MUTANTS HEPATITE B M-J Carles RHEVIR 2005

MUTANTS HEPATITE B Erreur de réplication de la RT Utilisation de l’interféron Il existe Mutants « S » Il existe Mutants sur gène P Il existe Mutants X-préX

STRUCTURE GENOME

MUTANTS HEPATITE B Mutants spontanés dus aux erreurs de la RT Pression de sélection : Réponse Immune spontanée: mutants C-préC Réponse immune induite par vaccination ou transmission passive d ’anti-Hbs Traitements utilisant analogues nucléosidiques ou nucléotidiques de la polymérase

MUTANTS HEPATITE B Erreur de réplication de la RT Utilisation de l’interféron Il existe Mutants « S » Il existe Mutants sur gène P Il existe Mutants X-préX

MUTANTS « S » Modification structurale de l’AgHBS Mutants dus à pression de sélection AgHBs négatif Anti-Hbc positif ADN négatif

MUTANTS « S » AgHBs = protéine de 226 aa déterminant antigénique majeur: déterminant « a » position 124 à 147 Mutations les plus fréquentes: F134 M133 D144 G145R 144 et 145 connues pour être associées à échappement au Ig ou vaccin

Mutants « a » N H R T G V N Q L S A P M W T H A F S P T D T R P K R T C K C C T C C R T C D T

MUTANTS « S » Variants « S » émergent sous effet de pression de sélection: Réponse immunitaire naturelle Réponse induite par vaccination Action thérapeutique: Ig ou lamivudine Variants décrits chez: Enfants vaccinés Transplantés hépatiques ayant reçu des Ig Porteurs chroniques à infection occulte Porteurs chroniques traités par lamivudine

MUTANTS « S » Surtout étudiés en Asie et Afrique prévalence 2 à 28% Espagne: 16%: Eschevaria 2005 France: 55 séquences (Paul Brousse): 31 substitutions dans région hydrophile(56%) 134:7 133:6 144:6 145:6 16 patients (29%) : mutations entraînant modification propriétés physico-chimiques donc défaut diagnostic A.M Roque-Afonso path bio juin 2005

Diagnostic mutants « S » problème de détection par techniques de dépistage :Ac dirigés contre région hydrophile et en particulier « a » meilleure approche: mélange d ’Ac monoclonaux Recherche de l’ADN viral Présence simultanée de L ’Ac et L ’Ag Hbs

MUTANTS S Modification structurale de l’AgHBS AgHBs négatif ou positif Anti-Hbc positif ADN négatif

Mutants C/ pré-C N’expriment plus AgHBc dans les hépatocytes Mutants de résistance à l’interféron AgHBe positif Anti-HBe négatif ADN B positif

Mutants C/ pré-C Mutation pré-C: codon stop: Absence de synthèse d ’Ag Hbe Mutations dans région BCP: Diminution de synthèse de l ’Ag Hbe Présence d ’anti-Hbe Persistance d ’une réplication virale: ADN positif Transaminases élevées Progression de la maladie hépatique

D’après F. ZOULIM Virology of Hepatitis B 2004

Mutants C/ pré-C Plusieurs profils: Réplication constante avec transaminases élevées Réplication avec fluctuation des transaminases Variations dans la réplication virale avec poussées cytolytiques et rémissions qui peuvent durer plusieurs mois

Mutants C/ pré-C Prévalence: 22% il y a 10 ans, 43% a l ’heure actuelle Type de mutation dépendant du génotype Associés à des hépatites fulminantes Virus échappe à la réponse immune Plus fort risque d ’évolution vers la cirrhose A suivre par ADN et ALAT tous les 3 à 6 mois

Mutants C/ pré-C N’expriment plus AgHBc dans les hépatocytes Mutants de résistance à l’interféron AgHBe positif Anti-HBe négatif ADN B positif

MUTATIONS DE RESISTANCE au traitement Mutation sur le gêne C Mutation sur le gêne P (polymérase) Sont rares avec lamivudine Résistance croisée entre différentes molécules Mee par augmentation de la charge virale en suivi de traitement

Traitements Interféron + peg –interféron Analogues nucléosidiques: Lamivudine :3TC Emtricitabine: Emtriva Adefovir: Hepsera Tenofovir: Viread clevudine entecavir

Terminal protein spacer Pol/RT RNaseH 1 183 349 (rt1) 692 (rt344) 845 a.a. GVGLSPFLLA YMDD I(G) II(F) A B C D E LAM L180M M204V/I/S L801 V173L N236T ADV A181V I169T M250V ETV S184G M202I LdT M204I TDF V1911I A194T

Domaine C contient motif YMDD= site catalytique de l ’enzyme mutation YMDD : la + fréquente , mutation de résistance a la lamivudine, emtricitabine Pas de résistance croisée entre les différents nucléosidiques et nucléotidiques

Incidence des résistances Lamivudine: 24% en 1 an 70% en 4 ans Adefovir 15% en 4 ans ceci en monothérapie Intérêt des bi ou trithérapie????

MUTATIONS DE RESISTANCE au traitement Mutation sur le gêne C Mutation sur le gêne P(polymérase) Sont rares avec lamivudine Résistance croisée entre différentes molécules Mee par augmentation de la charge virale en suivi de traitement

CONCLUSION Evolution permanente des techniques pour mee des virus qui échappent à réponse immune ou aux traitements Importance de la biologie moléculaire dans le diagnostic de ces variants