérêt pour le diagnostic

Les Anticorps Anti-ADN double brin IFI sur Crithidia luciliae

Les Anticorps Anti-ADN double brin IFI sur Crithidia luciliae - Dépendant de l ’opérateur +++ - Sensibilité et spécificité difficiles à déterminer - Opérateur expérimenté: Sensible - Assez spécifique - Proche du Farr - Résultats semi-quantitatifs

Les Anticorps Anti-ADN double brin ELISA Substrat chromogénique de l’enzyme Anticorps anti -immunoglobulines humaines couplés à un enzyme Sérum du patient ADN adsorbé au fond de microplaques

Les Anticorps Anti-ADN double brin ELISA - Très (trop) sensible - Peu spécifique - Résultats quantitatifs - Intérêt pour le diagnostic (sf situations à risque) - Peu d ’intérêt pour le suivi

Les Anticorps Anti-ADN double brin Utilisation en Pratique - 60 à 80% des LS - Surtout qd LS actif (Farr) - Intéressant pour le diagnostic (ELISA) si contexte EVOCATEUR - Intéressant pour le suivi (Farr)

Les Anticorps Anti-Nucléosomes

Les Anticorps Anti-Nucléosomes -ELISA - 80 à 90 % des LS - Bonne spécificité des taux élevés - LS sans anticorps anti-ADN (10 à 30 % selon stade) - LS actifs (80-100 %) mais aussi inactifs (60%) - Corrélés à d’activité du LS. - Associés à néphrite lupique

Les Anticorps Anti-Histones Immuno-Empreinte ou ELISA Spécificité dépend de la pureté des préparations d’histones. Peu spécifiques Lupus induits : 96 à 100% Lupus spontanés: 20 à 80 %. Non spécifiques des lupus induits Peu d’intérêt diagnostique

Les Anticorps Anti-RiboNucléoprotéines

Les Anticorps Anti-Sm - dépistage +/- AAN fluorescence mouchetée - 3 méthodes de détection > Immunodiffusion > Immunoempreinte (western blot) > ELISA ou dot

Les Anticorps Anti-Sm Immunodiffusion Arc de précipitation correspondant aux complexes formés par le sérum et l’antigène Sm Sm SSB Sérum SSA RNP Arc de précipitation correspondant aux complexes formés par le sérum et l’antigène SSA

Les Anticorps Anti-Sm ImmunoEmpreinte Après migration, certaines protéines sont reconnues par le sérum du patient. Ces anticorps fixés sont révélés par un 2nd anticorps fixé à un enzyme.

Les Anticorps Anti-Sm - Hautement spécifiques du LS - 30% des LS (ELISA) - Plus fréquent chez les noirs et les asiatiques - Présence constante - Intérêt diagnostique - Pas d ’intérêt pour le suivi

Les Anticorps Anti-SSA et SSB - Peu spécifique du LS (SGS, PR) - 30% des LS - Présence constatnte - Lupus Subaigu - Lupus néonatal (100%) > 1% des grossesses avec SSA > 15-20% récidive -anti-SSB: 20% LS et Lupus néonatal

Les Anticorps Anti-Ribosome P - 10 -20% des LS - spécifiques du LS - accrue chez asiatiques - lupus neuro psy (?) - atteinte hépatique (?)

Les Anticorps Anti-Phopholipides

Les Anticorps Anti-Phopholipides 3 méthodes de détection - ELISA: très sensible - Anticoagulant Circulant - TPHA négatif - VDRL positif - 30 à 40% des lupus - Grossesse lupique - il faut une thrombose !!!

Le complément - Surtout la fraction C3 - Spécifique (Osler) - Corrélé à l ’activité LS stt Gnite prolif - C4A et C4B Q0

Examens non spécifiques

Biologie Standard - Créatininémie - Protéinurie - ECBU - bandelette urinaire (éducation)

Hémogramme - Anémie hémolytique avec Coombs + - Leuconeutropénie - Lymphopénie (sans CT)

Marqueurs Inflammatoires - VS: bof !! - CRP NORMALE sf sérite et Infection - Hypergammaglobulinémie poly - déficit en IgA

LS si ≥ 4 critères, consécutifs ou simultanés Critères ACR de classification du lupus systémique 1. Rash Malaire 2. Lupus Discoïde 3. Photosensibilité 4. Ulcérations Orales 5. Polyarthrite 6. Sérites 7. Atteinte rénale 8. Atteinte neurologique 9. Atteinte hématologique 10. Anti-ADN, Sm, APL 11. Anticorps antinucléaires LS si ≥ 4 critères, consécutifs ou simultanés