Intracellular Route of Canine Parvovirus Entry M.Vihinen-Ranta, A.Kalela, P.Makinen, L.Kakkola, V.Marjomaki, M.Vuento Journal of Virology, 1998

Canine Parvovirus, CPV Parvovirose canine très contagieuse Gastro-entérite et myocardite Parvoviridae, petit virus à ADN simple brin de 5kb non enveloppé 2 sous-types Entrée du virus via des récepteurs spécifiques Passage dans compartiments acide pour initier l’infection Décapsidation et réplication dans le noyau

Objectif de l’étude Étudier la voie d’endocytose impliquée dans l’infection à parvovirus 2 approches : Facteurs bloquants le transport lors de l’endocytose Traitement par nocodazole, agent dépolymérisant les microtubules permettant le passage du virus des endosomes précoces aux tardifs Réduction de la température à 18°C Micro-injection de CPV dans le cytoplasme Localisation des antigènes viraux par immunofluorescence

Traitement par nocodazole Sans traitement, pénétration du CPV dans le noyau et synthèse de protéines virales Avec nocodazole, formation de vésicules cytoplasmiques L’infection à CPV est bloquée par le nocodazole quand administration dans l’heure Le nocodazole affecte la phase membranaire de l’endocytose Inhibition totale de la synthèse d’ADN

Effet de la température 90 mn 24h Formation de vésicules cytoplasmiques Inhibition de la synthèse d’ADN à 18°C 37°C T 0 Réversibilité de l’infectivité de CPV à 37°C L’acheminement des CPV des endosomes précoces aux tardifs périnucléaires est dépendant des microtubules. Les microtubulles sont nécessaires à l’infection par CPV

Microinjection de CPV dans le cytoplasme +Prétraitement acide des CPV 60 mn 20 h 20 h CPV éparpillés dans le cytoplasme Inhibition totale de la synthèse d’ADN Chloroquine Absence de chloroquine CPV dans le noyau, synthèse protéique Les particules virales sont incapables d’initier l’infection sans utilisation de la voie d’endocytose

Conclusion Le CPV entre dans la cellule via des récepteurs spécifiques Formation de petites vésicules puis fusion en vésicules plus grandes Transport du CPV des endosomes précoces aux tardifs par les vésicules de transport est dépendant des microtubules Le passage des CPV dans les endosomes(pH acide) tardifs est indispensable Après, passage des CPV dans d’autres structures? Un pH acide est nécessaire mais pas suffisant (présence d’autres facteurs?) pour initier l’infection